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Merck

細胞分離培地

細胞分離培地は、特定の細胞集団を分離・精製するために使用されます。これらの培地は、特定の特性やマーカーに基づいて、全血や組織サンプルなどの複雑な混合物から標的細胞を分離しやすくします。密度勾配遠心法では、勾配培地の密度範囲と試料の微粒子に基づいて、生物学的微粒子である特定の細胞集団が分離されます。細胞分離のプロセスは、創薬、免疫療法、再生医療、幹細胞研究など、医薬品研究開発のさまざまな分野で重要です。

私たちは、白血球、ウイルス、DNA、RNA、細胞小器官の分離または抽出、そしてその他の用途のために、幅広いポートフォリオの密度勾配培地を提供しています。製品ラインナップには、白血球分離用のHistopaqueヨウ素化勾配培地、哺乳類細胞分離用の多糖類、哺乳類の細胞および細胞小器官分離用のコロイドシリカ培地、およびDNA、ウイルスおよびタンパク質分離用の無機塩が含まれます。



ACCUSPIN™ SYSTEM-HISTOPAQUE培地による細胞分離

Histopaque-1077を用いたACCUSPIN™システムでは、放射線滅菌した遠沈管を使用し、多孔性の高密度ポリエチレンバリア(「フリット」)で2つのチャンバーに分けるように設計されています。このシステムでは、下層チャンバーでHistopaque分離培地と交わるリスクなく、上層のチャンバーに抗凝固剤処理した全血を添加できます。Histopaque密度勾配培地によって、リンパ球および単核細胞(単球)をクリアに分離することが可能です。赤血球は凝集し、顆粒球はわずかに高張になるため、これらの沈降速度は上昇し、結果的にACCUSPIN™チューブの底で細胞塊となります。分離プロセスが完了した後は、分離した細胞をさらに特性評価し、培養し、分析して、フローサイトメトリー、細胞ベースのアッセイ、分子分析または細胞療法の開発などの下流のアプリケーションで使用することができます。

HISTOPAQUEヨウ素化勾配培地

Histopaque培地は、密度に基づいてさまざまな細胞タイプを分離するように設計されており、特定の細胞集団の分離と精製のために生物医学研究で一般的に使用されています。Histopaque培地は、無菌ろ過およびエンドトキシン検査済みのポリスクロースとジアトリゾ酸ナトリウムからなる溶液で、正確に密度が調整されています。これらの即時使用可能な分離培地によって、少量の全血から迅速かつ最適に生細胞が回収できます。Histopaque分離培地は通常、次のような用途に使用されます:末梢血単核球(PBMC)の分離:Histopaque培地は全血サンプルからPBMCを分離するためによく使用されます。PBMCは、リンパ球、単球、およびその他の有核細胞から成ります。血液サンプルと遠心チューブの間にHistopaque培地を積層すると、遠心分離により赤血球や血小板などの他の血液成分からPBMCを分離できます。細胞分画:Histopaque培地は、混合細胞集団を密度に基づいて異なる層に分画するために使用できます。遠心チューブ内に分離培地を積層し、細胞懸濁液を慎重に加えると、遠心分離により異なる細胞タイプを含む明確な層が形成されます。この技術は、以後の分析や実験のために細胞を分離・精製するうえで有用です。特定の細胞タイプの分離:Histopaque分離培地は、密度または特定のマーカーに基づいて特定の細胞集団を分離するために使用できます。分離培地と細胞懸濁液を慎重に積層すると、遠心分離により目的の細胞を不要な細胞から分離できます。この技術は、特定の細胞タイプを研究している研究者や、希少な細胞集団を濃縮したい研究者に特に有用です。ISO 9001品質マネジメントに従って製造したHistopaque製品は、ロットごとに性能試験が実施され、一貫した血液細胞株の選択的分離や生存可能な無変形細胞の最適な分離を可能とし、さらに外来細胞の干渉を最小限に抑えることができます。

PERCOLLコロイドシリカ培地

コロイドシリカ培地は、ポリビニルピロリドン(PVP)でコーティングした直径15~30 nmのシリカ粒子のコロイド状懸濁液で、通常、生物医学および医薬品研究で細胞分離・精製のために使用されます。PVPによって、粒子と生物学的材料との相互作用が減少し、等張生理食塩液中のコロイドが安定化します。その密度はPercoll溶液の濃度を変えることで調整できるため、研究者は特定の分離ニーズに合わせて勾配をカスタマイズできます。Percollコロイド培地は極めて浸透圧が低く、密度によってほとんど変化しません。また、遠心によって形成される勾配浸透圧は、適量のスクロースまたは緩衝液を添加することで簡単に調整できます。Percollの勾配は、細胞、細胞小器官、膜小胞、および数種類のウイルスでさえ、等密度分離に理想的です。

