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リコンビナント
expressed in NSO cells
品質水準
アッセイ
>95% (SDS-PAGE)
形状
buffered aqueous solution
enzyme activity
≥400 pmol/min-μg
分子量
apparent mol wt 52-55 kDa
UniProtアクセッション番号
輸送温度
dry ice
保管温度
−70°C
遺伝子情報
human ... MMP1(4312)
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生物化学的／生理学的作用
MMP-1 initiates the breakdown of interstitial collagens.
物理的形状
Supplied as a 0.2 μm filtered solution of 25 mM MES, 10 mM calcium chloride, 150 mM sodium chloride, 0.05% Brij® L23, pH 5.5.
アナリシスノート
The biological activity is measured by its ability to cleave a fluorogenic peptide substrate.
その他情報
Activity Assay Protocol
Materials:
Assay:
1. Dilute rhMMP-1 to 50 μg/mL in Assay Buffer.
2. Activate 50 μg/mL rhMMP-1 by adding APMA to a final concentration of 1 mM.
3. Incubate at 37 °C for 2 hours.
4. Dilute activated rhMMP-1 to 1 ng/μL in Assay Buffer.
5. Dilute Substrate to 20 μM in Assay Buffer.
6. Load into a black well plate 50 μL of 1 ng/μL rhMMP-1 and start the reaction by adding 50 μL of 20 μM Substrate. Include a Substrate Blank containing 50 μL Assay Buffer, 50 μL Substrate, and no rhMMP-1.
7. Read at excitiation and emission wavelengths of 320 nm and 405 nm, respectively, in kinetic mode for 5 minutes.
8. Calculate specific activity:
Specific Activity (pmol/min/μg) =Adjusted Vmax* (RFU/min) x Conversion Factor** (pmol/RFU) / amount of enzyme (μg)
*Adjusted for Substrate Blank
**Derived using calibration standard MCA-Pro-Leu-OH.
Final Assay Conditions:
Per Well:
rhMMP-1: 0.050 μg
Substrate: 10 μM
Materials:
- Assay Buffer: 50 mM Tris, 10 mM CaCl2, 150 mM NaCl, 0.05% Brij-35, pH 7.5 (TCNB)
- Recombinant Human MMP-1 (rhMMP-1) (Cat. No. M9195)
- p-aminophenylmercuric acetate (APMA), (Cat. No. A9563), 100 mM stock in DMSO
- Substrate: MCA-Lys-Pro-Leu-Gly-Leu-DPA-Ala-Arg-NH2
- F16 Black Maxisorp Plate
- Fluorescent Plate Reader or equivalent
Assay:
1. Dilute rhMMP-1 to 50 μg/mL in Assay Buffer.
2. Activate 50 μg/mL rhMMP-1 by adding APMA to a final concentration of 1 mM.
3. Incubate at 37 °C for 2 hours.
4. Dilute activated rhMMP-1 to 1 ng/μL in Assay Buffer.
5. Dilute Substrate to 20 μM in Assay Buffer.
6. Load into a black well plate 50 μL of 1 ng/μL rhMMP-1 and start the reaction by adding 50 μL of 20 μM Substrate. Include a Substrate Blank containing 50 μL Assay Buffer, 50 μL Substrate, and no rhMMP-1.
7. Read at excitiation and emission wavelengths of 320 nm and 405 nm, respectively, in kinetic mode for 5 minutes.
8. Calculate specific activity:
Specific Activity (pmol/min/μg) =Adjusted Vmax* (RFU/min) x Conversion Factor** (pmol/RFU) / amount of enzyme (μg)
*Adjusted for Substrate Blank
**Derived using calibration standard MCA-Pro-Leu-OH.
Final Assay Conditions:
Per Well:
rhMMP-1: 0.050 μg
Substrate: 10 μM
法的情報
Brij is a registered trademark of Croda International PLC
保管分類コード
10 - Combustible liquids
WGK
WGK 2
引火点(°F)
Not applicable
引火点(℃)
Not applicable
個人用保護具 (PPE)
Eyeshields, Gloves, multi-purpose combination respirator cartridge (US)
適用法令
試験研究用途を考慮した関連法令を主に挙げております。化学物質以外については、一部の情報のみ提供しています。 製品を安全かつ合法的に使用することは、使用者の義務です。最新情報により修正される場合があります。WEBの反映には時間を要することがあるため、適宜SDSをご参照ください。
Jan Code
M9195-10UG:
M9195-BULK:
M9195-VAR:
M9195-10UG-PW:
試験成績書（COA）
製品のロット番号・バッチ番号を入力して、試験成績書（COA） を検索できます。ロット番号・バッチ番号は、製品ラベルに「Lot」または「Batch」に続いて記載されています。
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Interstitial collagenase.
Cawston, T.E. et al.
Handbook of Proteolytic Enzymes, 472-480 (2004)
N S Templeton et al.
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A full-length complementary DNA (cDNA) for interstitial collagenase was isolated from an A2058 melanoma cDNA library using the pCD-X Okayama-Berg vector. The tumor interstitial collagenase cDNA was sequenced and compared to the published sequences for human fibroblast collagenase. The sequence
ライフサイエンス、有機合成、材料科学、クロマトグラフィー、分析など、あらゆる分野の研究に経験のあるメンバーがおります。.
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