Extração em Fase Sólida (SPE)

A extração em fase sólida (SPE) é uma técnica projetada para a preparação e purificação rápida e seletiva de amostras antes da análise cromatográfica (por exemplo, HPLC, GC, TLC). Na SPE, um ou mais analitos de uma amostra líquida são isolados por meio de extração, partição e/ou adsorção em uma fase estacionária sólida.  

A preparação de amostras por SPE transforma a matriz original da amostra em um ambiente de matriz mais simples. Isso torna a amostra mais adequada para a cromatografia analítica subsequente, muitas vezes simplificando e aprimorando a análise qualitativa e quantitativa final. A matriz mais simples da amostra também reduz a demanda sobre o sistema analítico, podendo prolongar a vida útil do sistema.

Um procedimento ideal de SPE permite que você:

• Alterar as matrizes das amostras para que sejam mais compatíveis com o método cromatográfico alvo.
• Concentrar analitos (enriquecimento de traços) para aumentar a sensibilidade.
• Remover interferências que causam alto ruído de fundo, picos enganosos e/ou baixa sensibilidade durante a análise cromatográfica.
• Proteger a coluna analítica contra contaminantes.
• Automatizar o processo de extração.

Como funciona a SPE?

Na SPE, a fase estacionária (um sorvente ou resina) liga-se ao analito ou à impureza por meio de interações fortes, porém reversíveis, para extrair de forma confiável e rápida o analito de interesse de uma amostra complexa.

A SPE é seletiva e versátil, pois há diversos sorventes e condições de eluição disponíveis para diferentes analitos e matrizes. Os sorventes comuns da SPE incluem:

• À base de sílica
  • Fase reversa (C18, C8, ciano, fenil)
  • Fase normal (sílica, diol, NH₂)
  • Troca iônica (SAX, WCX, SCX)
• À base de carbono
• À base de polímeros (várias composições, diferentes funcionalidades)
• Outros, por exemplo, Florisil® (silicato de magnésio) ou alumina
• Leito misto: combinações de praticamente qualquer um dos itens acima em camadas sequenciais

Estratégias para SPE

Na “SPE de ligação-eluição”, o analito de interesse é capturado pelo sorvente e as interferências da matriz passam pelo cartucho. Na “SPE de remoção de interferências”, as interferências da matriz são capturadas pelo sorvente e os analitos de interesse passam. Tanto o método HybridSPE quanto o QuEChERS SPE funcionam por meio da remoção de interferências.

O método ideal de SPE depende da estrutura, solubilidade, polaridade e propriedades lipofílicas (coeficientes de distribuição) do analito. Estão disponíveis guias de seleção para ajudar a escolher a fase estacionária e o solvente mais adequados para a aplicação em questão.

Aplicações comuns da SPE

A SPE é frequentemente utilizada nas indústrias farmacêutica, de testes diagnósticos clínicos e de alto rendimento, forense, ambiental e de alimentos/agroquímicos para análises relacionadas a:

• Compostos farmacêuticos e metabólitos em fluidos biológicos
• Substâncias de abuso em fluidos biológicos
• Poluentes ambientais na água potável e em águas residuais
• Pesticidas, antibióticos ou micotoxinas em matrizes alimentícias/agrícolas
• Desalinização de proteínas e peptídeos
• Fracionamento de lipídios
• Vitaminas hidrossolúveis e lipossolúveis