無機塩

イオン性勾配培地は、イオン勾配溶液またはイオン性溶液としても知られ、表面電荷または電気特性に基づいて細胞を分離する細胞分離技術で使用されます。これらの培地は、静電場または電荷差を生成し、表面電荷が異なる細胞を分離できるようにします。イオン性勾配培地を利用する細胞分離技術の例としては、電気泳動、誘電泳動(DEP)、および等電点電気泳動(IEF)があります。培地と技術の具体的な選択は、分離する細胞の性質、望ましい分離機構、および全体的な実験目的によって決まります。濃縮重金属塩を含むイオン性勾配培地は、核酸の等密度分離専用です。最も広く使用されている重金属塩は塩化セシウムと硫化セシウムで、勾配密度は1.91 g/cm3までです。使用される他の塩には、ヨウ化ナトリウム、臭化ナトリウムおよびルビジウム塩が含まれます。イオン性勾配培地および技術の選択とデザインでは、pH、導電率、バッファー組成、研究対象の細胞の電気的特性などの要素を慎重に考慮する必要があります。

非イオン性ヨウ素化密度勾配培地

非イオン性ヨウ素化密度勾配培地は、生物学、生化学、臨床診断などのさまざまな分野の分離・精製技術に使用される特殊な物質です。これらの培地は通常、密度勾配を形成するヨウ素化化合物をベースにしており、密度に基づいて粒子を分離できます。非イオン性ヨウ素化密度勾配培地は、密度勾配遠心分離の原理に基づいて機能します。人気の密度勾配培地で使用されている多くのヨウ素化化合物の構造は、トリヨード安息香酸などのヨウ素化化合物をベースとして、溶解度を高めて水溶液中で連続的な密度勾配を形成させるために親水基が付加されています。私たちは、生物学的微粒子の脱水を最小限に抑えるため、より高密度のイオヘキソール液(NycodenzおよびHistodenz™など)を提供しています。イオヘキソールは毒性がなく、哺乳類細胞では代謝されません。

多価アルコール

多価アルコール非イオン性勾配培地のポートフォリオには、巨大分子の速度ゾーン分離、およびウイルスや細胞小器官の等密度分離に広く使用されているスクロース勾配が含まれています。長所としては、安定性、不活性および低コストがありますが、短所としては、濃縮液による高張性があります。また私たちは、相当するスクロース液より低密度のグリセロール液も提供しています。これにより、減圧によって簡単に除去しながら、ある種の酵素の活性を抑えられます。

多糖類

スクロース液の使用によって上昇する高浸透圧問題を回避するため、最も広く使用されている多糖類培地Ficollを提供しています。Ficoll合成ポリマーは、密度勾配溶液の調製に一般的に使用されるポリビニルピロリドンでコーティングされたポリ(エチレングリコール)(PEG)です。Ficoll溶液は、さまざまな生物学的および生化学的用途、特に細胞の分離と単離に広く利用されています。この溶液は、エピクロロヒドリンによってスクロース分子を重合することで製造され、平均分子量400,000の多糖類です。20%(w/v)未満のFicoll溶液の密度は1.07 g/cm3となり、浸透圧的に不活性とみなされています。Ficoll液の主な短所は、スクロール液に比べて粘度が高いことです。Ficoll溶液は、さまざまな医薬品研究開発プロセスで重要な役割を果たし、細胞、ウイルス、その他の生物学的成分の単離、精製、特性評価を促進し、それによって創薬、免疫療法、およびその他の医薬品用途の進歩に貢献します。これらは、細胞分離技術、特に末梢血または他の細胞源から単核球を単離するために一般的に使用されます。細胞懸濁液をFicoll密度勾配上に積層して遠心分離することにより、リンパ球や単球などの目的の細胞を、他の細胞タイプや、赤血球や顆粒球などの不要な成分から分離できます。Ficoll溶液は、浮遊密度に基づいて粒子や分子を分離する技術である密度勾配遠心分離にも使用されます。遠心分離中、粒子または細胞はFicoll勾配を介して移動し、それぞれの密度に対応する位置に沈降します。これにより、不均一な混合物中に存在するさまざまな成分を分離・分画できます。


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