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Merck
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安全性情報

C2399

Sigma-Aldrich

コラゲナーゼ Clostridium histolyticum由来

0.2 μm filtered, high purity, purified by chromatography, Type VII-S, ≥4 FALGPA units/mg solid, ≥700 CDU/mg solid (CDU = collagen digestion units)

別名:

クロストリジオペプチダーゼA

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About This Item

CAS番号:
9001-12-1
Enzyme Commission number:
3.4.24.3 (BRENDA, IUBMB)
EC Number:
232-582-9
MDL番号:
MFCD00130830
UNSPSCコード:
12352204
NACRES:
NA.54

品質水準

200

無菌性

0.2 μm filtered

形状

lyophilized powder

比活性

≥4 FALGPA units/mg solid
≥700 CDU/mg solid (CDU = collagen digestion units)

精製方法

chromatography

溶解性

TESCA buffer (50 mM TES, 0.36 mM Calcium chloride, pH 7.4): soluble 0.05-0.1 mg/mL at 37 °C

保管温度

−20°C

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アプリケーション

Clostridium histolyticum（クロストリジウムヒストリチクム）由来のコラゲナーゼは以下の用途に用いられています。
  • マウスにおける脳内出血の誘発
  • 免疫蛍光染色のためのコラーゲン3Dゲルの消化
  • マウスにおける局所性血液溢出・出血の誘発

コラゲナーゼは、終末糖化産物（AGE）の研究を目的とした動脈組織の処理に用いられています。また、ヒト腫瘍、マウス腎、ヒト脳、肺、上皮、その他多くの組織の細胞分散に、他のプロテアーゼとともに用いられています。肝臓および腎臓の灌流試験、膵島の分離、非実質肝細胞の単離にも有用です。

生物化学的／生理学的作用

Clostridium histolyticumには2種類のコラゲナーゼが含まれています。クロストリジウムコラゲナーゼは哺乳類コラゲナーゼよりも有効です。コラーゲン三重らせん体を複数部位で切断します。クロストリジウムコラゲナーゼはガス壊そにおける細菌侵入に関与しています。
組織から効果的に細胞を分離するには、コラゲナーゼ酵素と中性プロテアーゼの両方の作用が必要です。コラゲナーゼは酵素1モルあたり4 gのカルシウム原子（Ca2+）によって活性化されます。細胞ろ液には、分子量68～130 kDaの7種類以上のプロテアーゼ（至適pH：6.3～8.8）が含まれていると考えられます。コラゲナーゼは配列-R-Pro-8-X-Gly-Pro-R-を認識します。このXは、ほとんどの場合中性アミノ酸です。
コラゲナーゼは、モル酵素あたり 4 グラム原子カルシウムによって活性化されます。 本製品は、エチレングリコール-ビス(β-アミノエチルエーテル) - N, N, N′,N′-四酢酸、β-メルカプトエタノール、グルタチオン、チオグリコール酸、および 8-ヒドロキシキノリンによって阻害されます。

単位の定義

1 コラーゲン消化単位（CDU）は、ウシアキレス腱由来コラーゲンからペプチドを遊離し、カルシウムイオン存在下、pH 7.4、37°C、5 時間のニンヒドリン呈色における、1.0 umol のロイシンに相当します。1 FALGPA 加水分解単位は、25°Cで、1 分間あたりに、1.0 umol の furylacryloyl-Leu-Gly-Pro-Ala を加水分解します。1 中性プロテアーゼ単位は、pH 7.5、37°Cでカゼインを加水分解し、5 時間あたり1.0 umol のチロシンに相当する色を生成します。1 クロストリパイン単位は、DTT の存在下、pH 7.6、25°Cで、1 分間あたり　1.0 umol　の BAEE を加水分解します。

調製ノート

タイプVII（C0773）から調製します。原液は0.36 mM塩化カルシウムを含有する37℃、pH7.4の50 mM TES緩衝液（TESCA）1 mLにコラゲナーゼ0.05～0.1 mgを溶解して調製します。

基質

製品番号
詳細
価格

ピクトグラム

Health hazardExclamation mark
GHS08,GHS07

シグナルワード

Danger

危険有害性情報

H315,H319,H334,H335

危険有害性の分類

Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3

ターゲットの組織

Respiratory system

保管分類コード

11 - Combustible Solids

WGK

WGK 1

引火点(°F)

Not applicable

引火点(℃)

Not applicable

個人用保護具 (PPE)

dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves

適用法令

試験研究用途を考慮した関連法令を主に挙げております。化学物質以外については、一部の情報のみ提供しています。 製品を安全かつ合法的に使用することは、使用者の義務です。最新情報により修正される場合があります。WEBの反映には時間を要することがあるため、適宜SDSをご参照ください。

Jan Code

C2399-15KU-PW:
C2399-1.5KU:
C2399-3KU:
C2399-7.5KU:
C2399-7.5KU-PW:
C2399-PH:
C2399-15KU:
C2399-BULK:
C2399-VAR:
C2399-3KU-PW:
C2399-1.5KU-PW:

試験成績書（COA）

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The proto-oncoprotein SYT (SS18) controls ATP release and regulates cyst formation by polarized MDCK cells
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Intracerebral hemorrhage (ICH) is one of the most severe subtypes of stroke with high morbidity and mortality. Although a lot of drug discovery studies have been conducted, the drugs with satisfactory therapeutic effects for motor paralysis after ICH have yet
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Nrg1 Intracellular Signaling Is Neuroprotective upon Stroke
Navarro-Gonzalez C, et al.
Oxidative Medicine and Cellular Longevity, 2019 (2019)
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プロトコル

FALGPA(N-(3-[2-フリル]アクリロイル)-Leu-Gly-Pro-Ala)を用いたコラゲナーゼ（EC 3.4.24.3）の酵素アッセイ

N-(3-[2-フリル]アクリロイル)-Leu-Gly-Pro-Alaを、連続分光光度法による速度測定（345 nm）で使用して、コラゲナーゼ活性を測定します。コラゲナーゼは、コラーゲンペプチド結合を加水分解します。

Enzymatic Assay of Collagenase (EC 3.4.24.3) using FALGPA (N-(3-[2-Furyl]acryloyl)-Leu-Gly-Pro-Ala)

To measure collagenase activity, N-(3-[2-Furyl]acryloyl)-Leu-Gly-Pro-Ala is used in a continuous spectrophotometric rate determination at 345 nm. Collagenase hydrolyzes collagen peptide bonds.

ライフサイエンス、有機合成、材料科学、クロマトグラフィー、分析など、あらゆる分野の研究に経験のあるメンバーがおります。.

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