Přejít k obsahu
Merck
DomůDNA a siRNA Vlastní iScale Oligos™

DNA a siRNA Vlastní iScale Oligos™

PROČ JSOU SKALOVATELNÉ OLIGY UŽITEČNÉ?

Skalovatelné oligy mají zásadní význam, protože umožňují flexibilní výrobu v různých množstvích podle specifických výzkumných nebo komerčních potřeb. Tato škálovatelnost zajišťuje efektivní využití zdrojů, nákladovou efektivitu a přizpůsobivost požadavkům projektu. Ať už se jedná o experimenty v malém měřítku nebo rozsáhlé komerční aplikace, škálovatelná oligosložka nabízí všestrannost a pohodlí potřebné pro zefektivnění pracovních postupů a optimalizaci výsledků ve výzkumu a aplikované genomice.

iScale Oligos DNA a siRNA nabízí škálovatelnou výrobu miligramových až gramových množství vlastních oligonukleotidů DNA a siRNA. Tato škálovatelná výrobní kapacita vychází vstříc specializovaným potřebám v komerčních aplikacích a zajišťuje efektivní a nákladově efektivní výrobu vysoce kvalitních oligos pro výzkum, diagnostiku, laboratorně vyvíjené testy (LDT) a terapeutický vývoj.

Škálovatelné zakázkové oligos DNA

S více než 35 lety zkušeností s výrobou oligos jsme předním světovým dodavatelem škálovatelných zakázkových oligonukleotidů. Miligramová a gramová množství zakázkových DNA oligos jsou určena pro in vivo, vysoce výkonné a komerční projekty (nástroje pro výzkum v oblasti přírodních věd, molekulární diagnostiku a laboratorně vyvinuté testy). iScale zakázkové oligos jsou šaržově validovány pod přísnou kontrolou QMS, aby splňovaly jedinečné potřeby zákazníků.



Výhody oliga DNA na zakázku

  • Dostupná množství oligo-nukleotidů pro vaše experimentální a komerční potřeby s rychlou a efektivní globální škálovatelností výroby
  • Přímá konzultace s naším vědeckým týmem za účelem stanovení specifikací pro vaši aplikaci
  • Moderní analytická laboratoř zajišťující přísně kontrolovaný produkt vysoké kvality

Specifikace oligo DNA na zakázku

iScale oligos jsou k dispozici v širokém rozsahu délek sekvencí, množství, purifikací a formátů. Pro cokoli, co je níže označeno jako "Dotaz", nebo pokud máte vlastní potřeby na oligo, které se liší od uvedených obecných specifikací, zašlete prosím požadavek na dnaoligos@milliporesigma.com.

Využitelné aplikace pro škálovatelná vlastní oligos

  • Antisense
  • Studie vazeb
  • Vysokokapacitní PCR/qPCR
  • Sangerovo sekvenování & NGS (bez adaptérů)
  • Rentgenové krystalografické stanovení struktury
  • Immunostimulační testy
  • Výroba mikročipů

Zajišťování kvality výroby oliga na zakázku

Základem našich procesů výroby oligo je robustní Systém řízení kvality (QMS), který zajišťuje shodu s našimi následujícími registracemi kvality:

  • ISO 9001:2015 pro výrobu oligonukleotidů pro výzkum
  • ISO 13485:2016 pro výrobu oligonukleotidů pro diagnostiku
  • ISO 14001:2015 pro efektivní environmentální řízení

Tato kultura kvality je integrována do všech aspektů našeho podnikání v oblasti zakázkových oligonukleotidů. Klíčové součásti našeho systému řízení kvality zahrnují: - systém řízení kvality:

  • Certifikáty analýzy
  • Kontrola dokumentů
  • Oznamování změn
  • Řízení dodavatelů
  • Obchodní smlouvy
  • Korigativní a preventivní opatření

Každá složka je hnacím motorem pro zajištění kvality a pro její ověření běžně pořádáme přísné audity registrátorů, interní audity a audity zákazníků.


Komerční a cGMP oligo schopnosti

Jako součást naší Komerční oligos, naše Custom cGMP oligos přicházejí s konzistencí a nejvyšší kvalitou. Ať už chcete komercializovat nebo vyvinout test na základě qPCR, izotermické amplifikace, NGS nebo jiné technologie, naše produkty zajišťují správnou rovnováhu mezi rozsahem a hloubkou.

Skalovatelná malá interferující RNA (siRNA)

Naše globální výrobní zkušenosti zajišťují miligramová a gramová množství siRNA MISSION® in vivo kvalitě, která je ideální pro špičkový výzkum RNAi u zvířat. Kromě toho vyrábíme i další typy RNA, jako je miRNA a jednovláknová RNA, přičemž všechny tyto typy lze škálovat tak, aby s dokonalostí splňovaly potřeby různorodého výzkumu.


Výhody produktu siRNA

  • Vhodný pro in vivo aplikace, včetně ověřování cílů a předklinického testování
  • K dispozici pro MISSION Predesigned siRNA nebo vaše vlastní sekvence siRNA
  • Vhodné pro přímé podávání nebo jako základní součást vaší strategie formulace

iSkalární oligos siSpecifikace produktu siRNA

Škálovatelné siRNA na zakázku jsou k dispozici v různých množstvích, purifikacích a formátech v závislosti na vašich výrobních potřebách. V případě čehokoli, co je níže označeno jako "Dotaz", nebo pokud máte potřeby, které se liší od ostatních uvedených obecných specifikací, zašlete prosím požadavek na sirnarequest@milliporesigma.com.

