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Sobre este item
NACRES:
NA.55
UNSPSC Code:
41106300
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sufficient for 500 reactions, sufficient for 5000 reactions
feature
hotstart, dNTPs included
manufacturer/tradename
Roche
packaging
pkg of 500 x 20 μL reactions (04673484001), pkg of 5000 x 20 μL reactions (04673492001)
technique(s)
RT-qPCR: suitable, qPCR: suitable, whole genome amplification: suitable
input
purified DNA
detection method
probe-based
General description
FastStart SYBR Green Master; Instruções de uso
A FastStart™ SYBR™ Green Master é uma mistura de reação hot start pronta para uso sem ROX para reação em cadeia da polimerase quantitativa (qPCR) e transcrição reversa (RT)-qPCR em sistemas de PCR em tempo real, exceto instrumentos LightCycler®. Esta mistura-mestre simplifica o preparo de reações para detecção e análise de DNA. Em combinação com um instrumento de PCR em tempo real, primers de PCR adequados e uma sonda de hidrólise, a FastStart™ TaqMan® Probe Master permite a detecção muito sensível e quantificação de sequências de DNA definidas.
O SYBR™ Green I é um corante específico para DNA dupla-fita. Durante cada fase da síntese de DNA, o corante SYBR™ Green I, que é incluído na mistura de reação, se liga aos produtos de PCR amplificados. O amplicon pode ser detectado por sua fluorescência.
Demonstrou-se que os protocolos hot start melhoram significativamente a especificidade, a sensibilidade e o rendimento da PCR. Grupos bloqueadores termoinstáveis em alguns resíduos de aminoácidos da Taq DNA polimerase FastStart™ tornam a enzima modificada inativa em temperatura ambiente. Portanto, não há alongamento durante o período quando os primers podem se ligar de maneira inespecífica. A Taq DNA polimerase FastStart™ é ativada por meio da remoção dos grupos bloqueadores em uma temperatura alta (ou seja, uma etapa de pré-incubação a +95 °C).
A FastStart™ Universal SYBR™ Green Master (Rox) pode ser usada para amplificação e detecção de qualquer alvo de DNA ou cDNA, inclusive aqueles com alto teor de GC ou AT. No entanto, para cada alvo, é necessário adaptar seu protocolo de detecção às condições de reação do seu instrumento de PCR em tempo real específico e desenvolver primers de PCR específicos para cada alvo.
Combine esta mistura-mestre com o kit de síntese de cDNA Transcriptor First Strand para obter excelentes resultados em qRT-PCR em duas etapas.
A FastStart™ SYBR™ Green Master é uma mistura de reação hot start pronta para uso sem ROX para reação em cadeia da polimerase quantitativa (qPCR) e transcrição reversa (RT)-qPCR em sistemas de PCR em tempo real, exceto instrumentos LightCycler®. Esta mistura-mestre simplifica o preparo de reações para detecção e análise de DNA. Em combinação com um instrumento de PCR em tempo real, primers de PCR adequados e uma sonda de hidrólise, a FastStart™ TaqMan® Probe Master permite a detecção muito sensível e quantificação de sequências de DNA definidas.
O SYBR™ Green I é um corante específico para DNA dupla-fita. Durante cada fase da síntese de DNA, o corante SYBR™ Green I, que é incluído na mistura de reação, se liga aos produtos de PCR amplificados. O amplicon pode ser detectado por sua fluorescência.
Demonstrou-se que os protocolos hot start melhoram significativamente a especificidade, a sensibilidade e o rendimento da PCR. Grupos bloqueadores termoinstáveis em alguns resíduos de aminoácidos da Taq DNA polimerase FastStart™ tornam a enzima modificada inativa em temperatura ambiente. Portanto, não há alongamento durante o período quando os primers podem se ligar de maneira inespecífica. A Taq DNA polimerase FastStart™ é ativada por meio da remoção dos grupos bloqueadores em uma temperatura alta (ou seja, uma etapa de pré-incubação a +95 °C).
A FastStart™ Universal SYBR™ Green Master (Rox) pode ser usada para amplificação e detecção de qualquer alvo de DNA ou cDNA, inclusive aqueles com alto teor de GC ou AT. No entanto, para cada alvo, é necessário adaptar seu protocolo de detecção às condições de reação do seu instrumento de PCR em tempo real específico e desenvolver primers de PCR específicos para cada alvo.
Combine esta mistura-mestre com o kit de síntese de cDNA Transcriptor First Strand para obter excelentes resultados em qRT-PCR em duas etapas.
