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Merck

C5894

Sigma-Aldrich

コラゲナーゼ Clostridium histolyticum由来

non-sterile; 0.2 μm filtered, Type IA-S, 0.5-5.0 FALGPA units/mg solid, ≥125 CDU/mg solid

別名:

クロストリジオペプチダーゼA

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About This Item

CAS番号:
Enzyme Commission number:
EC Number:
MDL番号:
UNSPSCコード:
12352204
NACRES:
NA.54

品質水準

無菌性

non-sterile; 0.2 μm filtered

形状

lyophilized powder

比活性

≥125 CDU/mg solid
0.5-5.0 FALGPA units/mg solid

分子量

68-130 kDa

保管温度

−20°C

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アプリケーション

コラゲナーゼは、終端糖化産物(AGE)の研究のための動脈組織の調製に使用されています。また、ヒト腫瘍、マウス腎臓、ヒト脳、肺上皮およびその他の多数の組織の脱凝集のために他のプロテアーゼとともに使用されています。さらに、肝臓および腎臓灌流研究、膵臓の分解、非実質肝細胞の分離にも使用されます。本酵素は、肝細胞の遊離のために約1 mg/mLの濃度でテストされています(各ラット肝臓の合計容量100 mL)。

生物化学的/生理学的作用

組織からの細胞の効果的な放出には、コラゲナーゼ酵素および中性プロテアーゼの作用が必要です。コラゲナーゼはモル酵素あたり4グラム原子カルシウム(Ca2+)によって活性化されます。培養ろ液には、68~130 kDaの分子量範囲の少なくとも7種の異なるプロテアーゼが含まれると考えられています。至適pHは6.3~8.8です。通常、本酵素は組織サンプル中の結合成分を消化して個々の細胞を遊離させるために使用されます。コラゲナーゼ処理により、一部の細胞が死滅することがあります。通常、消化には0.1~5 mg/mLの濃度が使用されます。反応時間は15分~数時間で、過剰な細胞死を引き起こすことなく、十分な細胞の解離を得ることができます。カルシウムおよびBSAを含むKrebs Ringer緩衝液が好ましく、活性にはZn2+が必要です。
コラゲナーゼは、モル酵素あたり 4 グラム原子カルシウムによって活性化されます。 本製品は、エチレングリコール-ビス(β-アミノエチルエーテル) - N, N, N′,N′-四酢酸、β-メルカプトエタノール、グルタチオン、チオグリコール酸、および 8-ヒドロキシキノリンによって阻害されます。

注意

供給後、本製品は-20℃で1年間安定です。37℃、50℃、-20℃で30日間、FALGPAまたはプロテアーゼ活性の低下はありません。粗コラゲナーゼの溶液は、アリコートして(10 mg/mL)急速凍結し、-20℃で保存すると安定です。それ以上凍結融解を繰り返すと、溶液は劣化します。本製品は、氷上で7時間以上、活性の100%を保持します。

単位の定義

1 コラーゲン消化単位(CDU)は、ウシアキレス腱由来コラーゲンからペプチドを遊離し、カルシウムイオン存在下、pH 7.4、37°C、5 時間のニンヒドリン呈色における、1.0 umol のロイシンに相当します。1 FALGPA 加水分解単位は、25°Cで、1 分間あたりに、1.0 umol の furylacryloyl-Leu-Gly-Pro-Ala を加水分解します。1 中性プロテアーゼ単位は、pH 7.5、37°Cでカゼインを加水分解し、5 時間あたり1.0 umol のチロシンに相当する色を生成します。1 クロストリパイン単位は、DTT の存在下、pH 7.6、25°Cで、1 分間あたり 1.0 umol の BAEE を加水分解します。

調製ノート

溶液は通常、37℃で、50 mM TES、0.36 mM 塩化カルシウムを含むTESCA緩衝液(pH 7.4)により、1~2 mg/mLの濃度で調製されます。

基質

製品番号
詳細
価格

ピクトグラム

Health hazardExclamation mark

シグナルワード

Danger

危険有害性情報

危険有害性の分類

Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3

ターゲットの組織

Respiratory system

保管分類コード

11 - Combustible Solids

WGK

WGK 1

引火点(°F)

Not applicable

引火点(℃)

Not applicable

個人用保護具 (PPE)

dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves


適用法令

試験研究用途を考慮した関連法令を主に挙げております。化学物質以外については、一部の情報のみ提供しています。 製品を安全かつ合法的に使用することは、使用者の義務です。最新情報により修正される場合があります。WEBの反映には時間を要することがあるため、適宜SDSをご参照ください。

Jan Code

C5894PROC:
C5894-BULK:
C5894-PH:
C5894-VAR:
C5894-50MG-PW:
C5894-50MG:


試験成績書(COA)

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プロトコル

N-(3-[2-フリル]アクリロイル)-Leu-Gly-Pro-Alaを、連続分光光度法による速度測定(345 nm)で使用して、コラゲナーゼ活性を測定します。コラゲナーゼは、コラーゲンペプチド結合を加水分解します。

To measure collagenase activity, N-(3-[2-Furyl]acryloyl)-Leu-Gly-Pro-Ala is used in a continuous spectrophotometric rate determination at 345 nm. Collagenase hydrolyzes collagen peptide bonds.

ライフサイエンス、有機合成、材料科学、クロマトグラフィー、分析など、あらゆる分野の研究に経験のあるメンバーがおります。.

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