Sàng lọc hệ gen chức năng
Bộ gen chức năng cho phép khám phá chức năng gen và tham gia vào các con đường sinh hóa, tế bào và sinh lý. Sự sẵn có của các trình tự bộ gen hoàn chỉnh, kết hợp với các công cụ có thể lập trình để sửa đổi bộ gen, cho phép các phân tích này được thực hiện trên quy mô toàn bộ bộ gen. Mục đích cơ bản của màn hình bộ gen là để hiểu sự xuất hiện của một kiểu hình cụ thể bằng cách sửa đổi chức năng gen theo một cách có mục đích, có mục đích. Khi các gen riêng lẻ bị xóa bỏ hoặc điều chế trong một tế bào hoặc sinh vật, những thay đổi về kiểu hình hoặc hành vi có thể được quan sát trực tiếp hoặc gián tiếp thông qua các thí nghiệm được lên kế hoạch cẩn thận. Sàng lọc hệ thống gen chức năng cho phép phân tích này được thực hiện theo cách có hệ thống và song song, làm sáng tỏ các con đường và trạng thái bệnh tật phức tạp và tạo điều kiện cho việc xác định mục tiêu thuốc mới.
Có hai cách cơ bản mà chức năng gen có thể liên kết di truyền với kiểu hình. Sàng lọc di truyền tiến liên quan đến việc sửa đổi nhiều gen, chọn cho các tế bào hoặc sinh vật có kiểu hình quan tâm, và sau đó xác định các gen mà sự điều chế đã kích hoạt sự thay đổi kiểu hình. Sàng lọc di truyền ngược phân tích kiểu hình của các tế bào hoặc sinh vật sau sự gián đoạn của một gen cụ thể hoặc sự kết hợp của các gen.
Featured Categories
Phân tích vi sinh vật đường ruột toàn diện: Khám phá một giải pháp toàn diện bao gồm chuẩn bị mẫu, sắp xếp trình tự, tin sinh học và thống kê. Từ năm 16S đến WGS.
Giải phóng sức mạnh của danh mục kỹ thuật và khoa học vật liệu của chúng tôi về vật liệu sinh học, vật liệu nano, năng lượng và vật liệu điện tử cho tất cả các ứng dụng nghiên cứu và công nghiệp của bạn.
Những tiến bộ trong chỉnh sửa gen, tắt gen, điều chế gen, trình tự thế hệ tiếp theo (NGS) và công nghệ sàng lọc kiểu hình cho phép thực thi hiệu quả màn hình bộ gen chức năng trong nhiều hệ thống mô hình.
- Can thiệp RNA (RNAi) : Một số loại thuốc thử RNAi có thể được sử dụng để tắt gen, bao gồm RNA sợi kép dài (dsRNA), RNA can thiệp nhỏ tổng hợp (siRNA) và RNA tóc ngắn (shRNA). Các thuốc thử RNAi này được giới thiệu đến các tế bào bằng cách chuyển đổi trực tiếp yếu tố điều biến (sRNA và dsRNA), bằng cách chuyển đổi DNA mã hóa một shRNA thúc đẩy, hoặc bằng phương pháp truyền virus bằng cách sử dụng cấu trúc lentivirus với cassette shRNA nhân bản. DsRNA và siRNA có thể được sử dụng trong các màn hình mảng để sàng lọc thông lượng cao, trong khi shRNA có thể được giới thiệu đến các quần thể tế bào trong các màn hình mảng hoặc gộp để phân tích thông lượng cao, với màn hình gộp sử dụng trình tự thế hệ tiếp theo (NGS) để giải mã.
