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リコンビナント
expressed in Pichia pastoris
アッセイ
≥90% (SDS-PAGE)
形状
buffered aqueous solution
比活性
≥10,000 units/mg protein
UniProtアクセッション番号
輸送温度
dry ice
保管温度
−70°C
遺伝子情報
mouse ... Gzmb(14939)
詳細
グランザイムBは247アミノ酸のポリペプチドであり、シグナルペプチドによって切断されるリ-ダ-配列と、リソソ-ムシステインプロテア-ゼDPPIにより切断される2アミノ酸のプロドメインが含まれています。リコンビナントグランザイムBはメタノ-ル資化性酵母(Pichia pastoris)で成熟型として発現させており、糖鎖修飾の違いからSDS-PAGEではトリプレット(約34, 32, 30 kDa)として確認されます。
生物化学的／生理学的作用
ナチュラルキラ-(NK)細胞および細胞傷害性Tリンパ球から分泌される細胞傷害顆粒は、ウイルス感染細胞や腫瘍細胞から生物体を守るために利用されるメカニズムの一環をなしています。グランザイムBはセリンプロテア-ゼの一種であり、細胞傷害顆粒に見いだされる11種類のグランザイム群の中で最も代表的な酵素です。グランザイムは、細胞傷害顆粒の必須分子であるパ-フォリンの助けを借りて標的細胞に侵入します。標的細胞中で、グランザイムはアポト-シス細胞死に関与する特定の基質に作用します。
グランザイムBは中性セリンプロテア-ゼであり、アスパラギン酸残基を切断してさまざまな経路で細胞死を誘導します。in vitro およびin vivoにおいてほとんどのカスパ-ゼ類を切断して活性化し、カスパ-ゼ依存性のアポト-シス経路を大規模に増幅します。さらに、グランザイムBはPARP DNA-PK2やDFF45/ICADのような下流のカスパ-ゼ基質を直接切断し、細胞死を引き起こします。この経路は、ウイルス感染細胞で認められるようなウイルスカスパ-ゼインヒビタ-によるアポト-シス阻害を受けません。グランザイムBは、カスパ-ゼに依存しない経路でミトコンドリアからのシトクロムC放出を引き起こす能力があるとみられています。
グランザイムBは中性セリンプロテア-ゼであり、アスパラギン酸残基を切断してさまざまな経路で細胞死を誘導します。in vitro およびin vivoにおいてほとんどのカスパ-ゼ類を切断して活性化し、カスパ-ゼ依存性のアポト-シス経路を大規模に増幅します。さらに、グランザイムBはPARP DNA-PK2やDFF45/ICADのような下流のカスパ-ゼ基質を直接切断し、細胞死を引き起こします。この経路は、ウイルス感染細胞で認められるようなウイルスカスパ-ゼインヒビタ-によるアポト-シス阻害を受けません。グランザイムBは、カスパ-ゼに依存しない経路でミトコンドリアからのシトクロムC放出を引き起こす能力があるとみられています。
特徴および利点
天然のグランザイムBの場合は少量しか精製することができず、E. coliやワクシニアウイルスで発現させた酵素は可溶性の活性型酵素ではなかったことなどから、Pichia酵母発現によるリコンビナントグランザイムBが活用されています。
単位の定義
1ユニットは、30°Cで1分あたり1.0 nmolのBoc-Ala-Ala-Asp-sBzlを加水分解する量です。
物理的形状
50mM HEPES溶液 (pH 7.5, 150mM NaCl含有)。
調製ノート
メタノ-ル資化性酵母(Pichia pastoris)で発現させたリコンビナントグランザイムBは可溶性の分泌型活性酵素であり、天然型のグランザイムBと同様の特異性を有しています。この組み換え体は活性型の成熟グランザイムBであり、in vitroおよびin vivoでカスパ-ゼ3をいわゆるp20/p10型に切断します。
保管分類コード
10 - Combustible liquids
WGK
nwg
引火点(°F)
Not applicable
引火点(℃)
Not applicable
個人用保護具 (PPE)
Eyeshields, Gloves, multi-purpose combination respirator cartridge (US)
適用法令
試験研究用途を考慮した関連法令を主に挙げております。化学物質以外については、一部の情報のみ提供しています。 製品を安全かつ合法的に使用することは、使用者の義務です。最新情報により修正される場合があります。WEBの反映には時間を要することがあるため、適宜SDSをご参照ください。
Jan Code
G9278-BULK:
G9278-25UG:
G9278-VAR:
試験成績書（COA）
製品のロット番号・バッチ番号を入力して、試験成績書（COA） を検索できます。ロット番号・バッチ番号は、製品ラベルに「Lot」または「Batch」に続いて記載されています。
C T Pham et al.
The Journal of biological chemistry, 273(3), 1629-1633 (1998-01-27)
Granzyme B (GzmB) is a neutral serine protease found in cytotoxic lymphocytes; this enzyme is critically involved in delivering the rapid apoptotic signal to susceptible target cells. GzmB has been difficult to study and has not yet been produced in
S Goenka et al.
Journal of immunology (Baltimore, Md. : 1950), 163(9), 4663-4672 (1999-10-21)
The cytokines IL-4 and IFN-gamma exert biologically antagonistic effects that in part reflect opposing influences on gene transcription. While the molecular mechanisms for IL-4-mediated transcription activation have been extensively studied, little is known about molecular mechanisms required for IL-4 inhibition
D A Thomas et al.
Immunity, 12(6), 621-632 (2000-07-14)
Granzyme B (GzmB) is a component of cytotoxic lymphocyte granules that can rapidly initiate apoptosis in target cells. While several procaspases are cleaved and activated by GzmB, the absolute requirement of caspase activation for GzmB-induced apoptosis is controversial. In this
Petra Van Damme et al.
Molecular & cellular proteomics : MCP, 8(2), 258-272 (2008-10-07)
Using a targeted peptide-centric proteomics approach, we performed in vitro protease substrate profiling of the apoptotic serine protease granzyme B resulting in the delineation of more than 800 cleavage sites in 322 human and 282 mouse substrates, encompassing the known
M J Smyth et al.
Journal of immunology (Baltimore, Md. : 1950), 154(12), 6299-6305 (1995-06-15)
Human granzyme B (hGrzB) is the key member of a family of granule serine proteases (granzymes) that participate in target cell death inflicted by cytotoxic lymphocytes. The proenzyme activation peptide predicted from the cDNA encoding hGrzB is composed of two
ライフサイエンス、有機合成、材料科学、クロマトグラフィー、分析など、あらゆる分野の研究に経験のあるメンバーがおります。.
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