聚合酶連鎖反應 (PCR) 應用
聚合酶鏈反應（PCR）是一種功能強大的核心分子生物學技術，它是一種高效快速的體外方法，用於酵素擴增各種來源的特定 DNA 或 RNA 序列。標準的 PCR 由目標 DNA、一組在目標 DNA 序列側邊的合成寡核苷酸引物、一個可耐熱的 DNA 聚合酶（通常是 Taq 聚合酶）和核苷酸組成。使用熱循環器時，每個擴增週期都有三個階段，包括將雙鏈 DNA (dsDNA) 變性為獨立的單鏈 DNA、將引物退火至目標 DNA 序列，以及延伸，DNA 聚合酶會從引物延伸 DNA，產生具有一條舊鏈和一條新鏈的新 dsDNA。在一個循環中合成的鏈在下一個循環中作為模板，結果在短短 20 個循環中，DNA 的數量就增加了百萬倍。
特色類別
Reverse Transcriptase PCR (RT-PCR)
RT-PCR（或稱逆轉錄酶 PCR）是標準 PCR 技術的一種變體，涉及對從極小樣本中獲得的特定 mRNA 進行擴增。它省去了傳統克隆技術所需的繁瑣的 mRNA 純化過程。RT-PCR 除了標準的 PCR 試劑外，還需要使用逆轉錄酶和 RNA 樣本。反應混合物加熱至 37 ˚C，讓逆轉錄酶從 RNA 樣本中產生互補的 cDNA 複本。然後此 cDNA 會退火至引物之一，導致第一條鏈合成。接下來就是標準的 PCR，最終產生 dsDNA。
熱啟動 PCR
熱啟動 PCR 是一種抑制熱啟動 Taq 聚合酶或在反應設置過程中加入經修飾的 dNTPs 的技術，直到熱激活步驟發生為止。有多種方法可以抑制熱啟動聚合酶的活性，包括化學修復、抗體介導和適應子介導的方法。
用於長而精確的目標擴增的端點 PCR
端點 PCR 常用於檢測反應完成時目標的存在和相對豐度。標準 PCR 所產生的序列長度有限（約 5 kb），這在一定程度上是由於加入了提供"校對"活動的額外因子而克服的。Long and accurate (LA) PCR 使用第二個帶有 3′→5′ 外切酶的恒溫聚合酶來修復末端核苷酸錯合，因此保真度顯著提高，並能擴增 DNA 目標長度達 40 kb。
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