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ChIPAb+ トリメチル-ヒストンH3（Lys27） - ChIP検証済み抗体およびプライマーセット

from rabbit, purified by using Protein A

• 別名: Chip Antibody and primer set, H3K27me3 ChIP, H3K27me3, Histone H3 (tri methyl K27), Histone H3K27me3, Histone H3K27me3 ChIP
• UNSPSCコード: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.32
• クローン: polyclonal
• application: ChIP; WB
• 化学種の反応性: human, mouse
• テクニック: ChIP: suitable; western blot: suitable
• citations: 196

特性

• 由来生物: rabbit
• 品質水準: 100
• クローン: polyclonal
• 精製方法: using Protein A
• 化学種の反応性: human, mouse
• メーカー／製品名: ChIPAb+; Upstate^®
• テクニック: ChIP: suitable; western blot: suitable
• NCBIアクセッション番号: NP_003484
• UniProtアクセッション番号: Q16695
• 輸送温度: dry ice
• 遺伝子情報: human ... H3F3B(3021)

詳細

詳細

すべてのChIPAb+抗体は、ロットごとに
毎回、クロマチン沈降について個別に検証されています。各ChIPAb+抗体セットには対照プライマー（ロットごとにqPCRで検査）が含まれており、遺伝子座特異的な状況においてIPの結果を生物学的に検証することができます。qPCRプロトコルとプライマー配列が提供されているため、クロマチンに対して抗体を使用する際にChIPプロトコルを検証することができます。
ChIPの特異性を保証するため、各セットにはネガティブコントロール抗体が含まれています。ChIPAb+トリメチルヒストンH3（Lys27）セットには、抗トリチルヒストンH3（Lys27）抗体、ネガティブコントロール抗体（精製ウサギLys9）、およびヒトアルファサテライトの139塩基対領域を増幅するqPCRプライマーが含まれています。トリメチルヒストンH3（Lys4）とネガティブコントロール抗体は拡張性のある「ChIPごと」の反応サイズで供給され、トリメチルヒストンH3（Lys4）関連クロマチンの沈降を機能的にバリデーションするために使用できます。

ヒストンのメチル化は、アルギニンまたはリジンという2つの異なる残基で生じる可能性があります。ヒストンのメチル化は、メチル化した残基に応じて転写活性化または転写抑制が関与する場合があります。ヒストンH3のリジン27は、EZH2やNSD3などのさまざまなヒストンメチルトランスフェラーゼによって、モノ-、ジ-またはトリメチル化（ヒストンH3モノメチルLys27、ヒストンH3ジメチルLys27、ヒストンH3トリメチルLys27）する可能性があります。この残基のメチル化は、主に転写抑制が関与して生じます。

特異性

トリメチルヒストンH3（Lys27）

幅広い種での交差反応性が予想されています。

免疫原

エピトープ：トリメチルLys27

ヒトヒストンH3の残基27のトリメチルリジンに相当するme3Kの配列AR(me3K)SAPを含むKHL結合、合成2X分岐ペプチド。

アプリケーション

ChIPグレード抗体と、H3K27Me3のクロマチン免疫沈降専用のコントロールPCRプライマーを含む、トリメチルヒストンH3（Lys27）ChIPバリデーション済みの抗体とプライマーのセット。

クロマチン免疫沈降：
2x10⁶個のHeLa細胞から調製した超音波処理クロマチンに対し、4 μgの精製抗トリメチルヒストンH3（Lys27）抗体または正常ウサギIgGおよびMagna ChIP Aキット（カタログ番号：17-610）を用いてクロマチン免疫沈降を行いました。トリメチルヒストンH3（Lys27）関連DNA断片が正常に濃縮されたことを、ヒトGAPDHプロモーターに隣接するChIPプライマーGAPDHおよびヒトMyoDのプロモーターを標的とするプライマーを用いたqPCRで確認しました。
実験の詳細については、EZ-Magna ChIP A（カタログ番号：17-408）またはEZChIP（カタログ番号：17-371）キットプロトコルを参照してください。

ウェスタンブロッティング：
リコンビナントヒストンH3（レーン2）およびHeLa細胞酸抽出物（レーン1）を、電気泳動で分離し、ニトロセルロースに転写し、1:5000希釈した抗トリメチルヒストンH3 Lys27（0.4 μg/mL）で標識しました。
HRP標識したヤギ抗ウサギ二次抗体と化学発光検出システムを用いてタンパク質を可視化しました（図参照）。

研究のカテゴリー
エピジェネティクス・核内機能分子

研究のサブカテゴリー
ヒストン

包装

1キットあたり25アッセイ、クロマチン免疫沈降1回あたり約4 μL

構成

抗トリメチルヒストンH3（Lys27）ポリクローナル抗体、1バイアル

ポリクローナルコントロールウサギ血清、1バイアル

ヒトアルファサテライトプライマーセット、1バイアル

品質

クロマチン免疫沈降：
3x10⁶ NIH3T3 L1細胞から調製した超音波処理クロマチンに対し、4 μgの精製抗体または正常ウサギIgGおよびMagna ChIP^® Aキット（カタログ番号：17-610）を用いてクロマチン免疫沈降を行いました。トリメチルヒストンH3
（Lys27）関連DNA断片が正常に濃縮されたことを、ChIPプライマーヒトアルファサテライトを用いたqPCRで確認しました（図参照）。
実験の詳細については、EZ-Magna ChIP A（カタログ番号：17-408）またはEZ-ChIP（カタログ番号：17-371）キットプロトコルを参照してください。

ターゲットの説明

17 kDa

物理的形状

抗トリメチルヒストンH3（Lys27）（ウサギポリクローナルIgG）。0.1 M Tris-グリシン、pH 7.4、0.15 M NaCl、0.05%アジ化ナトリウムを含む100 μLのバッファー中のプロテインA精製IgG 100 μgを含むバイアル1本。－20℃で保存してください。

正常ウサギIgG。0.1%アジ化ナトリウムを含有する125 μLの保存緩衝液中にウサギIgG 125 μgを含むバイアル1本。－20℃で保存してください。

ChIPプライマー、ヒトアルファサテライト。ヒトアルファサテライトに特異的な5 μMの各コントロールプライマーを75 μL含むバイアル1本。－20℃で保存してください。
フォワード：CTG CAC TAC CTG AAG AGG AC
リバース：GAT GGT TCA ACA CTC TTA CA

保管および安定性

－20℃で出荷日から1年間。

アナリシスノート

コントロール
ヒトアルファサテライトに特異的な5 μMの各コントロールプライマーを75 μL含むバイアル1本。－20℃で保存してください。

フォワード：CTG CAC TAC CTG AAG AGG AC

リバース：GAT GGT TCA ACA CTC TTA CA

法的情報

MAGNA CHIP is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

免責事項

メルクのカタログまたは製品に添付されたメルクのその他の文書に記載されていない場合、メルクの製品は研究用途のみを目的としているため、他のいかなる目的にも使用することはできません。このような目的としては、未承認の商業用途、in vitroの診断用途、ex vivoあるいはin vivoの治療用途、またはヒトあるいは動物へのあらゆる種類の消費あるいは適用などがありますが、これらに限定されません。

安全性情報

• 保管分類コード: 12 - Non Combustible Liquids
• 引火点(°F): Not applicable
• 引火点(℃): Not applicable