การตรวจหาไมโคพลาสมาในอุตสาหกรรมยา
การปนเปื้อนไมโคพลาสมาเป็นปัญหาที่แพร่หลายและเกิดขึ้นซ้ำๆ ในระบบการเพาะเลี้ยงเซลล์หลายระบบ ทั้งในด้านการวิจัยวิทยาศาสตร์ชีวิตและอุตสาหกรรมยา ไมโคพลาสมาสามารถเจริญเติบโตจนมีระดับความเข้มข้นสูงในสื่อเพาะเลี้ยง โดยไม่แสดงอาการปนเปื้อนของแบคทีเรียทั่วไป เช่น ความขุ่นมัว ผลกระทบของไมโคพลาสมาต่อเซลล์ที่เพาะเลี้ยง ได้แก่ การเปลี่ยนแปลงกระบวนการเมแทบอลิซึม การเพิ่มจำนวนเซลล์ที่ช้าลง และความผิดปกติของโครโมโซม สรุปแล้ว การปนเปื้อนไมโคพลาสมาทำให้ความถูกต้องของข้อมูลในสายเซลล์ที่ได้รับผลกระทบและผลการวิจัยทางวิทยาศาสตร์ชีวภาพลดลง ซึ่งทำให้การตรวจหาไมโคพลาสมา และการรักษาวัฒนธรรมเซลล์ให้ปราศจากการปนเปื้อน จึงเป็นปัจจัยสำคัญในการวิจัยที่ใช้เซลล์เป็นพื้นฐาน และในการผลิตสินค้าที่สุขภาพของผู้บริโภคเป็นประเด็นสำคัญ
หมวดหมู่ที่แนะนำ
สื่อเพาะเลี้ยงจุลินทรีย์ คือส่วนผสมของสารต่าง ๆ ที่ช่วยส่งเสริมและสนับสนุนการเจริญเติบโตและการแยกตัวของจุลินทรีย์
การทดสอบความปลอดเชื้อเป็นส่วนสำคัญของกระบวนการตรวจสอบความถูกต้องสำหรับผลิตภัณฑ์ที่ผลิตตามมาตรฐาน GMP และอ้างว่าปลอดเชื้อ
รับประกันความปลอดภัย: การทดสอบไพโรเจนมีความสำคัญอย่างยิ่งสำหรับผลิตภัณฑ์ยาและอุปกรณ์ทางการแพทย์ การทดสอบการกระตุ้นโมโนไซต์ (MAT) สามารถตรวจหาเอ็นโดทอกซินและไพโรเจนที่ไม่ใช่เอ็นโดทอกซินได้
ค้นพบโซลูชันการตรวจสอบสิ่งแวดล้อมขั้นสูงและการจำลองกระบวนการปลอดเชื้อสำหรับการผลิตยา รับรองการปฏิบัติตามมาตรฐาน GMP ด้วยเครื่องมือและสื่อเฉพาะทางของเราสำหรับห้องสะอาด อิโซเลเตอร์ และระบบ RABS
บริการทดสอบความปลอดภัยทางชีวภาพ
บริการทดสอบความปลอดภัยทางชีวภาพเพื่อตรวจสอบแอนติบอดีชนิดโมโนโคลนัล (mAbs) รวมถึงวัสดุสำหรับการรักษาด้วยเซลล์และยีน และวัคซีน เพื่อรับรองว่าวัสดุเหล่านั้นปราศจากสารก่อโรคที่ไม่คาดคิดหรือผลลัพธ์ที่ไม่คาดหมาย ซึ่งอาจก่อให้เกิดความล้มเหลวอย่างรุนแรงในกระบวนการผลิตขั้นต่อไป รวมถึง: การทดสอบไมโคพลาสมา
