Transfection & Gene Editing
트랜스펙션은 핵산을 진핵 세포에 도입하는 공정입니다. 세포는 DNA를 유전체에 삽입하기 위해 안정적으로 트랜스펙션되거나, 일시적인 단백질 발현을 위해 일시적으로 트랜스펙션될 수 있습니다. 화학적, 물리적 그리고 생물학적 방법을 사용하여 세포를 트랜스펙션시켜, 세포학적 환경에서 유전자 기능과 발현을 연구할 수 있도록 합니다. 애플리케이션에는 유전자 치료, 유도만능줄기세포(iPSC), RNA 간섭(RNAi)에 의한 유전자 침묵화 그리고 치료용 항체 및 단백질의 생산 등을 포함합니다.
주요 카테고리
일반적인 트랜스펙션 방법
- 지질 및 지방소체(liposome): 양전하 지질은 전달을 위한 DNA 또는 RNA를 포함하는 지방소체를 형성합니다. 이러한 지방소체는 세포막과 융합하여 세포 내부로 핵산을 방출합니다.
- 인산칼슘: 인산칼슘은 세포 표면에 DNA가 결합하도록 촉진하여, 세포내이입(endocytosis)에 의해 유전적 물질이 세포에 진입하도록 허용합니다.
- 양전하 폴리머(polymer): 폴리머 기반 트랜스펙션에서, 외인성 DNA는 세포내이입으로 숙주 세포에 진입하는 폴리에틸렌이민(PEI)과 같은 양전하 폴리머와 복합체를 형성합니다.
- 렌티바이러스 형질도입: 세포는 변형된 렌티바이러스 벡터로 감염되며, 전달을 위한 숙주 유전체로의 삽입을 위해 바이러스 RNA를 이중 사슬 DNA로 변환합니다.
- 미세주입: 표적 세포는 먼저 현미경 아래에 위치합니다. 그 후 미세한 유리 모세관 주사침을 이용해 핵산을 세포질 또는 핵에 직접 주사합니다.
- 전기천공: 세포는 고강도 전류에 노출되어 세포막이 불안정화되면, 유전자 전달을 위한 세포 투막성이 증가합니다.
트랜스펙션은 유전자 편집과 유전자 침묵화를 위해 일상적으로 사용되어 복잡한 생물학적 공정에 대한 우리의 이해를 높이고 질병 치료를 위해 유전자 치료의 사용을 가능하도록 합니다.
- CRISPR-Cas 시스템은 박테리아 방어 기전을 이용하며, 이는 유전적 CRISPR(주기적 간격으로 분포하는 짧은 회문구조 반복서열)과 Cas(CRISPR-관련) 내부가수분해효소를 함께 사용하여 표적 위치에서 유전체 DNA를 절단하고 in vivo에서 유전자를 삭제 또는 교체합니다.
- 설계된 아연-손가락 핵산분해효소(ZFN)는 DNA 결합 도메인과 내부가수분해효소로 구성되며 유전자 편집을 위해 표적 지점에서 DNA를 절단합니다.
- 짧은 헤어핀 RNA(shRNA) 및 소형 간섭 RNA(siRNA)와 같은 RNAi 시약은 유전자 침묵화를 위해 전사를 억제하거나 서열 특이성 RNA 분해 과정을 활성화하여 유전자 전사물(transcript) 수준을 제한합니다.
관련 자료
- Transfection introduces genetic material into cells, aiding research in gene expression and cell biology.
- Browse our convenient transfection reagent selection guide to match the best reagent for your specific cell line and application needs.
- Automation ensures reproducible results in high-throughput assays like cell transfection, reducing manual handling variations.
- Small inhibitory RNAs offer easy gene expression knockdown in mammalian cells, revolutionizing gene research.
- Get tips for handling lentiviruses, optimizing experiment setup, titering lentivirus particles, and selecting helpful products for transduction.
- 모두 보기 (17)
관련 프로토콜
- Universal Transfection Reagent enables efficient nucleic acid delivery into various cells, compatible with different cell culture conditions.
- Protocols for Transfecting Common Cell Lines with X-tremeGENE™ Transfection Reagents
- Cell preparation for transfection Plate cells approx. 24 hours before transfection making sure cells are at optimal concentration (70 – 90 % confluency).
- Calcium phosphate transfection is a common method for the introduction of DNA into eukaryotic cells. This protocol can be optimized for use with a wide variety of cell types.
- 지질 제형의 특성은 조성(양이온, 음이온, 중성 지질)에 따라 달라질 수 있지만, 조성에 상관없이 모든 지질 소포에 동일한 준비 방법을 사용할 수 있습니다. 절차의 일반적 요소에는 수화를 위한 지질 준비, 교반을 사용한 수화, 소포의 균질 분포를 위한 크기 측정이 포함됩니다.
- 모두 보기 (23)
더 많은 관련 문서와 프로토콜을 찾아보세요.
저희가 도와드리겠습니다
문의 사항이 있으시면 고객 지원 요청서를 제출하시거나
또는 당사 고객 서비스 팀에 말씀해 주십시오.
이메일 [email protected]
또는 전화 +1 (800) 244-1173
추가 지원
- Chromatogram Search
Use the Chromatogram Search to identify unknown compounds in your sample.
- 계산기 및 앱
웹 툴박스 - 분석 화학, 생명과학, 화학 합성 및 재료 과학을 위한 과학 연구 도구 및 리소스.
- Customer Support Request
씨그마 알드리치의 주문, 제품, 계정 및 웹사이트에 대해 궁금하신 부분을 확인할 수 있습니다
- FAQ
Explore our Frequently Asked Questions for answers to commonly asked questions about our products and services.
계속 읽으시려면 로그인하거나 계정을 생성하세요.
계정이 없으십니까?