D2821

デオキシリボヌクレアーゼI ウシ

recombinant, expressed in Pichia pastoris, lyophilized powder, RNAse and protease, free

• 別名: DNAse I, デオキシリボ核酸5'-オリゴヌクレオチド-ヒドロラーゼ
• Enzyme Commission number: 3.1.21.1 (BRENDA, IUBMB)
• MDL番号: MFCD00130918
• UNSPSCコード: 12352204
• NACRES: NA.54

特性

• 由来生物: bovine
• 品質水準: 300
• リコンビナント: expressed in Pichia pastoris
• フォーム: lyophilized powder
• 比活性: ≥4,000 units/mg protein
• 分子量: ~39 kDa
• テクニック: DNA extraction: suitable
• 溶解性: H₂O: soluble (pH 4.0-9.0)
• 適合性: suitable for molecular biology
• アプリケーション: diagnostic assay manufacturing
• その他の活性: RNAse and protease, free
• 保管温度: 2-8°C

詳細

アプリケーション

シグマの酵素は、Agave spp.クローンから抽出されたDNAの消化に使用されています。この酵素は、KNOTTED1様のHOMEOBOX（KNOX）転写因子の調節発現に対するエピジェネティックな変化の影響を調査する研究で使用されました。

デオキシリボヌクレアーゼIウシは、ラット肝臓の抽出物によるDNAポリメラーゼの阻害を調べる研究で使用されています。デオキシリボヌクレアーゼIウシは、酵素活性に対するイオン強度の影響を調査する研究でも使用されています。

デオキシリボヌクレアーゼIウシは、組換えタグ付きたんぱく質の発現をテストするための冷細胞溶解バッファー、完全RNA溶解バッファー、細胞溶解バッファーの調製に使用されています。

タンパク質サンプルからDNAを除去する際に使用されます。

生物化学的／生理学的作用

DNアーゼIは、ピリミジンに隣接するホスホジエステル結合に作用して、末端5′-リン酸を持つポリヌクレオチドを生成するエンドヌクレアーゼです。最適なpHは7～8であることが分かります。Mn²⁺、Ca²⁺、Co²⁺、Zn²⁺などの二価陽イオンは酵素活性化剤です。5 mM Ca²⁺の濃度で、たんぱく質分解消化に対して酵素を安定化します。2-メルカプトエタノール、キレート剤、ドデシル硫酸ナトリウム（SDS）およびアクチンは酵素活動を阻害することが知られています。

一本鎖DNAおよび二本鎖DNAを切断して、5'末端にリン酸、3'末端にOH基を有するモノヌクレオチドとオリゴヌクレオチドの混合物を生じます。その触媒活性は、二価イオン依存性です。Mg²⁺存在下で、DNase Iは二本鎖DNAの各鎖をランダムかつ別々に加水分解します。Mn²⁺存在下で、両方の鎖を切断することが可能です。

特徴および利点

• DNAを除去してRNAを精製できます。
• ニックトランスレーション用のDNAを調製できます¹。
• DNA-タンパク質相互作用を評価するためのフットプリント法が行えます²。

単位の定義

1 unitは、pH 5.0、25°C、1分間に、ウシ胸腺由来DNAを用いて、反応液1 mLあたりΔA₂₆₀=0.001となる酵素量です。

物理的形状

グリシンを安定剤として含む凍結乾燥粉末として供給

調製ノート

動物細胞や動物由来の材料を使用せずに製造。

酵素粉末は、水またはリン酸緩衝液を除くpH 4.0～9.0の緩衝液で再構成できます。カルシウムキレート剤は避けてください。0.15 M NaCl中のDNアーゼI 10 mg/mL溶液を分けて–20°Cで1週間貯蔵すると、その活性の<10%を失う可能性があります。同じ溶液を分けて2～8°Cで貯蔵すると、活性の約20%を失う可能性があります。60°Cでは最大5時間活性を保ち、68°Cでは<10分で活性を失います。酢酸緩衝液（pH 5.0）およびトリス緩衝液（（pH 7.2）1 mg/mL濃度）では、6%/時間の割合で活性を失います。

安全性情報

• 保管分類コード: 11 - Combustible Solids
• WGK: WGK 3
• 引火点(°F): Not applicable
• 引火点(℃): Not applicable