เกี่ยวกับแบคทีเรียไมโคพลาสมา
ไมโคพลาสมาเป็นหนึ่งในแบคทีเรียที่เล็กที่สุดที่รู้จักกัน โดยสามารถผ่านตัวกรองที่มีขนาดรู 0.2 µm ได้ จุลชีพเหล่านี้เจริญเติบโตในสภาวะใช้ออกซิเจนหรือในสภาวะไม่ใช้ออกซิเจนแบบเลือกได้
ไมโคพลาสมาเป็นทั้งแบบปรสิตและแบบสลายซาก สิ่งมีชีวิตหลายชนิด เช่น M. pneumoniae เป็นเชื้อก่อโรค ซึ่งก่อให้เกิดโรคปอดบวมและโรคทางเดินหายใจอื่น ๆ ในมนุษย์ ส่วน M. genitalium เชื่อว่ามีส่วนเกี่ยวข้องกับโรคอักเสบในอุ้งเชิงกราน เนื่องจากเป็นแบคทีเรียที่ไม่มีผนังเซลล์ ไมโคพลาสมาจึงไม่ไวต่อเพนิซิลลินหรือยาปฏิชีวนะอื่น ๆ ที่ออกฤทธิ์ต่อโครงสร้างนี้ เพื่อรักษาความเสถียรของเยื่อหุ้มเซลล์ไซโทพลาซึม ไมโคพลาสมาส่วนใหญ่ต้องการสเตอรอล ซึ่งพวกมันดูดซึมจากสิ่งแวดล้อม โดยทั่วไปคือคอเลสเตอรอลจากสัตว์เจ้าบ้าน สายพันธุ์ไมโคพลาสมาหลายชนิดยังทนต่อยาปฏิชีวนะชนิดอื่น ๆ ได้อีกด้วย
เยี่ยมชมระบบค้นหาเอกสารของเราเพื่อค้นหาข้อมูลทางเทคนิค ใบรับรอง และเอกสารทางเทคนิค
แหล่งที่มาของการปนเปื้อนไมโคพลาสมา
แหล่งที่มาของการปนเปื้อนไมโคพลาสมาในห้องปฏิบัติการและในกระบวนการผลิตนั้นยากที่จะควบคุมได้มาก บางชนิดพบอยู่บนผิวหนังมนุษย์และสามารถเข้าสู่การเพาะเลี้ยงเซลล์ได้จากการปฏิบัติที่ไม่ได้มาตรฐานด้านความปลอดเชื้อ นอกจากนี้ ไมโคพลาสมาอาจถูกนำเข้ามาผ่านสารเสริมที่ปนเปื้อน เช่น เซรั่มจากทารกวัว หรือที่พบบ่อยที่สุดคือการแพร่กระจายจากวัฒนธรรมเซลล์อื่นที่ปนเปื้อน เมื่อวัฒนธรรมเซลล์ถูกปนเปื้อนด้วยไมโคพลาสมาแล้ว จุลชีพเหล่านี้สามารถแพร่กระจายได้อย่างรวดเร็วและปนเปื้อนพื้นที่อื่น ๆ ในห้องปฏิบัติการผ่านละอองลอยและอนุภาคที่เกิดขึ้นระหว่างการจัดการวัฒนธรรมเซลล์ การปฏิบัติตามหลักปฏิบัติด้านความปลอดเชื้อในห้องปฏิบัติการอย่างเคร่งครัดเป็นสิ่งสำคัญ และแนะนำให้ทำการทดสอบวัฒนธรรมเซลล์อย่างสม่ำเสมอ เพื่อควบคุมการปนเปื้อนของไมโคพลาสมาในพื้นที่การผลิตได้อย่างมีประสิทธิภาพ
ทำไมต้องทำการตรวจหาไมโคพลาสมาในอุตสาหกรรมยา?
