T1021

Trypsin inhibitor

powder, suitable for isoelectric focusing (IEF)

• 別名: SBTI
• CAS番号: 9035-81-8
• EC Number: 232-906-9
• MDL番号: MFCD00082103
• UNSPSCコード: 12352200
• NACRES: NA.77

特性

• product name: トリプシンインヒビター Glycine max（ダイズ）由来, Isoelectric focusing marker, pI 4.6
• 由来生物: Glycine max (soybean)
• 品質水準: 200
• 形状: powder
• 分子量: 20,100 Da
• テクニック: isoelectric focusing (IEF): suitable
• pI: 4.6
• 溶解性: balanced salt solution: 1 mg/mL; concentrate: >10 mg/mL, hazy, amber-yellow; phosphate buffer: 10 mg/mL; water: 10 mg/mL; serum-free medium: soluble
• 輸送温度: ambient
• 保管温度: −20°C

詳細

生物化学的／生理学的作用

このインヒビターはトリプシンに対して作用し、キモトリプシンおよびプラスミンに対してこれよりも弱い作用を及ぼします。 このインヒビターはトリプシン、血漿カリクレイン、凝固因子Ｘと同様のメカニズムをもってプロテアーゼも阻害します。トリプシンインヒビターは、メタロプロテアーゼ、組織ベースのカリクレイン、酸プロテアーゼまたはチオプロテアーゼに対しては作用しません。 このインヒビターは、プロテアーゼ活性部位の1：1の化学量論合成物を生成することで作用し、次にインヒビターの単一のアルギニン-イソロイシン結合が開裂します。 阻害は可逆性でpH依存性です。

構成

The soybean trypsin inhibitor is a monomeric protein containing 181 amino acid residues in a single polypeptide chain crosslinked by two disulfide bridges.

単位の定義

トリプシン1単位＝ N-α-ベンゾイル-L-アルギニンエチルエステル（BAEE）を基質として使用するとき、pH 7.6、25℃においてA₂₅₃が0.001/分

One trypsin unit = A₂₅₃ of 0.001 per minute with N-alpha-benzoyl-L-arginine ethyl ester (BAEE) as substrate at pH 7.6 at 25 °C.

調製ノート

トリプシンインヒビターは水およびリン酸バッファーに10 mg/mLの濃度で溶けます。 また、平衡塩溶液に1 mg/mLの濃度で溶け、無血清培地にも溶けます。 濃度が10 mg/mLを超える濃縮溶液は濁ることがあり、黄色からアンバーを呈します。 細胞をトリプシン化した後、解離に使用したトリプシン溶液1 mLに対し1 mLのトリプシンインヒビター溶液に1 mg/mLで再懸濁させます。 次にこの細胞懸濁液を1000 rmpで遠心分離し、細胞ペレットを生成します。

溶液は2～8℃で短期間保存したとき活性を保持できます。溶液はアリコートを-20℃で凍結させると安定します。