Xét nghiệm Mycoplasma trong ngành dược phẩm
Sự nhiễm Mycoplasma là một vấn đề phổ biến và thường xuyên tái diễn đối với nhiều hệ thống nuôi cấy tế bào trong nghiên cứu khoa học đời sống và ngành công nghiệp dược phẩm. Mycoplasma có thể phát triển với nồng độ cao trong môi trường nuôi cấy mà không biểu hiện các dấu hiệu nhiễm vi khuẩn điển hình như độ đục. Tác động của chúng đối với tế bào nuôi cấy bao gồm sự thay đổi quá trình trao đổi chất, sự tăng sinh chậm lại và các dị thường nhiễm sắc thể. Tóm lại, nhiễm Mycoplasma làm suy giảm tính xác thực của dữ liệu từ các dòng tế bào bị ảnh hưởng cũng như kết quả nghiên cứu khoa học đời sống. Điều này khiến việc kiểm tra Mycoplasma và do đó việc duy trì các dòng tế bào nuôi cấy không bị nhiễm trở thành yếu tố cơ bản đối với nghiên cứu dựa trên tế bào cũng như trong sản xuất các sản phẩm mà sức khỏe người tiêu dùng là mối quan tâm hàng đầu.
Các danh mục nổi bật
Môi trường nuôi cấy vi sinh vật là hỗn hợp các chất có tác dụng thúc đẩy và hỗ trợ sự phát triển cũng như quá trình biệt hóa của vi sinh vật.
Thử nghiệm vô trùng là một phần thiết yếu trong quá trình xác nhận đối với các sản phẩm được sản xuất theo tiêu chuẩn GMP và được khẳng định là vô trùng.
Đảm bảo an toàn: Thử nghiệm pyrogen là yếu tố quan trọng đối với dược phẩm và thiết bị y tế. Thử nghiệm kích hoạt bạch cầu đơn nhân (MAT) giúp phát hiện endotoxin và các chất gây sốt không phải endotoxin.
Khám phá các giải pháp tiên tiến về giám sát môi trường và mô phỏng quy trình vô trùng dành cho sản xuất dược phẩm. Đảm bảo tuân thủ GMP nhờ các công cụ và môi trường chuyên dụng của chúng tôi dành cho phòng sạch, buồng cách ly và hệ thống RABS.
DỊCH VỤ KIỂM TRA AN TOÀN SINH HỌC
Dịch vụ kiểm tra an toàn sinh học nhằm đánh giá các kháng thể đơn dòng (mAbs), liệu pháp tế bào và gen, cũng như các nguyên liệu vắc-xin để đảm bảo chúng không chứa các tác nhân ngoại lai hoặc kết quả bất thường có thể gây ra sự cố nghiêm trọng trong quá trình xử lý tiếp theo, bao gồm: Kiểm tra Mycoplasma.
Giới thiệu về vi khuẩn Mycoplasma
Mycoplasma là một trong những loại vi khuẩn nhỏ nhất được biết đến, có thể đi qua các bộ lọc có kích thước lỗ 0,2 µm. Các vi sinh vật này phát triển trong môi trường hiếu khí hoặc trong điều kiện kỵ khí tùy ý.
Mycoplasma có thể là ký sinh hoặc phân hủy. Một số loài, ví dụ như M. pneumoniae, là tác nhân gây bệnh, gây viêm phổi và các rối loạn hô hấp khác ở người. M. genitalium được cho là liên quan đến các bệnh viêm vùng chậu. Là vi khuẩn không có thành tế bào, mycoplasma không nhạy cảm với penicillin hoặc các loại kháng sinh khác tác động lên cấu trúc này. Để ổn định màng tế bào chất, hầu hết các loài Mycoplasma cần sterol, chất mà chúng hấp thu từ môi trường xung quanh, thường là cholesterol từ vật chủ động vật. Nhiều chủng Mycoplasma cũng có khả năng chịu đựng được nhiều loại kháng sinh khác.
Hãy truy cập công cụ tìm kiếm tài liệu của chúng tôi để xem các bảng dữ liệu, chứng chỉ và tài liệu kỹ thuật.
