ウイルスベクターの特性評価とバイオセーフティ

原材料

多くの新しい治療薬、特に細胞治療では、ヒトまたは動物由来の原材料を製造工程から除去することが極めて困難です。これらの原材料を工程で使用する場合、外来性汚染因子が混入していないことを確認するため、徹底的な試験を実施しなければなりません。

セルバンク

バイオ医薬品の製造用セルバンクについては、生物学的製剤の規制ガイドラインに従って徹底的に特性評価を行い、外来性汚染因子の混入を否定するための試験を実施しなければなりません。この試験には、細胞種の同定、細菌、真菌、マイコプラズマ試験、場合によってはマイコバクテリア試験、特異的または広範囲にウイルスを検出する試験、、レトロウイルス試験などが含まれます。

未精製バルクハーベスト

形質転換したプロデューサー細胞が含まれる可能性のある未精製バルクにハーベスト対しては、同一性の確認を実施する必要があります。目的遺伝子の存在についても確認すべきかもしれません。ベクターの力価もこの段階で測定しておくべきです。ウイルスベクターの増殖可能性を否定することもまた重要です。未精製バルクハーベストに対する試験には、微生物（細菌、真菌、マイコプラズマ）試験や、外来性ウイルスを広範囲に検出する試験が含まれます。

製造工程におけるウイルスクリアランス

従来のバイオ医薬品やノンエンベロープウイルスベクター（AAVおよびアデノウイルス）とは異なり、レトロウイルスやレンチウイルスなどのエンベロープウイルスベクターの場合、製造工程におけるウイルスクリアランスを主張できません。製品に影響を与えることなく、潜在的なウイルス汚染物質を分離または不活化することはできません。一方、ノンエンベロープウイルスベクターでは、製造工程にウイルスの不活化や除去ステップを追加することが可能で、ウイルスクリアランスの主張が可能です。

精製バルクハーベスト

精製バルクハーベストには、目的遺伝子の確認やAAV血清型の確認など、同一性のベリフィケーションが含まれます。感染力価、ゲノム力価、またこの段階においては薬剤の効力の定量化が適切です。微生物汚染および増殖可能なウイルスベクターが存在しないことも確認すべきです。残留物および工程由来不純物が存在しないことのベリフィケーションも提案いたします。

最終製品

最終ベクター製品の同一性は必ず確認する必要があります。この試験には目的遺伝子のシーケンシング、感染力価、ゲノム力価、薬剤の効力の測定試験が含まれます。無菌性およびエンドトキシンのレベルも分析すべきです。さらに、最終製品の特性評価試験では、ベクターの凝集性、pH、浸透圧、性状および微粒子なども測定します。