Cell Culture Troubleshooting

세포 배양은 생물학적 시스템을 모델링하는 가장 기본적인 기술 중 하나가 되었으며, 생명 공학의 제약 분야뿐만 아니라 생명 공학 연구실의 필수 공정에서 그 중요성이 커지고 있습니다. 이 기술은 접근 가능성이 높지만, 스톡 확장 또는 모델링 실험을 위한 세포의 성공적인 번식은 세포 생존에 부정적인 영향을 미치는 오염 또는 기타 조건으로 인해 어려움을 겪을 수 있습니다. 세포를 공유하는 일반적인 관행으로 인해 이전에 정체가 의심되지 않았던 세포 스톡의 교차 오염에 대한 여러 출판된 증거로 이어졌습니다. 세포가 증식하지 못하는 일반적인 이유 및 드문 이유를 모두 식별하면 실험실 효율성을 높일 수 있고, 세포 제품의 수율을 높이며, in vitro 모델에서 의미 있고 신뢰할 수 있는 다운스트림 데이터를 보장할 수 있습니다.

주요 카테고리

하얀색 배경으로, 빨간색 액체가 든 실험실 병 5개가 한 줄로 배열되어 있으며 오른쪽에는 동일한 빨간색 액체가 일부 채워진 눈금 실린더가 있습니다.

일반 배지 및 버퍼

다양한 세포 니즈에 따른 DMEM, RPMI-1640, 혈청 유리 옵션을 포함한, 최적화된 세포 배양 배지 제형 제품군에서 선택하세요.

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우태아혈청(FBS)

성장 촉진 인자가 풍부한 우태아혈청(FBS) 또는 우아혈청(FCS)은 포유류 세포 배양의 이상적인 보충제입니다.

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세포 또는 입자처럼 생긴 보라색 구형 물체들의 군집이 나타나 있습니다. 표면에는 질감이 느껴지며 어두운 배경에서 미세하게 빛나고 있습니다.

항생제

자사는 유전자 마커 선택 및 세포 생물학 연구를 위해 병원체 또는 기타 세포주를 통한 세포 배양 오염을 방지하기 위한 포괄적인 항생제 포트폴리오를 제공합니다.

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장갑을 착용한 손이 실험실 환경에서 거치대에 있는 여러 개의 시험관 중 하나를 선택하는 모습이 나타나 있습니다. 각각의 시험관에는 녹색 식물 줄기가 투명한 액체에 잠겨 있으며, 이는 식물 연구 또는 실험을 암시합니다.

세포 배양 보충제 및 시약

혈청, 성장 인자, 사이토카인, 호르몬 및 동결 시약을 포함한 고품질 세포 배양 보충제를 찾아보세요.

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세포주 오인

최근 연구에서는 오인이 사용 중인 모든 세포주의 최대 1/3에 영향을 미칠 수 있다고 추정합니다. 이러한 발견은 세포주 모델의 결과를 기반으로 하는 생물학적 시스템에 대한 출판된 발견에 의문을 제기할 가능성이 있습니다. 세포주 오인/교차 오염을 유발하는 요인은 다음과 같습니다.

공격적인 세포주에 의한 오염: 동종효소 분석은 많은 세포주가 HeLa 세포와 희귀한 효소 동종형을 공유한다는 것을 입증했습니다. 그 이후로 HeLa는 배양 스톡에서 가장 흔한 침습성 세포주인 것으로 나타났습니다.
문서화 및 라벨 표시 관행: 세포 배양 플라스크, 플레이트, 냉동 바이알 및 냉동고 격납실에 명확하게 라벨을 부착하고, 세포 스톡의 추가, 회수 및 재배치를 반영하도록 액체 질소 저장 지도를 엄격하게 유지해야 합니다.
세포주 차용: 주변 실험실 사이에서 세포를 공유하는 것은 세포주 식별에 오류를 일으키는 일반적인 관행입니다. 세포주는 Public Health England의 유럽 세포 배양물 컬렉션(European Collection of Authenticated Cell Cultures), ECACC와 같은 평판이 좋은 세포 저장소에서만 얻어야 합니다.

세포주 교차 오염의 일반적인 원인과 그 결과로부터 작업을 보호하는 방법에 대한 정보를 받으십시오.

세포 배양의 미생물 오염

세포 배양 배지와 배양 조건은 세포뿐만 아니라 박테리아, 진균류 및 바이러스 오염 물질에 이상적인 환경을 제공합니다. 무균 배양 기술에 대한 성실한 준수를 강화하기 위해 배양물은 정기적으로 현미경을 이용하여 세균 및 진균류 침입자의 증거를 검사해야 합니다. 모든 배양물의 최대 30%가 마이코플라스마로 오염된 것으로 추정되기 때문에 일부 유비쿼터스 미생물 오염물질은 시각적 검출되지 않습니다. 보이지 않는 마이코플라스마의 검출을 위해 설계된 시약 및 키트는 종종 PCR 증폭을 기반으로 하며, 이는 바이러스 오염 물질을 검출하는 데에도 사용할 수 있습니다.

생물학적 및 화학적 오염으로부터 귀하의 배양물을 보호하는 방법을 배우십시오.

불량한 세포 성장

건강해 보이는 배양 세포가 포화도에 도달하지 못하면 실망스럽습니다. 오염물을 제외하고, 건강한 세포 배가를 방해할 수 있는 몇 가지 장애물은 다음과 같습니다.

배양/냉동 배지 조건 및 품질
보충제의 품질 및 적용 적합성
동결 또는 계대 중 부정확한 세포 계수

세포가 생존 가능한 것처럼 보이지만 증폭에 실패하면, 액체 질소로 돌아가기 전에 최적의 성장을 위한 배양 조건을 개선하기 위해 무엇을 할 수 있는지 알아보십시오.

부착성 세포 표현형의 탈착

부착성 세포는 단독으로 또는 시트로 배양에서 자발적으로 탈착될 수 있습니다. 부착성 배양물이 그렇게 유지되지 않을 때, 확인해야 할 사항과 배양 응집력을 복원하는 방법을 알 수 있습니다.

세포 응집

현탁액의 세포는 in vivo 조건을 단일항으로 모방합니다. 세포가 응집하기 시작하면, 이는 배양이 스트레스를 받을 때 배지에 존재하는 끈적끈적한 핵산 때문일 수 있습니다. 세포가 응집하도록 유발할 수 있는 배지에 존재하는 것은 무엇일까요? 배양물에서 응집을 사라지게 하는 방법에 대해 여기에서 자세히 읽어보십시오.