Thin Layer Chromatography
박막 크로마토그래피(TLC)는 혼합물속에 있는 화합물을 분리하도록 사용하는 친화성에 기반한 방법입니다. TLC는 정성적 시료 분석과 정량적 시료 분석에 널리 사용되는 다용도의 분리 방법입니다. TLC는 살충제, 스테로이드, 알칼로이드, 지질, 뉴클레오티드, 글리코사이드, 탄수화물, 지방산 등 사실상 모든 종류의 물질을 분석하도록 사용될 수 있습니다.
TLC에서 고정상은 얇은 흡착 물질층으로, 보통 실리콘 젤이나 산화 알루미늄을 불활성 판인 유리, 플라스틱 또는 알루미늄 표면에 코팅합니다. TLC 분판의 한쪽 끝에 시료 반점을 찍고 유기 용매(이동상)가 들어있는 밀폐된 챔버에 수직으로 세워둡니다. 모세관 힘에 의해 이동상이 분판 위로 이동하며, 시료의 구성 성분이 정지상과 이동상에 대한 친화력 차이에 따라 다양하 거리를 이동합니다. 용매가 분판 상단에 도달하면 분판을 개발 챔버에서 제거하고 건조시킵니다. 분리된 구성 성분은 분판에 반점으로 나타나며 각 구성 성분의 보유 계수(Rf)를 평가합니다.
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관련 기술 문서
- In this article we present several HPTLC applications and analytical standards for ginsenosides.
- Thin layer chromatography
- HPTLC-MS was used to analyze stevioside and rebaudioside in artificial sweeteners, stevia plants, cola and isotonic drinks with a minimum of sample preparation.
- Thin layer chromatography (TLC), an analytical technique often used to separate and identify compounds present in a given mixture, can also be used to determine the purity of a particular substance within that mixture
- TLC plates, with silica gel, gypsum as binder, International Pharmacopoeia compliant, for identification of Atenolol and Chlorthalidone in tablets.
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관련 프로토콜
- What causes a dissolved mixture to separate when applied to a TLC plate? The thin-layer chromatography process relies on capillary forces. During development of the chromatogram, the mixture of substances is first transported by the mobile phase, then resides on the stationary phase for a while, and is carried along again.
- Powdered black pepper was chosen as example for dietary supplements, being a source for pierine. It is tested according to the current United States Pharmacopeia (USP) guidelines using HPTLC and HPLC.
- HPTLC was used to analyze caffeine in coffee. Filtration of coffee through a PTFE syringe filter was the only sample preparation. Quantitation was conducted with a TLC scanner.
- Silica gel G 254 plates are suitable for analysis of Dextromethorphan following the European pharmacopeia monograph.
- The modern thin-layer chromatography (TLC) offers advantages also in the field of cosmetics to quickly and simultaneously analyze samples with densitometric detection.
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TLC 절차 및 원리
TLC는 두 가지 상 사이의 다른 친화력으로 고정상과 이동상 사이에 혼합물 성분이 분리되는 고전적인 크로마토그래피 원리를 기반으로 하고 있습니다.
TLC 보유 계수(Rf)
보유 계수(Rf)는 TLC 분판을 따라 이동한 혼합물 측정에 사용됩니다. Rf는 개별 구성 성분이 이동한 거리를 용매가 이동한 총 거리로 나눈 값을 의미합니다. 이 값은 언제나 0과 1 사이입니다.
| Rf = | 구성 성분이 이동한 거리 |
| 용매가 이동한 거리 |
일반적으로 화합물이 고정상 흡착제에 강하게 결합될수록 TLC 분판에서 이동하는 속도가 느려집니다. TLC 흡착제는 일반적으로 극성을 띠기 때문에 비극성 화합물은 분판 위로 더 빠르게 이동하여 더 높은 Rf 값을 갖는 반면, 극성 화합물은 느리게 이동하고 더 낮은 Rf 값을 갖는 경향이 있습니다.
TLC 애플리케이션
TLC는 의약품, 임상시험, 환경독성학, 식품, 물과 살충제 분석, 화장품 등 많은 산업과 연구 분야에서 널리 사용되고 있습니다. TLC의 일반적인 애플리케이션:
- TLC는 의약품, 임상시험, 환경독성학, 식품, 물과 살충제 분석, 화장품 등 많은 산업과 연구 분야에서 널리 사용되고 있습니다.
- 식품과 화장품에서 색상, 성분, 방부제, 감미료의 식별 및 정량화
- 의약품 제제의 품질 관리 및 순도 테스트
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