Ekstraksi Fase Padat (SPE)

Ekstraksi fase padat (SPE) adalah teknik yang dirancang untuk persiapan dan pemurnian sampel secara cepat dan selektif sebelum analisis kromatografi (misalnya HPLC, GC, TLC). Dalam SPE, satu atau lebih analit dari sampel cair diisolasi melalui proses ekstraksi, pemisahan, dan/atau adsorpsi pada fase stasioner padat.  

Persiapan sampel dengan SPE mengubah matriks asli sampel menjadi lingkungan matriks yang lebih sederhana. Hal ini membuat sampel lebih sesuai untuk kromatografi analitik selanjutnya, yang seringkali menyederhanakan dan meningkatkan analisis kualitatif dan kuantitatif akhir. Matriks sampel yang lebih sederhana juga mengurangi beban pada sistem analitik, sehingga berpotensi memperpanjang masa pakai sistem.

Prosedur SPE yang optimal memungkinkan Anda untuk:

• Mengubah matriks sampel agar lebih kompatibel dengan metode kromatografi yang dituju.
• Mengkonsentrasikan analit (pengayaan jejak) untuk meningkatkan sensitivitas.
• Menghilangkan gangguan yang menyebabkan latar belakang tinggi, puncak yang menyesatkan, dan/atau sensitivitas yang buruk selama analisis kromatografi.
• Melindungi kolom analitik dari kontaminan.
• Mengotomatiskan proses ekstraksi.

Bagaimana cara kerja SPE?

Dalam SPE, fase stasioner (sorbent atau resin) mengikat analit atau pengotor melalui interaksi yang kuat namun reversibel untuk mengekstraksi analit yang diinginkan dari sampel kompleks secara andal dan cepat.

SPE bersifat selektif dan serbaguna karena tersedia berbagai sorben dan kondisi elusi yang berbeda untuk berbagai analit dan matriks. Sorben SPE yang umum meliputi:

• Berbasis silika
  • Fase terbalik (C18, C8, sian, fenil)
  • Fase normal (silika, diol, NH2)
  • Pertukaran ion (SAX, WCX, SCX)
• Berbasis karbon
• Berbasis polimer (berbagai komposisi, berbagai fungsi)
• Lainnya, misalnya Florisil® (magnesium silikat) atau Alumina
• Campuran: Kombinasi hampir semua bahan di atas dalam lapisan berurutan

Strategi untuk SPE

Dalam ‘Bind‒Elute SPE’, analit yang diinginkan ditangkap oleh sorben dan gangguan matriks melewati kartrid. Dalam ‘Interference Removal SPE’, gangguan matriks ditangkap pada sorben dan analit yang diinginkan melewatinya. Baik metode HybridSPE maupun QuEChERS SPE bekerja melalui Interference Removal.

Metode SPE yang optimal bergantung pada struktur, kelarutan, polaritas, dan sifat lipofilik (koefisien distribusi) analit. Panduan pemilihan tersedia untuk membantu memilih fase stasioner dan pelarut yang paling sesuai untuk aplikasi yang diinginkan.

Aplikasi umum SPE

SPE sering digunakan dalam industri farmasi, klinis, dan pengujian diagnostik berkapasitas tinggi, forensik, lingkungan, serta makanan/agrokimia untuk analisis yang berkaitan dengan:

• Senyawa farmasi dan metabolit dalam cairan biologis
• Obat-obatan terlarang dalam cairan biologis
• Polutan lingkungan dalam air minum dan air limbah
• Pestisida, antibiotik, atau mikotoksin dalam matriks pangan/pertanian
• Penghilangan garam dari protein dan peptida
• Fraksinasi lipid
• Vitamin yang larut dalam air dan lemak