Extrakce v pevné fázi (SPE)

Extrakce na pevné fázi (SPE) je technika určená k rychlé a selektivní přípravě a čištění vzorků před chromatografickou analýzou (např. HPLC, GC, TLC). Při SPE se jedna nebo více analytů z kapalného vzorku izoluje extrakcí, rozdělováním a/nebo adsorpcí na pevnou stacionární fázi.  

Příprava vzorku metodou SPE mění původní matrici vzorku na jednodušší matriční prostředí. Díky tomu je vzorek vhodnější pro následnou analytickou chromatografii, což často zjednodušuje a zlepšuje výslednou kvalitativní a kvantitativní analýzu. Jednodušší matrice vzorku také snižuje nároky kladené na analytický systém, což může prodloužit jeho životnost.

Optimální postup SPE vám umožní:

• Změnit matrice vzorků tak, aby byly kompatibilnější s cílovou chromatografickou metodou.
• Koncentrovat analyty (obohacení stopových množství) pro zvýšení citlivosti.
• Odstranit interference, které způsobují vysoké pozadí, zavádějící píky a/nebo nízkou citlivost během chromatografické analýzy.
• Chránit analytickou kolonu před kontaminanty.
• Automatizovat proces extrakce.

Jak funguje SPE?

Při SPE se stacionární fáze (sorbent nebo pryskyřice) váže buď na analyzovanou látku, nebo na nečistotu prostřednictvím silných, ale reverzibilních interakcí, aby spolehlivě a rychle extrahovala požadovanou analyzovanou látku ze složitého vzorku.

SPE je selektivní a univerzální, protože pro různé analyty a matrice je k dispozici mnoho různých sorbentů a elučních podmínek. Mezi běžné SPE sorbenty patří:

• Na bázi oxidu křemičitého
  • Obrácená fáze (C18, C8, kyano, fenyl)
  • Normální fáze (křemičitá, diolová, NH₂)
  • Iontově výměnné (SAX, WCX, SCX)
• Na bázi uhlíku
• Na bázi polymerů (různá složení, různé funkční skupiny)
• Ostatní, například Florisil® (křemičitan hořečnatý) nebo oxid hlinitý
• Smíšené lože: Kombinace téměř všech výše uvedených materiálů v postupných vrstvách

Strategie pro SPE

Při metodě „Bind‒Elute SPE“ je sledovaná analyta zachycena sorbentem a matriční interference procházejí přes kartuši. Při metodě „Interference Removal SPE“ jsou matriční interference zachyceny na sorbentu a sledované analyty procházejí skrz. Metody HybridSPE i QuEChERS SPE fungují na principu odstranění interference.

Optimální metoda SPE závisí na struktuře, rozpustnosti, polaritě a lipofilních vlastnostech (distribučních koeficientech) analyzované látky. K dispozici jsou výběrové příručky, které pomáhají zvolit nejvhodnější stacionární fázi a rozpouštědlo pro danou aplikaci.

Běžné aplikace SPE

SPE se často používá ve farmaceutickém, klinickém a vysoce výkonném diagnostickém testování, ve forenzní, environmentální a potravinářské/agrochemické průmyslu pro analýzy související s:

• farmaceutickými sloučeninami a metabolity v biologických tekutinách
• Návykových látek v biologických tekutinách
• Environmentálními znečišťujícími látkami v pitné vodě a odpadních vodách
• Pesticidy, antibiotika nebo mykotoxiny v potravinářských a zemědělských matricích
• Odsolování bílkovin a peptidů
• Frakcionace lipidů
• Vitamíny rozpustné ve vodě a v tucích