Xét nghiệm lượng vi khuẩn

 Truy cập ngày 1 tháng 1 năm 2009

Thử nghiệm Bioburden hoặc thử nghiệm vi sinh vật là một quá trình kiểm soát chất lượng phát hiện và định lượng ô nhiễm vi khuẩn của sản phẩm ở các giai đoạn sản xuất khác nhau, tức là từ sản xuất ban đầu đến phân phối cuối cùng. Kiểm soát chất lượng hiệu quả và kết quả kiểm tra chính xác là điều cần thiết để giảm thiểu rủi ro cho người tiêu dùng và được yêu cầu bởi các môi trường sản xuất được quản lý. Do đó, phân tích bioburden thường được bao gồm trong kiểm tra thường xuyên để đảm bảo sự an toàn, chất lượng và tuân thủ quy định của mỗi lô sản phẩm được sản xuất.

Xét nghiệm Bioburden được thực hiện cho các thiết bị y tế, dược phẩm, thực phẩm và đồ uống, nước, đóng gói, nguyên liệu thô, mô người, mô động vật và mỹ phẩm. Khi các phương pháp tiêu chuẩn, như mô tả dưới đây được tuân thủ, điều quan trọng là phải đảm bảo rằng phương pháp thử nghiệm không đưa vi khuẩn vào mẫu thử nghiệm hoặc tiêu diệt vi khuẩn trong mẫu xét nghiệm.

• Phương pháp lọc màng cho xét nghiệm Bioburden
• Các phương pháp mạ trực tiếp cho thử nghiệm Bioburden
• Phương pháp số có thể xảy ra nhất (MPN) để kiểm tra Bioburden

Phương pháp lọc màng cho xét nghiệm Bioburden 

Lọc màng là phương pháp được lựa chọn cho các sản phẩm có chứa chất kháng khuẩn. Trong phương pháp này, mẫu được truyền qua bộ lọc màng với kích thước lỗ rỗng 0,45 µm. Màng có chức năng như một hàng rào và bắt giữ các vi sinh vật lớn hơn kích thước lỗ màng. Trong quá trình lọc, có thể sử dụng chân không để tăng tốc quá trình. Màng sau đó được chuyển sang môi trường nuôi cấy và đặt trong một lò ấp trong ít nhất 5 ngày ở 30–35 °C để phát hiện vi khuẩn và ở 20-25 °C để phát hiện nấm. Nuôi cấy kết quả được liệt kê thêm để xác định mức độ ô nhiễm vi khuẩn trong mẫu. Cần thực hiện các biện pháp thích hợp để tránh nhiễm bẩn chéo có thể dẫn đến kết quả dương tính giả.

Các phương pháp mạ trực tiếp cho thử nghiệm Bioburden

Các phương pháp mạ trực tiếp để kiểm tra bioburden bao gồm tấm đổ và các phương pháp tấm trải rộng. Phương pháp tấm rót được ưu tiên do độ chính xác lý thuyết cao hơn. Trong phương pháp rót, môi trường nuôi cấy khử trùng được thêm vào một đĩa petri có chứa mẫu xét nghiệm và được để đông cứng. Ngược lại, trong phương pháp tấm trải, mẫu được thêm vào một đĩa petri có chứa môi trường nuôi cấy vô trùng, đông cứng. Bất kể phương pháp nào, sau khi mẫu đã được thêm vào hệ thống nuôi cấy, tấm được ủ và nuôi cấy kết quả được liệt kê.

Phương pháp số có thể xảy ra nhất (MPN) để kiểm tra Bioburden

Phương pháp số có thể xảy ra nhất (MPN) là phương pháp định lượng được sử dụng để xác định nồng độ vi khuẩn gần đúng trong mẫu. Dung dịch hoặc mẫu ban đầu được chia cho các bậc độ lớn (thường là 10× hoặc 2×) thành nước dùng nuôi cấy và đánh giá sự hiện diện hoặc vắng mặt của vi sinh vật. Nhược điểm của phương pháp MPN là nó đòi hỏi một số lượng lớn các bản tái tạo tại sự pha loãng thích hợp để thu hẹp khoảng tin cậy. Hơn nữa, phương pháp này chỉ có hiệu quả cho việc kiểm tra vi khuẩn và không cung cấp kết quả đáng tin cậy cho việc liệt kê nấm.