Analisi della carica batterica

 Nozioni fondamentali sui test di carica microbica

L'analisi della carica microbica, o analisi microbiologica, è un processo di controllo qualità che rileva e quantifica la contaminazione microbica di un prodotto nelle diverse fasi della produzione, ovvero dalla fabbricazione iniziale alla distribuzione finale. Un controllo qualità efficace e risultati accurati sono essenziali per ridurre al minimo i rischi per i consumatori e sono richiesti dagli ambienti di produzione regolamentati. Pertanto, l'analisi della carica microbica è spesso inclusa nei test di routine per garantire la sicurezza, la qualità e la conformità normativa di ogni lotto di prodotto fabbricato.

Le analisi della carica microbica vengono eseguite su dispositivi medici, prodotti farmaceutici, alimenti e bevande, acqua, imballaggi, materie prime, tessuti umani, tessuti animali e cosmetici. Quando si seguono i metodi standard descritti di seguito, è importante assicurarsi che il metodo di analisi non introduca batteri nel campione in esame né uccida i batteri presenti nel campione stesso.

• Metodo di filtrazione a membrana per l’analisi della carica batterica
• Metodi di semina diretta per l’analisi della carica batterica
• Metodo del numero più probabile (MPN) per l’analisi della carica batterica

Metodo di filtrazione a membrana per l'analisi della carica microbica 

La filtrazione a membrana è il metodo di elezione per i prodotti contenenti sostanze antimicrobiche. In questo metodo, il campione viene fatto passare attraverso un filtro a membrana con pori di 0,45 µm. La membrana funge da barriera e trattiene i microrganismi di dimensioni superiori a quelle dei pori della membrana. Durante la filtrazione, è possibile utilizzare il vuoto per accelerare il processo. La membrana viene quindi trasferita in un terreno di coltura e collocata in un incubatore per almeno 5 giorni a 30–35 °C per il rilevamento batterico e a 20–25 °C per il rilevamento fungino. La coltura risultante viene successivamente conteggiata per determinare i livelli di contaminazione microbica nel campione. È necessario adottare misure adeguate per evitare la contaminazione incrociata che potrebbe portare a risultati falsi positivi.

Metodi di semina diretta per l’analisi della carica microbica

I metodi di semina diretta per l’analisi della carica microbica includono il metodo a colata e quello a spalmatura. Il metodo a colata è preferibile per la sua maggiore accuratezza teorica. In questo metodo, il terreno di coltura sterilizzato viene versato in una piastra di Petri contenente il campione da analizzare e lasciato solidificare. Al contrario, nel metodo a spalmatura, il campione viene aggiunto a una piastra di Petri contenente terreno di coltura sterile e già solidificato. Indipendentemente dal metodo, dopo che il campione è stato aggiunto al sistema di coltura, la piastra viene incubata e la coltura risultante viene conteggiata.

Metodo del numero più probabile (MPN) per l’analisi della carica batterica

Il metodo del numero più probabile (MPN) è un metodo quantitativo utilizzato per determinare la concentrazione batterica approssimativa in un campione. La soluzione o il campione originale viene suddiviso per ordini di grandezza (spesso 10× o 2×) nel brodo di coltura e valutato per verificare la presenza o l’assenza di microrganismi. Lo svantaggio del metodo MPN è che richiede un gran numero di repliche alla diluizione appropriata per restringere gli intervalli di confidenza. Inoltre, il metodo è efficace solo per l’analisi batterica e non fornisce risultati affidabili per la conta dei funghi.