โรงงานผลิตยาชีวเภสัชภัณฑ์ที่ใช้เซลล์ยูคาริโอตในการผลิตวัคซีนจำเป็นต้องตรวจสอบธนาคารเซลล์และล็อตเมล็ดไวรัส รวมถึงวัคซีนในปริมาณมาก เพื่อตรวจหาการปนเปื้อนจากไมโคพลาสมา สปีชีส์ในสกุลแบคทีเรียนี้สามารถติดเชื้อเซลล์ยูคาริโอต ทำให้การเจริญเติบโตและกระบวนการเมแทบอลิซึมของเซลล์ถูกรบกวน เมื่อไมโคพลาสมาแทรกแซงกระบวนการผลิตวัคซีน อาจส่งผลต่อคุณภาพและปริมาณโปรตีน และที่สำคัญกว่านั้น อาจก่อให้เกิดผลข้างเคียงในผู้ป่วยที่ได้รับวัคซีนผลิตภัณฑ์ขั้นสุดท้าย
การปนเปื้อนไมโคพลาสมาในไบโอรีแอคเตอร์สามารถก่อให้เกิดการสูญเสียเวลา วัสดุ และรายได้อย่างมาก หากไม่ได้รับการตรวจพบตั้งแต่ต้นในกระบวนการผลิต หากไม่มีขั้นตอนการทดสอบที่เข้มงวด การปนเปื้อนไมโคพลาสมาในล็อตการผลิตยาชีวเภสัชกรรมจะตรวจพบได้ยากมาก เนื่องจากความมีอยู่ของไมโคพลาสมาโดยทั่วไปไม่ก่อให้เกิดการเปลี่ยนแปลงค่า pH หรือความขุ่นที่มองเห็นได้ในสื่อเพาะเลี้ยง วิธีการทดสอบไมโคพลาสมาตามตำรายาประกอบด้วยการทดสอบทั้งการเพาะเลี้ยงและการทดสอบด้วยเซลล์ตัวชี้วัด หากใช้สื่อเพาะเลี้ยงเพียงสองชนิดในการวิเคราะห์ แนะนำให้ใช้สื่อ FREY และ FRIIS ร่วมกัน
วิธีการตรวจหาไมโคพลาสมา
การตรวจหาไมโคพลาสมาในผลิตภัณฑ์ชีวเภสัชภัณฑ์ วัคซีน การเพาะเลี้ยงเซลล์ และการเพาะเลี้ยงไวรัส เป็นสิ่งสำคัญที่ต้องดำเนินการในหลายขั้นตอนระหว่างการควบคุมคุณภาพ วิธีการตรวจสามวิธีที่นิยมใช้มากที่สุด ได้แก่:
- การเพาะเลี้ยงไมโคพลาสมา โดยนำตัวอย่างทดสอบมาเพาะเลี้ยงในสื่อเพาะเลี้ยงแบคทีเรียที่ปรับให้เหมาะสมกับไมโคพลาสมา
- วิธีสี DNA โดยใช้ Hoechst หรือ DAPI เพื่อสีตรงข้ามกับนิวเคลียสของไมโคพลาสมา และถ่ายภาพด้วยกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์
- PCR (ปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรส) เพื่อขยาย DNA ของแบคทีเรีย หากมีไมโคพลาสมาในตัวอย่าง
ขั้นตอนการทำงานในการตรวจหาไมโคพลาสมา ตาม EP 2.6.7 และ USP 63
* ในวันถัดไปหลังการเพาะเชื้อ ให้ทำการเพาะเชื้อต่อจากแต่ละสื่อเหลว โดยเพาะเชื้อ 0.2 mL ลงบนแผ่นสื่อแข็งอย่างน้อย 1 แผ่น สำหรับแต่ละสื่อแข็ง ทำซ้ำขั้นตอนนี้ระหว่างวันที่ 6 ถึงวันที่ 8 ทำซ้ำอีกครั้งระหว่างวันที่ 13 ถึงวันที่ 15 และทำซ้ำอีกครั้งระหว่างวันที่ 19 ถึงวันที่ 21 ของการทดลอง สังเกตสื่อเหลวทุก 2 หรือ 3 วัน และหากเกิดการเปลี่ยนแปลงสี ให้ทำการเพาะเชื้อต่อ