Nguồn gây nhiễm Mycoplasma
Các nguồn gây nhiễm Mycoplasma trong phòng thí nghiệm và trong quá trình sản xuất rất khó kiểm soát. Một số loài Mycoplasma tồn tại trên da người và có thể xâm nhập vào các mẫu nuôi cấy do thực hành vô trùng không đúng cách. Ngoài ra, Mycoplasma có thể xâm nhập qua các chất bổ sung bị nhiễm bẩn, chẳng hạn như huyết thanh bò thai, hoặc phổ biến nhất là do lây truyền từ các mẫu nuôi cấy tế bào khác đã bị nhiễm bẩn. Một khi môi trường nuôi cấy tế bào đã chứa Mycoplasma, các vi sinh vật này có thể lây lan nhanh chóng và gây ô nhiễm các khu vực khác trong phòng thí nghiệm thông qua các hạt khí dung và hạt bụi được tạo ra trong quá trình xử lý môi trường nuôi cấy. Việc tuân thủ nghiêm ngặt các quy trình vô trùng tốt trong phòng thí nghiệm là yếu tố then chốt, và việc kiểm tra định kỳ các môi trường nuôi cấy được khuyến nghị mạnh mẽ để kiểm soát hiệu quả ô nhiễm Mycoplasma trong các khu vực sản xuất.
Tại sao cần xét nghiệm Mycoplasma trong ngành dược phẩm?
Các cơ sở sản xuất dược phẩm sinh học sử dụng tế bào nhân thực để sản xuất vắc-xin phải kiểm tra ngân hàng tế bào, lô hạt giống virus cũng như vắc-xin thô để phát hiện sự nhiễm Mycoplasma. Các loài thuộc chi vi khuẩn này lây nhiễm vào tế bào nhân thực, làm gián đoạn quá trình sinh trưởng và trao đổi chất của chúng. Khi Mycoplasma can thiệp vào quá trình sản xuất vắc-xin, điều này có thể ảnh hưởng đến chất lượng và năng suất protein, và quan trọng hơn là gây ra tác dụng phụ cho bệnh nhân khi tiêm vắc-xin thành phẩm.
Sự nhiễm Mycoplasma trong bình phản ứng sinh học có thể dẫn đến tổn thất đáng kể về thời gian, nguyên liệu và doanh thu nếu không được phát hiện sớm trong quá trình sản xuất. Nếu không có các quy trình kiểm tra nghiêm ngặt, việc phát hiện sự nhiễm Mycoplasma trong các lô sản xuất dược phẩm sinh học là cực kỳ khó khăn vì sự hiện diện của Mycoplasma thường không gây ra sự thay đổi pH hoặc độ đục trực quan trong môi trường nuôi cấy. Phương pháp thử nghiệm Mycoplasma theo dược điển bao gồm cả nuôi cấy và thử nghiệm tế bào chỉ thị để phát hiện. Nếu chỉ sử dụng hai loại môi trường để phân tích, nên sử dụng kết hợp môi trường FREY và FRIIS.
Các phương pháp xét nghiệm Mycoplasma
Việc xét nghiệm mycoplasma đối với các sản phẩm sinh dược phẩm, vắc-xin, nuôi cấy tế bào và nuôi cấy virus tại các giai đoạn khác nhau trong quá trình kiểm soát chất lượng là rất quan trọng. Ba phương pháp xét nghiệm phổ biến nhất là:
- Nuôi cấy Mycoplasma, trong đó môi trường nuôi cấy vi khuẩn được tối ưu hóa cho Mycoplasma được cấy mẫu thử
- Phương pháp nhuộm DNA, trong đó nhân của mycoplasma được nhuộm đối chứng bằng Hoechst hoặc DAPI và quan sát bằng kính hiển vi huỳnh quang
- PCR (phản ứng chuỗi polymerase) để khuếch đại DNA vi khuẩn nếu có sự hiện diện của mycoplasma trong mẫu
Quy trình phát hiện vi khuẩn Mycoplasma theo tiêu chuẩn EP 2.6.7 và USP 63
* Trong những ngày sau khi cấy vi sinh vật, tiến hành cấy lại từng môi trường lỏng bằng cách cấy 0,2 mL lên ít nhất 1 đĩa của mỗi loại môi trường rắn. Lặp lại quy trình này vào khoảng ngày thứ 6 đến ngày thứ 8, tiếp theo là khoảng ngày thứ 13 đến ngày thứ 15 và lần nữa vào khoảng ngày thứ 19 đến ngày thứ 21 của thí nghiệm. Quan sát các môi trường lỏng cứ sau 2 hoặc 3 ngày và nếu có sự thay đổi màu sắc, tiến hành cấy lại.
