MIRRT

MystiCq^® microRNA-cDNA-Synthese-Mischung

• Synonym(e): microRNA cDNA Synthesis Mix
• NACRES: NA.55
• UNSPSC Code: 12352200

Eigenschaften

• technique(s): cDNA synthesis: suitable, whole genome amplification: suitable
• shipped in: wet ice
• storage temp.: −20°C

Beschreibung

General description

Bei Verwendung von Gesamt-RNA, vorangereicherten Proben oder microRNAs als Ausgangsbasis enthält das MystiCq^®-microRNA-cDNA-Synthesemischungs-Kit alle notwendigen Komponenten zur Umwandlung von reifen microRNA in cDNA-Matrizen für qPCR. Da microRNA nicht von Natur aus polyadenyliert sind, besteht der erste Schritt im cDNA-Syntheseprozess darin, die microRNA durch eine Poly(A)-Polymerase-Reaktion zu polyadenylieren. Anschließend werden ReadyScript für die reverse Transkriptase, ein Oligo-dT-Adapter-Primer und andere erforderliche Reagenzien zugegeben, um die polyadenylierten microRNA in cDNA umzuwandeln. Der Adapter-Primer enthält am 5‘-Ende eine einzigartige Sequenz, die komplementär für die Sequenz des MysticCq Universal PCR-Primers ist, eine weitere Komponente des MystiCq-microRNA-qPCR-Assay-Systems. Das Kit enthält außerdem einen Positivkontrolle-Primer, der für SNORD44 spezifisch ist, eine kleine nukleäre RNA, die verbreitet in den meisten menschlichen Geweben exprimiert wird. Das Kit enthält ausreichende Mengen des Poly(A)-Tailing-Puffers und des MicroRNA-cDNA-Reaktionsgemisches, um die Verwendung von Kontrollreaktionen ohne Poly(a)-Polymerase und reverse Transkriptase (NRT) zu ermöglichen. Zur Analyse einzelner microRNA den MystiCq-Universal-PCR-Primer (der sich gegen die Adapterprimer-Sequenz richtet) zusammen mit dem MystiCq-microRNA-qPCR-Assay-Primer und dem MystiCq^®-microRNA-SYBR^™-Green-qPCR ReadyMix^™ verwenden.

Application

MystiCq^® microRNA cDNA-Synthesemischung wird für die Erststrang-cDNA-Synthese durch die reverse Transkription von miRNA für die quantitative Polymerase-Kettenreaktion (qPCR) ausgehend von Gesamt-RNA eingesetzt

Features and Benefits

• Da die Polyadenylierung und die reverse Transkription in getrennten Schritten erfolgen, kann das Protokoll bei Bedarf optimiert werden
• Die hergestellte cDNA kann zur künftigen Verwendung archiviert werden
• Eine einzelne RT-Reaktion kann bis zu 1000 qPCR-Reaktionen liefern
• Enthält einen Positivkontrollprimer zur Verwendung mit den meisten Humangeweben

Packaging

Das Standardreaktionsvolumen ist 20 μL

Legal Information

SYBR is a trademark of Thermo Fisher Scientific or its subsidiaries

MystiCq is a registered trademark of QIAGEN Beverly Inc.

ReadyMix is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC

Nur Kit-Komponenten

• Poly (A) Tailing Buffer (5X)
• Human Positive Control Primer
• Nuclease-free Water
• MystiCq^® Universal PCR Primer
• Poly (A) Polymerase
• microRNA cDNA Reaction Mix
• ReadyScript^® Reverse Transcriptase

Sicherheitshinweise

• Lagerklasse: 10 - Combustible liquids