製藥業中的支原體檢測
支原體污染是生命科學研究及製藥產業中許多細胞培養系統所面臨的普遍且反覆出現的問題。支原體可在培養基中增殖至高滴度，卻不會出現渾濁等典型的細菌污染徵兆。其對培養細胞的影響包括代謝改變、增殖減緩以及染色體畸變。 簡而言之，支原體污染會損害受影響細胞系的數據有效性，並影響生命科學研究的結果。因此，支原體檢測以及由此維持無污染的細胞培養，對於基於細胞的研究，以及消費者健康為首要考量之產品的製造而言，至關重要。
精選類別
生物安全檢測服務
提供生物安全檢測服務，針對單克隆抗體（mAbs）、細胞與基因療法及疫苗原料進行檢測，以確保其不含可能導致下游製程發生災難性故障的外來病原體或意外結果，包括：支原體檢測。
關於支原體
支原體是已知體積最小的細菌之一，能夠穿過孔徑為 0.2 µm 的濾膜。這些微生物可在有氧或通性厭氧條件下生長。
支原體可分為寄生型或腐生型。部分物種（例如肺炎支原體）具有致病性，會引起人類肺炎及其他呼吸道疾病。生殖支原體則被認為與盆腔炎有關。由於支原體缺乏細胞壁，因此對青黴素或其他作用於細胞壁結構的抗生素不敏感。 為了穩定其細胞質膜，大多數支原體需要固醇，這些物質通常以膽固醇的形式從動物宿主等環境中攝取。許多支原體菌株對其他多種抗生素也具有耐受性。
支原體污染的來源
在實驗室及生產過程中，支原體污染的來源極難控制。某些支原體物種存在於人體皮膚上，若無菌操作不當，便可能被帶入培養系統。此外，支原體也可能透過受污染的培養輔料（例如胎牛血清）進入系統，而最常見的途徑則是從其他受污染的細胞培養物中傳播而來。 一旦細胞培養物中含有支原體，這些微生物便會迅速擴散，並透過培養操作過程中產生氣溶膠及微粒，污染實驗室的其他區域。嚴格遵守良好的實驗室無菌操作規範至關重要，且強烈建議對培養物進行例行檢測，以成功控制生產區域內的支原體污染。
為何製藥產業需要進行支原體檢測？
使用真核細胞生產疫苗的生物製藥設施，必須對其細胞庫、病毒種子批次以及疫苗原液進行支原體污染檢測。此細菌屬的物種會感染真核細胞，干擾其生長與代謝。當支原體干擾疫苗生產時，不僅可能影響蛋白質的品質與產量，更重要的是，會導致接種最終疫苗產品的患者出現副作用。
除非在製造過程中及早發現，否則生物反應器中的支原體污染將導致大量時間、材料及收益的損失。若缺乏嚴格的檢測程序，生物製藥生產批次中的支原體污染極難被發現，因為支原體的存在通常不會導致培養基的 pH 值變化或視覺上的混濁。 藥典規定的支原體檢測方法同時包含培養法與指示細胞檢測法。若僅使用兩種培養基進行分析，建議將 FREY 培養基與 FRIIS 培養基搭配使用。
支原體檢測方法
在品質控制的各個階段，對生物製劑、疫苗、細胞培養物及病毒培養物進行支原體檢測至關重要。最常見的三種檢測方法為：
- 支原體培養：將針對支原體優化的細菌培養基接種測試樣本
- DNA 染色法：使用 Hoechst 或 DAPI 對支原體細胞核進行反染色，並透過螢光顯微鏡進行成像
- PCR（聚合酶鏈反應）：若樣本中存在支原體，則透過此法放大其細菌DNA
依據 EP 2.6.7 及 USP 63 檢測支原體的工作流程
* 接種後的各天，將每份液體培養基進行轉培養，方法是將 0.2 mL 接種至每種固體培養基的至少 1 個培養皿中。於試驗的第 6 至 8 天、第 13 至 15 天，以及第 19 至 21 天之間，分別重複此程序。每 2 或 3 天觀察一次液體培養基，若出現顏色變化，則進行轉培養。
註：此外，每種固體培養基和液體培養基均需各設一組陽性對照與陰性對照，培養時間為14天。
用於藥典標準支原體檢測的即用型培養基
我們提供完整的即用型液態及固態培養基產品系列，符合《歐洲藥典》第 6.1 版（2.6.7.）及《美國藥典》第 35 版（63）對支原體檢測的要求。無需任何額外準備步驟，我們的即用型支原體培養基可確保產品品質穩定，並透過每批專屬的分析證明書實現完整的可追溯性。
由於成分特性，支原體培養基的保存期限通常遠短於大多數其他用於微生物品質控制的培養基。 本公司即用型 Friis、Frey 及 Hayflick 液體與固體培養基的保存期限，已延長至瓊脂平板 4 個月、肉湯 6 個月。歡迎體驗我們完整系列的即用型培養基，其更長的保存期限將使支原體檢測更加簡便。
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