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Merck

細胞遊走・浸潤アッセイ

Cell Comb™スクラッチアッセイにおける細胞遊走の顕微鏡画像

腫瘍細胞自身ならびに腫瘍細胞の遊走または健康な組織への浸潤を可能にする微小環境に起こった複数の変化が累積した結果、がんが転移します。私たちの、遊走アッセイ、浸潤アッセイ、ボイデンチャンバーを用いる走化性および走触性アッセイのポートフォリオは、正常細胞および転移性細胞がin vivoで遭遇する状態のシミュレーションを可能にします。

セクションの概要



細胞遊走アッセイ

細胞遊走は、胚発生や血管新生、創傷治癒、免疫応答、炎症において重要です。転移性疾患は、がん関連死亡をもたらす主要な要因であるため、細胞遊走のメカニズムを理解することは、がん研究において非常に重要です。多くの細胞遊走アッセイでは、定性的なスクラッチアッセイまたはより定量的なボイデンチャンバー技術が用いられます。

ボイデンチャンバー法では、走化性および走触性による細胞遊走を観察します。走化性は、細胞外の化学的シグナルに反応して細胞が遊走することであるのに対して、走触性は、固定された細胞外マトリックス(ECM)のタンパク質勾配に向かって細胞が遊走することと説明されます。

走化性および走触性の両方で用いるQCM™遊走アッセイには、さまざまな孔径のマルチウェルプレートを取り揃えています。QCM™遊走アッセイでは、カルセインAM標識細胞を用いる他のプロトコルで必要な細胞の標識、スクラッチ、洗浄および細胞数計測が必要ありません。

InnoCyte™細胞遊走アッセイは、細胞の走化性遊走を調べるためのマルチウェルプレートです。このアッセイでは、細胞透過性蛍光色素を用いて、上皮細胞、間葉細胞および内皮細胞が、孔径8 μmの孔を通ってフィーダー層へ遊走するのを測定します。

細胞遊走用スクラッチアッセイ

スクラッチアッセイは、細胞遊走および創傷治癒の研究で用いられます。スクラッチアッセイでは、コンフルエント状態の単層細胞の表面をひっかき、創傷に似せた狭い隙間を作ります。次に、近くの細胞がその隙間へ遊走することを、隙間が埋まるまで観察します。私たちのCell Comb™スクラッチアッセイでは、スクラッチを高密度に作って傷縁の数を最大にしながら、隙間に遊走するのに十分な数の損傷を受けていない細胞を残します。

96ウェルプレートの拡大写真で、各ウェルにHT-1080細胞が入っており、中央にはっきりとした濃色の円形パターンがある。ウェルの配列は、横に3つ、縦に2つである。
96ウェルプレートの拡大写真で、各ウェルにHT-1080細胞が入っている。ウェルの配列は、横に3つ、縦に2つである。

HT-1080細胞による浸潤を96ウェル細胞浸潤アッセイで測定。非浸潤性の対照には、NIH3T3細胞を用いた。

細胞浸潤アッセイ

腫瘍細胞が基底膜ならびに周辺組織のECM成分を分解する能力は、転移能の指標となります。QCM™ボイデンチャンバーを用いる細胞浸潤アッセイは、細胞浸潤をin vitroで定量化するためのハイスループットかつ高感度のアプローチです。このアッセイでは、細胞が基底膜モデルを浸潤しますが、このメンブレンの孔は、ECMタンパク質の層で塞がれているために、非浸潤性細胞は通り抜けることができません。

Chemicon神経突起伸長アッセイは、Millipore®の組織培養用微細孔インサート技術を使用しています。これにより、神経突起は孔径1 µmの孔を通り抜けることができますが、細胞体は通り抜けることができません。このアッセイは、PC12細胞用に最適化されています。


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