Čištění vzorků

Graf znázorňující klíčové fáze separace pomocí afinitní chromatografie, zahrnující fáze vazby, promývání a eluce.

K oddělení nebo koncentraci cílového analytu před analýzou lze použít různé chemické a fyzikální metody čištění. Mezi ně patří absorpce, adsorpce, chromatografie, destilace, extrakce, iontová výměna, filtrace, tvorba komplexů, krystalizace, sušení a mnoho dalších. Příprava vzorku před analýzou pomáhá uvést vzorek do formátu, který je kompatibilní s analytickou technikou, snižuje složitost vzorku, odstraňuje rušivé nečistoty a koncentruje analyzovanou látku před analýzou. Vhodná příprava vzorku zabrání ucpání, může snížit potřebu přísných postupů promývání a může prodloužit životnost chromatografického média.

Vybrané kategorie

Detailní pohled na přístroj Amicon používaný k filtraci, který se skládá ze čtyř průhledných trubiček uspořádaných svisle v černém rámu. Trubičky obsahují tekutiny různých barev, které označují různé koncentrace či roztoky. Přístroj je umístěn na laboratorní desce, v horní části jsou vidět připojené hadičky a základna, která zřejmě zajišťuje stabilitu během provozu.

Zařízení Amicon^®

Odstředivá a tlaková ultrafiltrační zařízení pro koncentraci bílkovin, odsolování, výměnu pufru, separaci a diafiltraci biologických a environmentálních vzorků v rámci přípravy pro následné aplikace.

Nabídka produktů

Systém na úpravu ultračisté a čisté vody Milli-Q® IQ 7003/05/10/15 – systém na úpravu laboratorní vody typu 1 a typu 2 s výrobními a zásobními jednotkami a výdejníky čisté a ultračisté vody.

Stolní laboratorní systémy na úpravu vody Milli-Q^®

Systémy Milli-Q^® nabízejí inovativní technologie čištění vody, které jsou navrženy tak, aby...

Nabídka produktů

Čirá laboratorní kádinka naplněná bezbarvou kapalinou, v níž se nachází malá válcovitá nádobka s červenou kapalinou. Nádobka je uzavřena modrým víčkem, které plave na hladině kapaliny v kádince. Na boku kádinky jsou vyznačeny měrné rysky udávající její objem.

Laboratorní dialyzační a diafiltrační přístroje

Dialyzátory, odstředivá ultrafiltrační zařízení a míchací komory pro výměnu pufru...

Nabídka produktů

Laboratorní filtrační zařízení s bílou základnou a pěti průhlednými trubkami, které jsou svisle umístěny v horní části. Trubky jsou naplněny kapalinou a mají zelené značky. V přední části zařízení je vidět manometr, který ukazuje tlak v systému. Pozadí je jasně žluté, což zvyšuje viditelnost zařízení.

Extrakce v pevné fázi (SPE) a QuEChERS

Seznamte se s naší nabídkou produktů pro extrakci v pevné fázi, které umožňují rychlou a přesnou analýzu...

Nabídka produktů

V laboratoři se k přípravě vzorků pro následnou analýzu používají některé z následujících nejběžnějších technik čištění.

Dialýza

Dialýza je technika čištění používaná k odstranění solí nebo jiných molekul s nízkou molekulovou hmotností ze vzorku. Používá se také k výměně pufrového složení vzorku. Dialýza je pasivní technika vyžadující velké objemy pufru.

Výměna pufru a odsolování

Odsolování je jednoduchá metoda k odstranění solí a jiných kontaminantů s nízkou molekulovou hmotností ze vzorku. Používá se také k výměně pufru před nebo po různých chromatografických krocích a k rychlému odstranění činidel za účelem ukončení reakce.

Frakční srážení

Frakční srážení se používá k odstranění hrubých nečistot z malých objemů vzorků. Techniky srážení oddělují frakce na základě principu rozdílné rozpustnosti. Protože se druhy proteinů liší stupněm hydrofobicity, mohou zvýšené koncentrace solí zesílit hydrofobní interakce mezi proteiny a způsobit srážení.

Extrakce

Příprava vzorku extrakcí zahrnuje izolaci cílových analytů ze složitého vzorku nebo z mnohem většího objemu vzorku. Tento proces odstraňuje rušivé složky vzorku, které by mohly blokovat HPLC a GC kolony. Rovněž zvyšuje koncentraci analyzované látky 100 až 5 000krát, čímž výrazně zlepšuje detekční citlivost. Jako součást selektivní a specifické přípravy vzorku pomáhá extrakce zajistit spolehlivější chromatografickou analýzu. Mezi typy extrakce patří extrakce kapalina-kapalina, extrakce na pevné fázi (SPE) a mikroextrakce na pevné fázi (SPME).

Afinitní chromatografie

Afinitní chromatografie separuje proteiny na základě reverzibilních interakcí mezi proteinem a specifickým ligandem, který byl navázán na chromatografickou matrici. Tato technika je vysoce selektivní a umožňuje purifikaci proteinů s vysokou kapacitou. Afinitní chromatografii lze použít vždy, když je k dispozici vhodný ligand pro daný protein.

Purifikace pomocí afinitní chromatografie zahrnuje kroky zachycení a eluce. Ve fázi zachycení se cílový protein specificky a reverzibilně váže na komplementární ligand, který byl imobilizován na chromatografické matrici. Cílem je izolovat, koncentrovat a stabilizovat cílový produkt při zachování jeho účinnosti a aktivity. Po promytí matrice za účelem odstranění nevázaného materiálu se vázaný cílový protein získá změnou podmínek na podmínky podporující eluci. Eluce se provádí specificky pomocí kompetitivního liganda nebo nespecificky změnou pH, iontové síly nebo polarity. Eluce umožňuje shromáždit cílový protein v purifikované a koncentrované formě.