Uji Sterilitas

Prosedur pengujian sterilitas diterapkan pada produk di berbagai industri, termasuk produsen makanan dan minuman, namun industri utamanya adalah sektor farmasi dan medis, di mana pengujian sterilitas produk tetap menjadi tugas yang sangat penting dan rutin bagi para ahli mikrobiologi.

• Metode Uji Sterilitas Farmasi
• Metode Uji Sterilitas untuk Alat Kesehatan
• Alur Kerja Pengujian Sterilitas

Metode Uji Sterilitas Farmasi

Metode kompendium untuk pengujian sterilitas produk farmasi mengharuskan sampel dikultur dalam dua media terpisah. Dua jenis media kultur yang berbeda digunakan dalam pengujian sterilitas untuk mendorong pertumbuhan bakteri anaerob sisa, serta bakteri aerob dan jamur. Media thioglycolate cair (FTM) biasanya digunakan untuk menumbuhkan bakteri anaerob dan beberapa bakteri aerob, sedangkan media soybean casein digest (SCDM) biasanya digunakan untuk menumbuhkan jamur dan bakteri aerob. Sampel diinkubasi selama 14 hari pada suhu 32,5 °C dan 22,5 °C masing-masing, sebelum diperiksa. Kekeruhan apa pun dalam media kultur dapat mengindikasikan pertumbuhan dan harus diselidiki. Ada dua metode yang direkomendasikan untuk pengujian sterilitas obat-obatan: filtrasi membran dan inokulasi langsung.

Pengujian Sterilitas dengan Filtrasi Membran

Pengujian sterilitas dengan filtrasi membran adalah metode regulasi pilihan untuk produk farmasi yang dapat disaring, sebagaimana dikutip dalam USP <71>, Farmakopei UE <2.6.1>, dan Farmakopei JP <4.06>. Sampel dilewatkan melalui filter membran 0,45 µm dalam tabung filtrasi dan media kultur ditambahkan untuk inkubasi. Metode pengujian sterilitas ini dapat memberikan sensitivitas yang lebih tinggi dibandingkan metode lain karena seluruh sampel, atau sampel komposit, dilewatkan melalui satu filter. Filtrasi juga memberikan kesempatan untuk membilas komponen dalam sampel yang dapat menyebabkan kekeruhan atau menghambat pertumbuhan, seperti antibiotik atau pengawet.

Pengujian Sterilitas dengan Inokulasi Langsung

Dalam inokulasi langsung, volume kecil sampel diambil secara aseptik dari unit sampel dan diinokulasi langsung ke dalam volume yang sesuai dari medium pertumbuhan sebelum inkubasi. Meskipun sederhana, metode pengujian ini dapat memiliki beberapa keterbatasan yang signifikan. Hanya volume produk yang kecil yang dapat diinokulasi ke dalam media kultur, sehingga membatasi sensitivitas pengujian. Jika sampel tampak keruh atau buram setelah inokulasi, akan sulit untuk mendeteksi kekeruhan akibat pertumbuhan mikroba pada akhir periode inkubasi. Selain itu, jika produk memiliki sifat antimikroba, sampel harus dinetralkan agar pertumbuhan mikroba tidak terhambat.

Metode Pengujian Sterilitas untuk Alat Kesehatan

Pengujian sterilitas transfer langsung direkomendasikan untuk pengujian sterilitas perangkat medis. Perangkat yang akan diuji berada dalam kontak langsung dengan media uji selama periode inkubasi, di mana mikroorganisme apa pun di dalam atau pada perangkat akan tumbuh dan berkembang biak. Selain itu, pengujian sterilitas dengan pembilasan produk lebih disukai untuk produk dengan tabung berlubang, seperti perangkat transfusi dan infus, di mana jalur cairan diberi label steril. Lumen produk dibilas dengan cairan pembilas, eluat disaring dengan membran dan ditempatkan dalam media yang sesuai untuk inkubasi.

Alur Kerja Pengujian Sterilitas

1. Persiapan Pengujian—Masukkan selang perangkat filtrasi membran ke dalam pompa

2. Pembasahan Awal Filter—Basahi terlebih dahulu perangkat filtrasi membran untuk mengoptimalkan filtrasi dan meminimalkan ikatan produk pada filter.

3. Penyaringan Sampel—Saring jumlah produk yang sama ke dalam kedua tabung. Mikroorganisme ditahan oleh filter berukuran pori 0,45 µm.

4. Pembilasan—Semua senyawa penghambat dibilas menggunakan larutan pembilas yang sesuai.

5. Pengisian Media Kultur—Perangkat filtrasi membran diisi dengan media kultur steril TSB dan FTM.

6. Waktu Inkubasi—14 hari.

7. Hasil Uji Akhir—Pemeriksaan kekeruhan visual / tidak ada kekeruhan.