Application
A FastStart™ SYBR™ Green Master foi usada em qPCR e qRT-PC em duas etapas no formato de detecção de SYBR™ Green I. Ela também pode ser usada:
Use a FastStart™ SYBR™ Green Master com qualquer instrumento de qPCR em tempo real, exceto os instrumentos LightCycler®.
- em reação em cadeia da polimerase quantitativa (qPCR) para quantificação do título de vírus adenoassociado (AAV)
- em qPCR para determinar o nível de expressão de diferentes genes Col6a1-3 em relação à gliceraldeído 3-fosfato desidrogenase (GAPDH)
- em reação em cadeia da polimerase quantitativa em tempo real (qRT-PCR) de mRNA do receptor 1 de estrogênio acoplado à proteína G (GPER)
- em qRT-PCR para estudos de expressão gênica
Use a FastStart™ SYBR™ Green Master com qualquer instrumento de qPCR em tempo real, exceto os instrumentos LightCycler®.
Features and Benefits
- Melhore a especificidade e a sensibilidade da PCR:
- Evite a superestimação de resultados de qPCR:
- Amplifique e detecte uma ampla gama de alvos de DNA e cDNA:
- Use qualquer instrumento de PCR em tempo real, exceto os instrumentos LightCycler®:
- Economize tempo e esforço no preparo de qPCR:
- Evite falsos positivos resultantes de contaminação por transferência:
Analysis Note
Teste de função: Todos os lotes são testados quanto ao seu desempenho em qPCR usando três moldes: um com alto teor de GC, um com alto teor de AT e um molde longo (cerca de 440 pb).
Other Notes
Alvos de qPCR
Em princípio, a FastStart SYBR Green Master pode ser usada para amplificação e detecção de qualquer alvo de DNA ou cDNA, inclusive aqueles com alto teor de GC ou AT. No entanto, para cada alvo, você precisa:
Vide recomendações gerais no manual do operador do seu instrumento de PCR em tempo real.
Duas formas disponíveis
A mistura-mestre está disponível em duas formas – uma que contém o corante de referência ROX e outra sem ROX.
Prevenção da contaminação por transferência
Esta mistura-mestre contém dUTP, que será incorporado nos produtos de PCR para ajudar a evitar falsos positivos resultantes de contaminação por transferência. Em PCRs subsequentes, você pode adicionar uracil-DNA glicosilase para degradar quaisquer contaminantes por transferência contendo uracila (produtos de amplificação de PCRs anteriores).
qRT-PCR
Combine esta mistura-mestre com o nosso kit de síntese de cDNA Transcriptor First Strand para qRT-PCR em duas etapas. Este kit fornece excelentes resultados e funciona de forma eficiente com todos os instrumentos de PCR em tempo real.
Em princípio, a FastStart SYBR Green Master pode ser usada para amplificação e detecção de qualquer alvo de DNA ou cDNA, inclusive aqueles com alto teor de GC ou AT. No entanto, para cada alvo, você precisa:
- adaptar seu protocolo de detecção às condições de reação do seu instrumento de PCR em tempo real e
- desenvolver primers de PCR específicos para o alvo.
Vide recomendações gerais no manual do operador do seu instrumento de PCR em tempo real.
Duas formas disponíveis
A mistura-mestre está disponível em duas formas – uma que contém o corante de referência ROX e outra sem ROX.
Prevenção da contaminação por transferência
Esta mistura-mestre contém dUTP, que será incorporado nos produtos de PCR para ajudar a evitar falsos positivos resultantes de contaminação por transferência. Em PCRs subsequentes, você pode adicionar uracil-DNA glicosilase para degradar quaisquer contaminantes por transferência contendo uracila (produtos de amplificação de PCRs anteriores).
qRT-PCR
Combine esta mistura-mestre com o nosso kit de síntese de cDNA Transcriptor First Strand para qRT-PCR em duas etapas. Este kit fornece excelentes resultados e funciona de forma eficiente com todos os instrumentos de PCR em tempo real.
Mistura-mestre 2x concentrada FastStart SYBR Green Master, que contém a Taq DNA polimerase FastStart, tampão de reação, nucleotídeos (dATP, dCTP, dGTP, dUTP) e SYBR Green I.
Somente para fins de pesquisas biológicas. Não é destinado ao uso em procedimentos diagnósticos.
Legal Information
SYBR is a trademark of Thermo Fisher Scientific or its subsidiaries
FastStart is a trademark of Roche
LightCycler is a registered trademark of Roche
TaqMan is a registered trademark of Roche Molecular Systems, Inc.
Classe de armazenamento
12 - Non Combustible Liquids
WGK
WGK 1
Ponto de inflamação (°F)
does not flash
Ponto de inflamação (°C)
does not flash
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