*V závislosti na místě výroby lze k hodnocení siRNA duplexů použít PAGE.

Demonstrované použití přesné siRNA in vivo

Spolčili jsme se s firmou Bioo Scientific (nyní PerkinElmer), abychom ověřili naši MISSION in vivo kvalitní siRNA (viz článek v Drug Discovery &; Development-srpen 1 2008).

V těchto experimentech byly buňky H1155luc injikovány myším NOD/SCID. Vytvořily se nádory, do kterých byla vstříknuta siRNA specifická pro luciferázu nebo necílená in vivo kvalitní siRNA formulovaná v přípravku MaxSuppressor™ in vivo RNA-LANCEr II. Po 24 hodinách byl injikován roztok D-luciferinu a zvířata byla zobrazena pomocí přístroje NightOWL II LB 983 od společnosti Berthold Technologies. Zvířata ošetřená siRNA specifickou pro luciferázu vykazovala výrazné snížení aktivity luciferázy, zatímco zvířata ošetřená necílenou siRNA vykazovala pozitivní luminiscenci (obrázek 1). Tyto údaje prokazují účinnost kvalitní siRNA formulované v přípravku MaxSuppressor™ in vivo RNA-LANCEr II in vivo.

Fotografie fluorescenčně svítících zvířat ošetřených siRNA specifickou pro luciferázu a kontrolního zvířete ošetřeného necílenou siRNA, které ukazují účinnost siRNA v kvalitě in vivo při dodávání luciferázy.

Obrázek 1.Vlevo zvíře ošetřené siRNA specifickou pro luciferázu, vpravo zvíře ošetřené necílenou siRNA.

Sedmdesát dva hodin po injekci byly nádory odstraněny a protein byl extrahován a normalizován pomocí Bradfordova testu. Koncentrace luciferázy byla stanovena pomocí testu ELISA na luciferázu. Snížení proteinu je znázorněno v porovnání se zvířetem, kterému nebylo aplikováno cílené RNAi činidlo. Aktivita luciferázy byla v nádorech snížena dvojnásobně (obrázek 2).

Sloupcový graf znázorňující procentuální expresi proteinu luciferázy v nádorech tří myší ošetřených siRNA specifickou pro luciferázu a jedné myši bez cílené siRNA. Aktivita luciferázy byla v nádorech snížena dvojnásobně.

Obrázek 2.Procento exprese proteinu luciferázy u zvířat ošetřených siRNA specifickou pro luciferázu a kontrol měřených metodou ELISA. Každé opakování je jiná myš.

Pokud potřebujete další pomoc, obraťte se na naši skupinu technických služeb na adrese oligotechserv@milliporesigma.com

MISSION je ochranná známka společnosti Merck KGaA, Darmstadt, Německo a/nebo jejích přidružených společností. Licence na etiketu.

Odkazy

1.
Stany MP, Vathipadiekal V, Ozbun L, Stone RL, Mok SC, Xue H, Kagami T, Wang Y, McAlpine JN, Bowtell D, et al. Identification of Novel Therapeutic Targets in Microdissected Clear Cell Ovarian Cancers. PLoS ONE. 6(7):e21121. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0021121
2.
Beghin A, Belin S, Hage-Sleiman R, Brunet Manquat S, Goddard S, Tabone E, Jordheim LP, Treilleux I, Poupon M, Diaz J, et al. Correction: ADP Ribosylation Factor Like 2 (Arl2) Regulates Breast Tumor Aggressivity in Immunodeficient Mice. PLoS ONE. 4(11): https://doi.org/10.1371/annotation/b0d43779-c9aa-44fe-a46d-71d7d2bc4a6a
3.
Ramachandran V, Arumugam T, Langley R, Hwang RF, Vivas-Mejia P, Sood AK, Lopez-Berestein G, Logsdon CD. The ADMR Receptor Mediates the Effects of Adrenomedullin on Pancreatic Cancer Cells and on Cells of the Tumor Microenvironment. PLoS ONE. 4(10):e7502. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0007502
4.
Brahmamdam P, Watanabe E, Unsinger J, Chang KC, Schierding W, Hoekzema AS, Zhou TT, McDonough JS, Holemon H, Heidel JD, et al. 2009. TARGETED DELIVERY OF siRNA TO CELL DEATH PROTEINS IN SEPSIS. 32(2):131-139. https://doi.org/10.1097/shk.0b013e318194bcee
5.
Fitamant J, Guenebeaud C, Coissieux M, Guix C, Treilleux I, Scoazec J, Bachelot T, Bernet A, Mehlen P. 2008. Netrin-1 expression confers a selective advantage for tumor cell survival in metastatic breast cancer. Proceedings of the National Academy of Sciences. 105(12):4850-4855. https://doi.org/10.1073/pnas.0709810105
6.
Watabe M, Aoyama K, Nakaki T. 2008. A Dominant Role of GTRAP3-18 in Neuronal Glutathione Synthesis. Journal of Neuroscience. 28(38):9404-9413. https://doi.org/10.1523/jneurosci.3351-08.2008