Thử nghiệm tải lượng vi sinh vật

 Các nguyên tắc cơ bản của thử nghiệm tải lượng vi sinh

Thử nghiệm tải lượng vi sinh hoặc thử nghiệm vi sinh là một quy trình kiểm soát chất lượng nhằm phát hiện và định lượng sự nhiễm vi sinh vật trong sản phẩm ở các giai đoạn sản xuất khác nhau, tức là từ giai đoạn sản xuất ban đầu đến phân phối cuối cùng. Kiểm soát chất lượng hiệu quả và kết quả thử nghiệm chính xác là yếu tố thiết yếu để giảm thiểu rủi ro cho người tiêu dùng và là yêu cầu bắt buộc đối với các môi trường sản xuất được quy định. Do đó, phân tích tải lượng vi sinh thường được đưa vào các thử nghiệm định kỳ để đảm bảo an toàn, chất lượng và tuân thủ quy định đối với từng lô sản phẩm được sản xuất.

Thử nghiệm tải lượng vi sinh được thực hiện đối với các thiết bị y tế, dược phẩm, thực phẩm và đồ uống, nước, bao bì, nguyên liệu thô, mô người, mô động vật và mỹ phẩm. Khi tuân theo các phương pháp tiêu chuẩn như được mô tả dưới đây, điều quan trọng là phải đảm bảo rằng phương pháp thử nghiệm không đưa vi khuẩn vào mẫu thử hoặc tiêu diệt vi khuẩn trong mẫu thử.

• Phương pháp lọc màng để kiểm tra tải lượng vi sinh
• Phương pháp cấy trực tiếp để kiểm tra tải lượng vi sinh
• Phương pháp Số lượng có khả năng cao nhất (MPN) để kiểm tra tải lượng vi sinh

Phương pháp lọc màng để kiểm tra tải lượng vi sinh 

Lọc màng là phương pháp được ưu tiên sử dụng cho các sản phẩm chứa chất kháng khuẩn. Trong phương pháp này, mẫu được đưa qua màng lọc có kích thước lỗ 0,45 µm. Màng lọc hoạt động như một rào cản và giữ lại các vi sinh vật có kích thước lớn hơn kích thước lỗ màng. Trong quá trình lọc, có thể sử dụng chân không để đẩy nhanh quá trình. Sau đó, màng lọc được chuyển sang môi trường nuôi cấy và đặt trong tủ ấm ít nhất 5 ngày ở nhiệt độ 30–35 °C để phát hiện vi khuẩn và ở nhiệt độ 20–25 °C để phát hiện nấm. Môi trường nuôi cấy thu được sẽ được đếm số lượng để xác định mức độ nhiễm vi sinh vật trong mẫu. Cần thực hiện các biện pháp thích hợp để tránh nhiễm chéo có thể dẫn đến kết quả dương tính giả.

Phương pháp cấy trực tiếp để kiểm tra tải lượng vi sinh

Các phương pháp cấy trực tiếp để kiểm tra tải lượng vi sinh bao gồm phương pháp đổ môi trường và phương pháp phết môi trường. Phương pháp đổ môi trường được ưa chuộng hơn do độ chính xác lý thuyết cao hơn. Trong phương pháp đổ môi trường, môi trường nuôi cấy đã tiệt trùng được đổ vào đĩa Petri chứa mẫu thử và để đông đặc. Ngược lại, trong phương pháp phết môi trường, mẫu thử được thêm vào đĩa Petri chứa môi trường nuôi cấy đã tiệt trùng và đông đặc sẵn. Bất kể phương pháp nào, sau khi mẫu được thêm vào hệ thống nuôi cấy, đĩa sẽ được ủ và số lượng vi sinh vật thu được sẽ được đếm.

Phương pháp Số lượng Có khả năng cao nhất (MPN) để kiểm tra tải lượng vi sinh

Phương pháp Số lượng Có Khả năng Cao Nhất (MPN) là một phương pháp định lượng được sử dụng để xác định nồng độ vi khuẩn xấp xỉ trong mẫu. Dung dịch ban đầu hoặc mẫu được chia nhỏ theo cấp số nhân (thường là 10× hoặc 2×) vào môi trường nuôi cấy lỏng và được đánh giá về sự hiện diện hoặc vắng mặt của vi sinh vật. Nhược điểm của phương pháp MPN là nó yêu cầu số lượng lớn các lần lặp lại ở nồng độ pha loãng thích hợp để thu hẹp khoảng tin cậy. Hơn nữa, phương pháp này chỉ hiệu quả đối với việc kiểm tra vi khuẩn và không cung cấp kết quả đáng tin cậy cho việc đếm nấm.