หมายเหตุ: นอกจากนี้ ต้องมีตัวอย่างควบคุมเชิงบวกและเชิงลบอย่างละหนึ่งตัวอย่างสำหรับแต่ละสื่อแข็งและสื่อเหลว โดยระยะเวลาการบ่มเพาะคือ 14 วัน
สื่อเพาะเชื้อพร้อมใช้สำหรับการตรวจหาไมโคพลาสมาตามมาตรฐานเภสัชตำรับ
เราจัดหาชุดผลิตภัณฑ์ครบถ้วนของสื่อเพาะเลี้ยงแบบเหลวและแบบแข็งที่พร้อมใช้งาน ซึ่งจำเป็นสำหรับการตรวจหาไมโคพลาสมาตามมาตรฐาน European Pharmacopoeia 6.1 (2.6.7.) และ USP 35 (63) โดยไม่ต้องผ่านขั้นตอนการเตรียมเพิ่มเติม สื่อเพาะเลี้ยงไมโคพลาสมาที่พร้อมใช้งานของเราช่วยรับประกันคุณภาพผลิตภัณฑ์ที่คงที่และสามารถติดตามแหล่งที่มาได้อย่างครบถ้วน พร้อมด้วยใบรับรองผลการวิเคราะห์เฉพาะแต่ละล็อต
เนื่องจากส่วนผสมที่ใช้ สื่อเพาะเลี้ยงไมโคพลาสมาโดยทั่วไปมีอายุการเก็บรักษาที่สั้นกว่ามากเมื่อเทียบกับสื่อเพาะเลี้ยงส่วนใหญ่ที่ใช้ในการควบคุมคุณภาพทางจุลชีววิทยา อายุการเก็บรักษาของสื่อเพาะเลี้ยง Friis, Frey และ Hayflick แบบเหลวและแบบแข็งที่พร้อมใช้งานของเราได้ถูกขยายออกไปเป็น 4 เดือนสำหรับแผ่นอาการ์ และ 6 เดือนสำหรับน้ำเลี้ยงเชื้อ ลองใช้สื่อเพาะเลี้ยงที่พร้อมใช้งานครบชุดของเราที่มีอายุการเก็บรักษายาวนานขึ้น เพื่อทำให้การทดสอบไมโคพลาสมาเป็นเรื่องที่ง่ายขึ้น
บทความที่เกี่ยวข้อง
- โปรโตคอลเพาะเลี้ยงเซลล์สำหรับการทดสอบสายเซลล์สำหรับการปนเปื้อนของ mycoplasma โดยใช้การย้อมสี DNA ทางอ้อมโดยใช้ Hoechst 33342
- Cell culture protocol for testing cell lines for mycoplasma contamination using isolation techniques. Free ECACC handbook download.
- ดูทั้งหมด (3)
ดูบทความอื่นๆ
เราสามารถช่วยได้อย่างไร
หากมีคำถามใดๆ โปรดส่งคำขอ
สนับสนุนลูกค้า หรือติดต่อทีมบริการลูกค้าของเรา:
อีเมล custserv@sial.com
หรือโทร +1 (800) 244-1173
การสนับสนุนเพิ่มเติม
- การค้นหาโครมาโตแกรม
ใช้ฟังก์ชันการค้นหาโครมาโตแกรมเพื่อระบุสารประกอบที่ไม่ทราบชื่อในตัวอย่างของคุณ
- เครื่องคิดเลขและแอป
Web Toolbox - เครื่องมือวิจัยทางวิทยาศาสตร์และทรัพยากรสำหรับการวิเคราะห์ทางเคมีวิทยาศาสตร์ชีวภาพการสังเคราะห์สารเคมีและวิทยาศาสตร์วัสดุ
- คำขอสนับสนุนลูกค้า
การสนับสนุนลูกค้ารวมถึงความช่วยเหลือเกี่ยวกับการสั่งซื้อผลิตภัณฑ์บัญชีและปัญหาทางเทคนิคของเว็บไซต์
- คำถามที่พบบ่อย
ดูส่วนคำถามที่มักถูกถาม (FAQ) ของเรา เพื่อหาคำตอบสำหรับคำถามที่มักถูกถามเกี่ยวกับผลิตภัณฑ์และบริการของเรา