qPCR

PCR แบบเรียลไทม์เชิงปริมาณ (QPCR) ใช้โมเลกุลของตัวรายงานฟลูออเรสเซนต์เพื่อช่วยให้สามารถหาปริมาณของผลิตภัณฑ์ที่ขยายได้ เช่นเดียวกับใน PCR ทั่วไปเทมเพลต DNA, cDNA หรือ RNA จะถูกขยายแต่ในแต่ละรอบสัญญาณฟลูออเรสเซนต์จะถูกตรวจสอบหาการหาปริมาณสัมพัทธ์หรือสัมบูรณ์

เทคนิคนี้มีประโยชน์สำหรับการวิจัยหลายด้านรวมถึงการวิเคราะห์การแสดงออกของยีนการพิมพ์ยีนการวิเคราะห์ microRNA การวิเคราะห์ความแปรปรวนทางพันธุกรรมและการวิเคราะห์โปรตีน

Featured Categories

PCR Reagents & Kits

ปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรส (PCR) เป็นแกนหลักในห้องปฏิบัติการชีววิทยาโมเลกุล PCR ใช้สำหรับการขยายดีเอ็นเอตามลำดับของขนาดและรีเอเจนต์และทรัพยากรของเราเหมาะสำหรับเวิร์กโฟลว์การวิจัยจำนวนมากรวมถึงการวิเคราะห์การแสดงออกของยีนการพิมพ์ลำดับและความต้องการใช้การกลายพันธุ์

ช้อปเลย

การโคลนโมเลกุลและการแสดงออกของโปรตีน

การโคลนโมเลกุลและวิธีการแสดงออกของโปรตีนและโปรโตคอลสำหรับการโคลนที่เชื่อถือได้และการแสดงออกของโปรตีนที่แข็งแกร่งจากแมลงแบคทีเรียและเวกเตอร์การแสดงออกของโปรตีนสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม

ช้อปเลย

เอพิเจเนติกส์

รีเอเจนต์ epigenetic และทรัพยากรสำหรับการตรวจสอบสายพันธุ์ RNA การดัดแปลงดีเอ็นเอ methylation การปรับเปลี่ยนโครมาตินและการปรับเปลี่ยนไฮสโตน

ช้อปเลย

ไมโครไบโอม

การวิเคราะห์ Gut Microbiome ที่ครอบคลุม: ค้นพบโซลูชันแบบองค์รวมที่ครอบคลุมการเตรียมตัวอย่างการจัดลำดับชีวสารสนเทศและสถิติ ตั้งแต่ 16 วินาทีถึง WGS

ช้อปเลย

วิธีการวิเคราะห์ ข้อมูล PCR q

การเรืองแสงของโมเลกุลของผู้รายงานจะถูกวัดและวัดปริมาณโดยทั่วไปจะเป็นสีย้อม (เช่น SYBR^® Green, Ethidium Bromide) ที่ผสมระหว่างฐานในดีเอ็นเอแบบดับเบิลเกลียวหรือโพรบที่ออกแบบมาเพื่อผูกลำดับเฉพาะ (เช่น Molecular Beacons,โพรบ TaqMan ®) บน DNA

การหาปริมาณสัมพัทธ์ของ ข้อมูล q PCR

There are two major quantification methods for qPCR data. การหา ΔΔCt วนสัมพัทธ์ซึ่งเป็นวิธีที่พบได้บ่อยกว่านั้นคือการใช้ข้อมูลซึ่งการแสดงออกหรืออัตราส่วนความอุดมสมบูรณ์ของยีนเป้าหมายในตัวอย่างจะถูกพิจารณาเปรียบเทียบกับยีนควบคุมและปรับให้เป็นมาตรฐานตามอัตราส่วนการแสดงออกของยีนอ้างอิง เนื่องจากค่า E ของประสิทธิภาพสำหรับยีนเป้าหมายและยีนอ้างอิงแตกต่างกันวิธีการนี้จึงคำนึงถึงความแตกต่างของค่า E ด้วย วิธีนี้มักใช้ในการวิเคราะห์การแสดงออกของยีนบ่อยขึ้น

การหาปริมาณ ข้อมูลอย่างสมบูรณ์ของข้อมูล q PCR

วิธีที่สองคือการหาปริมาณสัมบูรณ์เป็นวิธีที่พบได้ทั่วไปในจุลชีววิทยาสิ่งแวดล้อมและใช้ประโยชน์จากเส้นโค้งมาตรฐาน (SC) เมธอด SC จะใช้ชุดการเจือจางของความเข้มข้นเทมเพลตที่รู้จัก N0 เพื่อสร้างเส้นโค้งมาตรฐานโดยใช้การถดถอยเชิงเส้นของ LOG(N0) เทียบกับ CT (รอบเกณฑ์) จากนั้นจะใช้ในการคำนวณความเข้มข้นของแม่แบบของตัวอย่าง พื้นฐานของวิธีนี้คือค่าประสิทธิภาพของตัวอย่างจะเท่ากับค่ามาตรฐาน

เลือกซื้อผลิตภัณฑ์ qPCR ทั้งหมด