การทดสอบเชื้อที่มีอยู่

 พื้นฐานของการทดสอบ Bioburden

การทดสอบ Bioburden หรือการทดสอบจุลินทรีย์เป็นกระบวนการควบคุมคุณภาพที่ตรวจจับและวัดปริมาณการปนเปื้อนจุลินทรีย์ของผลิตภัณฑ์ในขั้นตอนต่างๆของการผลิตเช่นตั้งแต่การผลิตขั้นต้นไปจนถึงการกระจายขั้นสุดท้าย การควบคุมคุณภาพที่มีประสิทธิภาพและผลการทดสอบที่แม่นยำเป็นสิ่งสำคัญในการลดความเสี่ยงให้กับผู้บริโภคและจำเป็นสำหรับสภาพแวดล้อมการผลิตที่มีการควบคุม ดังนั้นการวิเคราะห์ Bioburden จึงมักรวมอยู่ในการทดสอบตามปกติเพื่อให้มั่นใจถึงความปลอดภัยคุณภาพและการปฏิบัติตามกฎระเบียบของผลิตภัณฑ์ที่ผลิตแต่ละชุด

การทดสอบ Bioburden ดำเนินการสำหรับอุปกรณ์ทางการแพทย์ยาอาหารและเครื่องดื่มน้ำบรรจุภัณฑ์ วัตถุดิบเนื้อเยื่อมนุษย์เนื้อเยื่อสัตว์และเครื่องสำอาง เมื่อปฏิบัติตามวิธีการมาตรฐานตามที่อธิบายไว้ด้านล่างเป็นสิ่งสำคัญที่จะต้องตรวจสอบให้แน่ใจว่าวิธีการทดสอบไม่ได้นำแบคทีเรียเข้าไปในตัวอย่างการทดสอบหรือฆ่าเชื้อแบคทีเรียในตัวอย่างการทดสอบ

• วิธีการกรองเมมเบรนสำหรับการทดสอบ Bioburden
• วิธีการชุบโดยตรงสำหรับการทดสอบ Bioburden
• วิธี Probable Number (MPN) ส่วนใหญ่สำหรับการทดสอบ Bioburden

วิธีการกรองเมมเบรนสำหรับการทดสอบ Bioburden 

การกรองเมมเบรน เป็นวิธีการเลือกผลิตภัณฑ์ที่มีสารต้านจุลชีพ ในวิธีนี้ตัวอย่างจะถูกส่งผ่านตัวกรองเมมเบรนที่มีขนาดรู µm 0.45 μ m เมมเบรนทำหน้าที่เป็นอุปสรรคและจับจุลินทรีย์ที่มีขนาดใหญ่กว่าขนาดรูพรุนของเมมเบรน ในระหว่างการกรองสามารถใช้เครื่องดูดฝุ่นเพื่อเร่งความเร็วของกระบวนการได้ จากนั้นเมมเบรนจะถูกถ่ายโอนไปยังอาหารเลี้ยงเชื้อและวางไว้ในตู้บ่มเชื้อเป็นเวลาอย่างน้อย 5 วันที่อุณหภูมิ 30 – 35°C เพื่อตรวจหาแบคทีเรียและที่อุณหภูมิ 20-25°C เพื่อตรวจหาเชื้อรา วัฒนธรรมที่เกิดขึ้นจะถูกระบุเพิ่มเติมเพื่อกำหนดระดับของการปนเปื้อนจุลินทรีย์ในตัวอย่าง ควรใช้มาตรการที่เหมาะสมเพื่อหลีกเลี่ยงการปนเปื้อนข้ามที่อาจนำไปสู่ผลลัพธ์ที่เป็นบวกผิดพลาด

วิธีการชุบโดยตรงสำหรับการทดสอบ Bioburden

วิธีการชุบโดยตรงสำหรับการทดสอบ bioburden รวมถึงวิธีการเทแผ่นและการแพร่กระจายแผ่น ควรใช้วิธีการเทเพลทเนื่องจากมีความแม่นยำทางทฤษฎีสูงกว่า ในวิธีการเทจานอาหารเพาะเชื้อ จะถูกเพิ่มลงในจานเพาะเชื้อที่มีตัวอย่างทดสอบและได้รับอนุญาตให้แข็งตัว ในทางกลับกันในวิธีการแผ่กระจายตัวอย่างจะถูกเพิ่มลงในจานเพาะเชื้อที่มีสื่อวัฒนธรรมที่ผ่านการฆ่าเชื้อและแข็งตัว ไม่ว่าจะใช้วิธีใดหลังจากเติมตัวอย่างลงในระบบ Culture แล้วแผ่นทดสอบจะถูกบ่มเพาะและวัฒนธรรมที่ได้จะถูกแจกแจง

วิธี Probable Number (MPN) ส่วนใหญ่สำหรับการทดสอบ Bioburden

วิธีตัวเลขที่น่าจะเป็นไปได้มากที่สุด (MPN) เป็นวิธีการเชิงปริมาณที่ใช้ในการกำหนดความเข้มข้นของแบคทีเรียโดยประมาณในตัวอย่าง สารละลายหรือตัวอย่างเดิมจะถูกแบ่งย่อยตามลำดับขนาด (บ่อยครั้ง 10 × หรือ 2 ×) ลงในน้ำซุปเพาะเชื้อและประเมินว่ามีจุลินทรีย์อยู่หรือไม่ ข้อเสียเปรียบของวิธีการ MPN คือต้องใช้การทำซ้ำจำนวนมากในการเจือจางที่เหมาะสมเพื่อจำกัดช่วงความเชื่อมั่น นอกจากนี้วิธีการนี้มีประสิทธิภาพในการตรวจสอบแบคทีเรียเท่านั้นและไม่ให้ผลลัพธ์ที่เชื่อถือได้สำหรับการแจกแจงเชื้อรา