Análisis de la carga microbiana

 Fundamentos de los ensayos de carga microbiana

Los ensayos de carga microbiana, o ensayos microbianos, son un proceso de control de calidad que detecta y cuantifica la contaminación microbiana de un producto en diferentes etapas de la producción, es decir, desde la fabricación inicial hasta la distribución final. Un control de calidad eficaz y unos resultados de ensayo precisos son esenciales para minimizar los riesgos para los consumidores y son obligatorios en los entornos de producción regulados. Por lo tanto, el análisis de la carga microbiana suele incluirse en los ensayos rutinarios para garantizar la seguridad, la calidad y el cumplimiento normativo de cada lote de producto fabricado.

Los ensayos de carga microbiana se realizan en productos sanitarios, productos farmacéuticos, alimentos y bebidas, agua, envases, materias primas, tejidos humanos, tejidos animales y cosméticos. Cuando se siguen los métodos estándar que se describen a continuación, es importante garantizar que el método de ensayo no introduzca bacterias en la muestra de ensayo ni elimine las bacterias presentes en ella.

• Método de filtración por membrana para el análisis de la carga microbiana
• Métodos de siembra directa para el análisis de la carga microbiana
• Método del número más probable (MPN) para el análisis de la carga microbiana

Método de filtración por membrana para el análisis de la carga microbiana 

La filtración por membrana es el método de elección para productos que contienen sustancias antimicrobianas. En este método, la muestra se hace pasar a través de un filtro de membrana con un tamaño de poro de 0,45 µm. La membrana actúa como barrera y retiene los microorganismos de tamaño superior al de los poros de la membrana. Durante la filtración, se puede utilizar vacío para acelerar el proceso. A continuación, la membrana se transfiere a un medio de cultivo y se coloca en una incubadora durante al menos 5 días a una temperatura de 30-35 °C para la detección de bacterias y a 20-25 °C para la detección de hongos. El cultivo resultante se cuenta posteriormente para determinar los niveles de contaminación microbiana en la muestra. Deben tomarse las medidas adecuadas para evitar la contaminación cruzada que podría dar lugar a resultados falsos positivos.

Métodos de siembra directa para el análisis de la carga microbiana

Los métodos de siembra directa para el análisis de la carga microbiana incluyen los métodos de placa de vertido y de placa de extensión. Se prefiere el método de placa de vertido debido a su mayor precisión teórica. En este método, el medio de cultivo esterilizado se añade a una placa de Petri que contiene la muestra de ensayo y se deja solidificar. Por el contrario, en el método de placa de extensión, la muestra se añade a una placa de Petri que contiene un medio de cultivo estéril y solidificado. Independientemente del método, una vez añadida la muestra al sistema de cultivo, la placa se incuba y se realiza el recuento del cultivo resultante.

Método del número más probable (MPN) para el análisis de la carga microbiana

El método del número más probable (MPN) es un método cuantitativo utilizado para determinar la concentración bacteriana aproximada en una muestra. La solución o muestra original se subdivide por órdenes de magnitud (frecuentemente 10× o 2×) en caldo de cultivo y se evalúa la presencia o ausencia de microorganismos. El inconveniente del método MPN es que requiere un gran número de réplicas con la dilución adecuada para reducir los intervalos de confianza. Además, el método solo es eficaz para el análisis bacteriano y no proporciona resultados fiables para el recuento de hongos.