โครมาโทกราฟีชั้นบาง

ใน TLC เฟสคงที่คือชั้นวัสดุดูดซับที่บาง ซึ่งมักเป็นซิลิกาเจลหรือออกไซด์ของอลูมิเนียม ที่เคลือบบนพื้นผิวของแผ่นเฉื่อย ซึ่งโดยทั่วไปเป็นแก้ว พลาสติก หรืออลูมิเนียม ตัวอย่างถูกหยดลงที่ปลายด้านหนึ่งของแผ่น TLC และวางในแนวตั้งภายในห้องปิดที่มีตัวทำละลายอินทรีย์ (เฟสเคลื่อนที่) เฟสเคลื่อนที่เคลื่อนตัวขึ้นตามแผ่นด้วยแรงแคปิลารี และองค์ประกอบของตัวอย่างจะเคลื่อนที่ไปในระยะทางที่แตกต่างกันตามความชอบติดที่แตกต่างกันระหว่างเฟสคงที่และเฟสเคลื่อนที่ เมื่อตัวทำละลายถึงส่วนบนของแผ่น แผ่นจะถูกนำออกจากห้องพัฒนาและทำให้แห้ง องค์ประกอบที่แยกได้จะปรากฏเป็นจุดบนแผ่น และปัจจัยการกักเก็บ (Rf) ของแต่ละองค์ประกอบจะถูกประเมิน

กระบวนการและหลักการของ TLC

TLC อิงตามหลักการโครมาโทกราฟีแบบคลาสสิก ซึ่งส่วนประกอบของสารผสมถูกแยกออกจากกันระหว่างเฟสคงที่และเฟสเคลื่อนที่ของเหลว โดยอาศัยความชอบต่างกันระหว่างสองเฟส 

ปัจจัยการกักเก็บ (Rf) ใน TLC

ปัจจัยการกักเก็บ (Rf) ใช้เพื่อวัดการเคลื่อนที่ของสารประกอบตามแผ่น TLC Rf ถูกนิยามว่าเป็นระยะทางที่ส่วนประกอบแต่ละตัวเคลื่อนที่ไปหารด้วยระยะทางรวมที่ตัวทำละลายเคลื่อนที่ไป ค่าของมันอยู่ระหว่างศูนย์ถึงหนึ่งเสมอ

โดยทั่วไป ยิ่งสารประกอบจับตัวกับสารดูดซับในเฟสคงที่แน่นมากเท่าใด การเคลื่อนที่ขึ้นบนแผ่น TLC ก็จะยิ่งช้าลงเท่านั้น เนื่องจากสารดูดซับใน TLC มักเป็นสารที่มีขั้ว สารประกอบที่ไม่มีขั้วจึงมีแนวโน้มเคลื่อนที่ขึ้นบนแผ่นได้เร็วกว่า ส่งผลให้มีค่า Rf สูงขึ้น ในขณะที่สารประกอบที่มีขั้วมีแนวโน้มเคลื่อนที่ช้าลงและมีค่า Rf ต่ำกว่า

การประยุกต์ใช้ TLC

TLC ถูกใช้อย่างแพร่หลายในหลายอุตสาหกรรมและสาขาการวิจัย รวมถึงอุตสาหกรรมยา การทดสอบทางคลินิก พิษวิทยาสิ่งแวดล้อม การวิเคราะห์อาหาร น้ำ และสารกำจัดศัตรูพืช รวมถึงเครื่องสำอาง การประยุกต์ใช้ทั่วไปของ TLC ได้แก่:

• การวิเคราะห์สารตกค้างของยาและยาปฏิชีวนะในตัวอย่างอาหารและตัวอย่างสิ่งแวดล้อม
• การระบุและวัดปริมาณสี ส่วนผสม สารกันเสีย และสารให้ความหวานในผลิตภัณฑ์อาหารและเครื่องสำอาง
• การควบคุมคุณภาพและการทดสอบความบริสุทธิ์ของสูตรยา
• การคัดกรองอย่างรวดเร็วและปริมาณสูงก่อนการวิเคราะห์ด้วย HPLC
• การตรวจสอบการเสร็จสิ้นของปฏิกิริยาทางเคมี