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Espressione genica e silenziamento genico

Sigma-Aldrich® Advanced Genomics è il fornitore leader di tecnologie per l'editing e il silenziamento genico, tra cui CRISPR, Cas9, RNA guida sintetico (sgRNA) e nucleasi a dito di zinco (ZFN).

La modulazione dell’espressione genica è una delle tecniche più potenti utilizzate dai ricercatori che studiano le complesse reti genetiche che regolano i processi biologici. In particolare, gli esperimenti di modulazione genica sono ampiamente impiegati per identificare terapie efficaci nella lotta contro malattie che vanno dal cancro ai disturbi dello sviluppo e alle patologie neurodegenerative.  

Esistono numerose tecnologie per la regolazione efficace dell’espressione genica nelle cellule e nei tessuti. L’RNAi (interferenza dell’RNA) è un meccanismo biologico naturale in cui i duplex di siRNA (RNA interferente corto) inducono un’inibizione potente e mirata dell’espressione genica. SigmaAldrich® Advanced Genomics è da tempo leader nello sviluppo di prodotti commerciali basati sull’RNAi destinati ai ricercatori. 

Più recentemente, lo sviluppo dell’inibizione CRISPR (CRISPRi) e dell’attivazione CRISPR (CRISPRa) offre ai ricercatori una nuova e potente serie di strumenti che consente opzioni di regolazione genica pressoché illimitate. Avvalendosi dell’ineguagliabile portafoglio di prodotti CRISPR di SigmaAldrich® Advanced Genomics, i ricercatori sono in grado di sopprimere, inattivare, attivare o sovraesprimere in modo accurato ed efficiente praticamente qualsiasi gene.

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Schema che illustra il meccanismo di silenziamento genico mediato da shRNA e siRNA nelle cellule.

Schema che illustra il meccanismo di silenziamento genico mediato da shRNA e siRNA nelle cellule.

RNAi - Modulazione genica per far luce sui percorsi genetici

Gli screening di genomica funzionale sono parte integrante della ricerca di base, consentendo di svelare i meccanismi alla base dei sistemi biologici, dei percorsi e delle malattie. Un'analisi efficace di queste complesse reti di interazioni molecolari può essere ottenuta utilizzando librerie di shRNA per ottenere un knockdown affidabile, efficiente e a lungo termine.

Sigma-Aldrich® Advanced Genomics è il fornitore esclusivo delle collezioni TRC1.5 e TRC2 del Consorzio RNAi (TRC). Queste librerie di shRNA basate su lentivirus offrono una copertura senza pari e sono disponibili in diversi formati, tra cui il genoma completo, singoli cloni/vettori RNAi e set di famiglie geniche.

CRISPRi e CRISPRa: potente inibizione e attivazione genica

CRISPRi (interferenza CRISPR) e CRISPRa (attivazione CRISPR) garantiscono rispettivamente un silenziamento e un'attivazione dei geni altamente efficienti, senza alterare la sequenza di DNA sottostante. Quando vengono impiegati in screening su larga scala di tipo LOF (perdita di funzione) e GOF (guadagno di funzione), i ricercatori sono in grado di identificare vie geniche uniche, ma funzionalmente correlate, che spesso sfuggono con altri metodi.

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Schemi schematici di CRISPRa con il complesso Synergystic Activation Mediator (SAM) e di CRISPRi che utilizza il dominio KRAB.

Sigma-Aldrich® Advanced Genomics offre una suite completa di librerie CRISPRi e CRISPRa ottimizzate per esperimenti di knockdown e sovraespressione genica. Le librerie lentivirali CRISPRi in pool e SAM CRISPRa sono disponibili pronte all’uso o personalizzate in base alle vostre esigenze specifiche.

Vi state chiedendo se la tecnologia CRISPR sia adatta al vostro progetto? Contattate un esperto di Sigma-Aldrich® Advanced Genomics.

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