Lưu ý: Ngoài ra, cần có một mẫu đối chứng dương tính và một mẫu đối chứng âm tính cho mỗi loại môi trường rắn và lỏng, với thời gian ủ là 14 ngày.
Môi trường nuôi cấy sẵn sàng sử dụng để phát hiện Mycoplasma theo Dược điển
Chúng tôi cung cấp bộ sản phẩm đầy đủ các môi trường nuôi cấy lỏng và rắn sẵn sàng sử dụng, đáp ứng yêu cầu phát hiện Mycoplasma theo Dược điển Châu Âu 6.1 (2.6.7.) và USP 35 (63). Không cần bất kỳ bước chuẩn bị nào thêm, các môi trường nuôi cấy Mycoplasma sẵn sàng sử dụng của chúng tôi đảm bảo chất lượng sản phẩm ổn định và khả năng truy xuất nguồn gốc đầy đủ kèm theo chứng chỉ phân tích cụ thể cho từng lô.
Do thành phần của chúng, môi trường nuôi cấy Mycoplasma thường có thời hạn sử dụng ngắn hơn nhiều so với hầu hết các loại môi trường nuôi cấy khác dùng cho kiểm soát chất lượng vi sinh. Thời hạn sử dụng của các môi trường nuôi cấy lỏng và rắn Friis, Frey và Hayflick sẵn sàng sử dụng của chúng tôi đã được kéo dài lên 4 tháng đối với đĩa agar và 6 tháng đối với dung dịch nuôi cấy. Hãy trải nghiệm dòng sản phẩm đầy đủ các môi trường nuôi cấy sẵn sàng sử dụng với thời hạn sử dụng dài hơn để việc kiểm tra Mycoplasma trở nên dễ dàng hơn.
Các bài viết liên quan
- Cell culture protocol for testing cell lines for mycoplasma contamination using isolation techniques. Free ECACC handbook download.
- Cell culture protocol for testing cell lines for mycoplasma contamination using indirect DNA staining using Hoechst 33342.
- Xem tất cả (2)
Xem thêm các bài viết khác
Chúng tôi có thể hỗ trợ quý khách như thế nào?
Nếu có bất kỳ thắc mắc nào, vui lòng gửi yêu cầu
hỗ trợ khách hàng hoặc liên hệ với đội ngũ dịch vụ khách hàng của chúng tôi:
Gửi email đến custserv@sial.com
hoặc gọi đến số +1 (800) 244-1173
Hỗ trợ bổ sung
- Tìm kiếm sắc ký đồ
Sử dụng tính năng Tìm kiếm sắc ký để xác định các hợp chất chưa biết trong mẫu của bạn.
- Máy tính & Ứng dụng
Web Toolbox - các công cụ nghiên cứu khoa học và tài nguyên cho hóa học phân tích, khoa học sự sống, tổng hợp hóa học và khoa học vật liệu.
- Yêu cầu hỗ trợ khách hàng
Hỗ trợ khách hàng bao gồm trợ giúp về đơn hàng, sản phẩm, tài khoản và các vấn đề kỹ thuật của trang web.
- Câu hỏi thường gặp
Hãy tham khảo phần Câu hỏi thường gặp của chúng tôi để tìm câu trả lời cho những thắc mắc phổ biến về các sản phẩm và dịch vụ của chúng tôi.