- Hệ thống CRISPR (lặp lại palindromic ngắn thường xuyên xen kẽ) có thể được sử dụng để điều khiển bộ gen, phiên mã và biểu mô của các tế bào động vật có vú. Trong chỉnh sửa gen CRISPR-Cas9, một nuclease Cas9 được nhắm mục tiêu vào một locus cụ thể bằng cách sử dụng RNA hướng dẫn. Tùy thuộc vào biến thể Cas9 được sử dụng, CRISPR có thể được sử dụng để tắt tiếng sản xuất phiên mã di truyền bằng cách giới thiệu các đột biến dịch chuyển khung, ức chế máy móc phiên mã, tuyển dụng các yếu tố phiên mã để kích hoạt biểu hiện, gây ra đột biến điểm mục tiêu hoặc sửa đổi dấu ấn biểu sinh. Tương tự như RNAi, CRISPR có thể được giới thiệu trực tiếp dưới dạng phức hợp RNP trong màn hình mảng hoặc dưới dạng DNA plasmid hoặc lentivirus cho cả ứng dụng sàng lọc gộp và arrayed. Các kho, thư viện và mảng CRISPR tạo điều kiện đặc biệt linh hoạt, sàng lọc thông lượng cao của các gen để phân tích chức năng. Sàng lọc điều chế bộ gen cũng có thể với một hệ thống CRISPR không có nuclease sử dụng enzyme dCas9 không hoạt động kết hợp với các bộ hiệu ứng phiên mã kích hoạt (CRISPRa) hoặc ức chế phiên mã gen (CRISPRi), dẫn đến tăng hoặc giảm biểu hiện gen.
Truy cập phần tìm kiếm tài liệu của chúng tôi để tìm bảng dữ liệu, chứng chỉ và tài liệu kỹ thuật.
Bài viết liên quan
- Methods for lentiviral transduction of Jurkat cells were compared. Spinoculation was compared with overnight incubation with polybrene (hexadimethrine bromide) and fibronection-coated plates.
- CRISPR lentiviral screening libraries, partnered with 10x Genomics, offer powerful research tools for pooled screening.
- esiRNA are endoribonuclease prepared siRNAs that target the same mRNA sequence for gene silencing. Here are some of the most asked questions regarding esiRNA uses and availability.
- Sàng lọc toàn bộ gen với gRNA được tối ưu hóa cho mỗi gen đảm bảo loại trực tiếp cụ thể và hiệu quả, kiểm soát thời gian và chi phí.
- Một hộp lọc siêu lọc có thể được đặt ở đầu ra của một hệ thống lọc nước để cung cấp nước siêu tinh khiết không chứa nuclease.
- Xem tất cả (18)
Related Protocols
- Tìm hiểu về CRISPR Cas9, nội dung và cách thức hoạt động. CRISPR là một công cụ chỉnh sửa bộ gen mới, giá cả phải chăng cho phép truy cập vào chỉnh sửa bộ gen cho tất cả mọi người.
- Thủ tục chi tiết về cách thực hiện truyền lentivirus các hạt lentivirus NHIỆM VỤ để đạt được sự im lặng lâu dài và thay đổi kiểu hình ổn định.
- Lentiviruses represent a powerful tool in research applications to transduce a wide range of cell types.
- Determine optimal antibiotic concentration for stable cell lines, ensuring efficient selection in transduced cells.
- Xem tất cả (6)
Tìm thêm Bài viết và Giao thức
How Can We Help
Trong trường hợp có bất kỳ câu hỏi nào, vui lòng gửi yêu cầu hỗ trợ khách hàng
hoặc trao đổi với nhóm dịch vụ khách hàng của chúng tôi:
Email custserv@sial.com
hoặc gọi +1 (800) 244-1173
Additional Support
- Chromatogram Search
Use the Chromatogram Search to identify unknown compounds in your sample.
- Máy tính & Ứng dụng
Web Toolbox - các công cụ nghiên cứu khoa học và tài nguyên cho hóa học phân tích, khoa học sự sống, tổng hợp hóa học và khoa học vật liệu.
- Customer Support Request
Hỗ trợ khách hàng bao gồm trợ giúp về đơn hàng, sản phẩm, tài khoản và các vấn đề kỹ thuật của trang web.
- FAQ
Explore our Frequently Asked Questions for answers to commonly asked questions about our products and services.