단백질 정제

단백질 정제를 위한 주요 요인

단백질 구조 및 기능은 단백질 정제 전략을 선택할 때 빈번히 고려해야 하는 주요 요인입니다. 재조합형 단백질의 생화학적 또는 생물학적 활성은 해당 단백질 내부의 독립된 도메인에 의해 부분적으로 결정되며, 단백질이 이차, 삼차 및 사차 구조로 접혀지는 것에 자주 의존합니다. 

단백질 접힘은 고차구조(HOS)를 집합적으로 나타내며 단백질의 정확한 삼차원 형태와 기능에 필수적입니다. 추가적으로, 단백질 용해성은 성공적인 단백질 정제를 위해 크게 요구되는 속성이며 크기 그리고 N- 및 C-단말 요소와 같은 여러 요인에 영향을 받습니다. 재조합형 단백질은 일반적으로 N- 및 C-단말 태그를 포함하며, 특정 N- 및 C-단말 태그 그리고 의도된 다운스트림 애플리케이션에 따라서, 면역조직화학 검출과 정제 또는 단백질 친화성 크로마토그래피에 사용되는 짧은 서열입니다.

단백질 정제 방법 및 애플리케이션

연구자가 단백질 기능 연구를 목표로 하거나, 다운스트림, 산업 규모 생물의약품 및 제약 제품을 위한 전략을 이용한 단백질 정제 스케일업을 추구하는지에 따라서, 수많은 단백질 정제법, 시약 그리고 도구를 이용할 수 있습니다. 선정된 단백질 정제법은 시료 처리 작업공정을 부분적으로 결정합니다. 친화성 크로마토그래피는 관련 태그를 포함한 용해된 재조합형 단백질 정제를 위해 적절한 초기 정제 단계이지만, 원하지 않는 단백질 또한 친화성 레진 컬럼에 부착되어 관심있는 원하는 단백질과 함께 최종 세정 단계에서 용출될 것입니다. 추가적인 정제가 필요한 경우, 크기 배제 크로마토그래피 또는 이온 교환 크로마토그래피와 같은 보조적인 정제 전략을 활용합니다. 중요한 점은, 과학자들이 최종 정제 단백질에서 일체의 자연적이지 않은 서열을 제거하기 원하므로 많은 친화성 태그는 제거될 수 있다는 점입니다.