โปรโตคอลย่อยเอนไซม์จำกัด

คอลเลกชันจำกัดเอนไซม์ของเราได้รับการปรับให้เหมาะสำหรับการย่อยอาหารโดยใช้บัฟเฟอร์ที่ไม่ซ้ำกันห้า เมื่อย่อยดีเอ็นเอโดยใช้เอนไซม์เดียวให้ใช้บัฟเฟอร์ที่ให้มาพร้อมกับเอนไซม์

โปรโตคอลสำหรับการย่อยดีเอ็นเอด้วยเอนไซม์จำกัดเดี่ยว

1. เติมส่วนประกอบลงในท่อที่สะอาดตามลำดับที่แสดง:
        1 µL ดีเอ็นเอ (ความเข้มข้น 1 µg/µL)
        2 µL บัฟเฟอร์ 10 เท่า
        1 µL
        µL จำกัดเอนไซม์ 16 น้ำปราศจากเชื้อ
   
2. บ่มปฏิกิริยาที่อุณหภูมิการย่อยอาหาร (ปกติ 37°C) เป็นเวลา 1 ชั่วโมง
3. หยุดการย่อยอาหารด้วยการยับยั้งความร้อน (อุณหภูมิ 65°C เป็นเวลา 15 นาที) หรือเติม EDTA ความเข้มข้นขั้นสุดท้าย 10 มม.
4. ดีเอ็นเอย่อยพร้อมใช้งานในการใช้งานวิจัย

เมื่อใช้เอนไซม์อุดตันสองตัวพร้อมกันขั้นแรกให้ตรวจสอบกิจกรรมของเอนไซม์ในบัฟเฟอร์แต่ละตัวโดยใช้ตารางใน การอ้างอิงบัฟเฟอร์ของเอนไซม์อุดตัน หากทั้งคู่มีกิจกรรม 100% ในบัฟเฟอร์เดียวกันคุณสามารถดำเนินการกับโปรโตคอลการย่อยอาหารสองครั้งของคุณโดยใช้บัฟเฟอร์นั้น หรือสามารถกำหนดบัฟเฟอร์ที่เหมาะสมที่สุดได้จาก แผนผังของการย่อยสองครั้งทั่วไป ในบางกรณีแนะนำให้ย่อยอาหารตามลำดับเนื่องจากบัฟเฟอร์ไม่เข้ากัน (องค์ประกอบหรืออุณหภูมิ)

โปรโตคอลสำหรับการย่อยดีเอ็นเอที่มีเอนไซม์อุดตันสองตัว

1. เติมส่วนประกอบลงในท่อที่สะอาดตามลำดับที่แสดง:
        1 µL ดีเอ็นเอ (ความเข้มข้น 1
        µL/µL) 2
        µL บัฟเฟอร์ 10 เท่า 1
        µL แต่ละเอนไซม์ µg กัด 15 น้ำปราศจากเชื้อ
   
2. บ่มปฏิกิริยาที่อุณหภูมิการย่อยอาหาร (ปกติ 37°C) เป็นเวลา 1 ชั่วโมง
3. หยุดการย่อยอาหารด้วยการยับยั้งความร้อน (อุณหภูมิ 65°C เป็นเวลา 15 นาที) หรือเพิ่ม EDTA ความเข้มข้นขั้นสุดท้าย 10 มม.
4. ดีเอ็นเอย่อยพร้อมใช้งานในการใช้งานวิจัย

โปรโตคอลสำหรับการย่อยดีเอ็นเอแบบต่อเนื่อง

1. เติมส่วนประกอบลงในท่อที่สะอาดตามลำดับที่แสดง:
        1 µL ดีเอ็นเอ (ความเข้มข้น 1 µg/µL)
        2 µL บัฟเฟอร์ 10 เท่า
        1 µL
        µL จำกัดเอนไซม์ 16 น้ำปราศจากเชื้อ
   
2. บ่มปฏิกิริยาที่อุณหภูมิการย่อยอาหาร (ปกติ 37°C) เป็นเวลา 1 ชั่วโมง
3. หยุดการย่อยอาหารด้วยการยับยั้งความร้อน (อุณหภูมิ 65°C เป็นเวลา 15 นาที) หรือเติม EDTA ความเข้มข้นขั้นสุดท้าย 10 มม.
4. กู้คืน DNA โดยใช้ชุด µg บริสุทธิ์: ระงับใหม่และเจือจาง DNA เป็น 1 µL/ตารางเมตร
5. เตรียมการย่อยอาหารครั้งที่สองตามขั้นตอนที่ 1 ทำตามขั้นตอนที่ 3
6. ดีเอ็นเอย่อยพร้อมใช้งานในการใช้งานวิจัย