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PCR-Mastermix

(50 μl final reaction volume each containing 2.5 U Taq DNA-Polymerase), sufficient for 200 reactions, kit of 1 (2 components), suitable for PCR

• Synonym(e): PCR
• UNSPSC Code: 41106300
• NACRES: NA.54

Eigenschaften

• usage: sufficient for 200 reactions, (50 μl final reaction volume each containing 2.5 U Taq DNA-Polymerase)
• feature: dNTPs included, hotstart: no
• packaging: kit of 1 (2 components)
• manufacturer/tradename: Roche
• technique(s): PCR: suitable, whole genome amplification: suitable
• input: purified DNA
• storage temp.: −20°C

Beschreibung

General description

Der PCR-Mastermix enthält alle für die Durchführung einer Standard-PCR erforderlichen Reagenzien. Es müssen nur noch DNA-Template, Primer und die erforderliche Wassermenge hinzugegeben werden. Der PCR-Mastermix enthält eine feste MgCl₂-Konzentration von 1,5 mM. Höhere Konzentrationen können durch Zugabe von zusätzlichem MgCl₂ erzielt werden. Die mit dem PCR-Mastermix generierten PCR-Produkte haben 3′-A-Überhänge. Deshalb kann eine T/A-Klonierung angewendet werden.
Der PCR-Mastermix ist bei +2 bis +8 °C stabil, was eine sofortige PCR ohne zeitraubendes Auftauen der Reagenzien ermöglicht.

Routine-Assays haben mittelgroße Amplikons und einen GC-Gehalt von 50 %. Taq DNA Polymerase hat keine Heißstart- oder Korrekturlesefunktion. Sie ist bei +75 °C und einem pH-Wert von 9 optimal aktiv. Die 5′ → 3′ DNA-Polymerase hat keine 3′ → 5′ Exonuklease-Aktivität. Bei dem thermostabilen Enzym handelt es sich um eine einzelne Polypeptidkette mit einem Molekulargewicht von etwa 95 kD.
Fehlende Restriktionsendonuklease:
Dem ursprünglich aus T. aquaticus BM isolierten Enzym fehlt die Taq-I-Restriktionsendonuklease-Aktivität.

Application

Der PCR-Mastermix kann anstelle der als Einzelreagenz erhältlichen Taq-DNA-Polymerase oder anstelle des PCR Core-Kits für fast alle einfachen Routine-Polymerase-Kettenreaktionen verwendet werden. Die einzige Beschränkung ist, dass das Probenvolumen nicht mehr als die Hälfte des gesamten Reaktionsvolumens ausmachen darf. Der PCR-Mastermix wird verwendet für:

• Routine-PCR
• RT-PCR
• Andere Primer-Extensionsreaktionen wie Sequenzierung und Markierung

Features and Benefits

• Zuverlässige und reproduzierbare Ergebnisse:

Hohe Konsistenz zwischen den Chargen.

• Praktisch:

Für das Zugeben des Template und Primers sind nur zwei Pipettierschritte erforderlich.

• Vermeiden von PCR-Verschleppungen

Der Einbau von dUTP in Kombination mit Uracil-DNA-Glycosylase verhindert eine PCR-Kreuzkontamination.

• Gebrauchsfertig für die sofortige Verwendung:

Der Mastermix kann bei +2 bis +8 °C aufbewahrt werden.

Packaging

1 Kit mit 2 Komponenten.

Analysis Note

Jede Charge wird mittels PCR unter Verwendung von λDNA getestet. Jede Charge wird auch gemäß den aktuellen Qualitätskontrollverfahren auf das Fehlen von Exo- und Endonukleasen sowie auf Nicking-Aktivitäten getestet.

Other Notes

Nur für die Life-Science-Forschung. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren vorgesehen.

Legal Information

Die Verwendung dieses Produkts unterliegt US-Patentansprüchen und entsprechenden Patentansprüchen außerhalb der USA. Der Erwerb dieses Produkts umfasst eine beschränkte, nicht übertragbare Immunität gegenüber Rechtsschutzverfahren gemäß den oben genannten Patentansprüchen für den ausschließlichen Gebrauch dieser Menge des Produktes für eigene interne Forschungsanwendungen des Käufers. Es wird weder ausdrücklich noch implizit oder durch Rechtsverwirkung ein Rechtsanspruch unter anderen Patentsprüchen, ein Rechtsanspruch zur Erbringung kommerzieller Leistungen jeglicher Art übertragen, einschließlich, aber nicht beschränkt auf, das Berichten der Ergebnisse aus den Aktivitäten des Käufers gegen Entgelt oder andere kommerzielle Gegenleistungen. Dieses Produkt ist nur für Forschungszwecke vorgesehen. Diagnostische Verwendungen nach Roche-Patentansprüchen erfordern eine gesonderte Lizenz von Roche. Weitere Informationen zum Erwerb von Lizenzen erhalten Sie durch Kontaktaufnahme mit dem Direktor der Lizenzierungsabteilung, Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, California 94404, USA.</ br>HINWEIS AN DEN KÄUFER: BESCHRÄNKTE LIZENZ<br />Die Verwendung dieses Produkts unterliegt dem US-Patent Nr. 6,127,155 und den entsprechenden Patentansprüchen außerhalb der USA.  Der Erwerb dieses Produkts umfasst eine beschränkte, nicht übertragbare Immunität gegenüber Rechtsschutzverfahren gemäß den oben genannten Patentansprüchen für den ausschließlichen Gebrauch dieser Menge des Produktes für eigene interne Forschungsanwendungen des Käufers.  Es wird weder ausdrücklich noch implizit oder durch Rechtsverwirkung ein Rechtsanspruch unter anderen Patentsprüchen, ein Rechtsanspruch zur Erbringung kommerzieller Leistungen jeglicher Art übertragen, einschließlich, aber nicht beschränkt auf, das Berichten der Ergebnisse aus den Aktivitäten des Käufers gegen Entgelt oder andere kommerzielle Gegenleistungen.  Dieses Produkt ist nur für Forschungszwecke vorgesehen. Human- oder veterinärdiagnostische Verwendungen nach Roche-Patentansprüchen erfordern eine gesonderte Lizenz von Roche.  Alle anderen Verwendungen, die keine interne Forschung und keine human- und veterinärdiagnostische Verwendungen nach Roche-Patentansprüchen sind, erfordern eine gesonderte Lizenz von Thermo Fisher Scientific. Weitergehende Informationen zum Erwerb von Lizenzen von Roche erhalten Sie von der Lizenzabteilung von Roche Molecular Systems, Inc., 4300 Hacienda Drive, Pleasanton, California 94588, USA oder Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Straße 116, 68305 Mannheim, Deutschland.  Weitere Informationen zum Erwerb von Lizenzen von Thermo Fisher Scientific erhalten Sie von der Lizenzabteilung von  Thermo Fisher Scientific, 5791 Van Allen Way, Carlsbad, California 92008, USA.

Nur Kit-Komponenten

• PCR Master Mix (10 vials) 2x concentrated
• Water, PCR Grade (5 vials)

Sicherheitshinweise

• Lagerklasse: 12 - Non Combustible Liquids
• Was ist los?: WGK 1
• Flammpunkt (°F): does not flash
• Flammpunkt (°C): does not flash