저압 액체 크로마토그래피

흡착 크로마토그래피

액체-고체 크로마토그래피라고도 하는 흡착 크로마토그래피는 지지체 표면, 즉 고정상에서 화학 물질을 흡착, 탈착하여 화학 물질을 유지합니다. 흡착제는 고정상을 형성하고 용질은 반데르발스 힘(van der Waal force)과 입체적 상호 작용을 통해 이를 결합합니다. 흡착 부위는 일반적으로 고정상의 외부 표면에 있으므로 상대적으로 작은 입자가 고정상으로 사용됩니다. 실리카, 알루미나, 숯, 플로리실, 폴리아미드, 셀라이트, 규조토는 일반적으로 사용되는 흡착제입니다.

분할 크로마토그래피

분할 크로마토그래피는 섞이지 않는 두 액체 사이의 성분을 나누어 분리합니다. 두 액체 중 하나는 액체 이동상이고, 다른 하나는 고체 지지대 위에 고정된 액체입니다. 고체 지지체로 사용되는 재료로는 실리카겔, 규조토, 셀룰로오스, 폴리테트라플루오로에틸렌(PTFE), 폴리스티렌 등이 있습니다. 불활성 고체 지지체는 액체 고정상을 위한 넓은 표면적을 제공합니다.

친화성 크로마토그래피

친화성 크로마토그래피는 항체-항원, 효소-기질 또는 호르몬-수용체 쌍과 같이 선택적이고 가역적인 상호 작용을 활용하여 성분을 분리하며, 상호 작용하는 약제 중 하나를 고정상으로 삼습니다. '친화성 리간드'는 아크릴 비드, 아가로스(agarose), 토요펄 레진(Toyopearl resin)과 같은 고체 지지체 위에 고정된 상호 작용 물질로, 친화성 컬럼의 고정상 역할을 합니다.

겔 여과 크로마토그래피

크기 배제 크로마토그래피(size exclusion chromatography)라고도 하는 이 기술은 다양한 크기의 단백질 및 올리고머 형태의 단백질과 같이 크기가 다른 분자를 분리합니다. 고정상은 특정 크기의 기공을 가진 비드 형태의 가교 매트릭스로 구성된 레진입니다. 겔 여과 컬럼에는 폴리아크릴아마이드, 아가로스, 덱스트란(dextran) 또는 이들을 혼합한 비드가 포함되어 있습니다. 이는 컬럼 패킹 입자 내의 기공 부피에 대하여 부분적이거나 전체적인 액세스를 제공하여 더 작은 분석물을 분리합니다.

소수성 상호 작용 크로마토그래피(HIC)

소수성 상호 작용 크로마토그래피(HIC)는 표면 소수성 차이에 따라 생체 분자를 분리합니다. 이는 부틸, 옥틸, 페닐과 같은 컬럼 레진과 연결된 비극성 소수성 그룹과 생체 분자의 소수성 그룹의 상호 작용을 기반으로 합니다. 이 기술은 변성이 덜한 조건과 매트릭스를 사용하기 때문에 생물학적 활성을 보존하면서 단백질을 분리하는 데 널리 사용됩니다.

이온 교환 크로마토그래피(IEX)

이온 교환 크로마토그래피는 순 표면전하의 차이에 따라 분자를 분리합니다. 셀룰로오스, 실리카, 스티렌-디비닐벤젠과 같은 매트릭스의 표면은 하전된 작용기와 공유 결합되어 있습니다. 레진의 고정된 이온 교환 그룹은 반대 전하를 가진 분자와 상호 작용합니다. 양이온 교환 크로마토그래피에서 이동상의 양전하를 띤 물질은 음전하를 띤 이온교환 레진에 결합합니다. 음이온 교환 크로마토그래피에서 이동상의 음전하를 띤 물질은 양전하를 띤 이온교환 레진에 결합합니다.

저압 액체 크로마토그래피 시스템

저압 액체 크로마토그래피(LPLC) 시스템은 일반적으로 분리를 위해 고정상으로 채워진 컬럼, 일정한 유량으로 컬럼을 통해 이동상을 전달하는 펌프, 컬럼을 빠져나가는 용출물을 측정하는 검출기로 구성됩니다.
또한 LPLC 시스템은 이동상 흐름에 시료를 정확히 주입하는 주입 시스템을 갖추고 있어, 정밀하고 재현 가능한 시료 주입을 보장합니다. 일부 설정에는 분획 수집기가 포함되어 분리된 구성 요소를 수집하여 추가 분석을 진행할 수 있습니다.