11277073910

DIG RNAラベリングミックス

sufficient for 20 reactions, solution

• 別名: 核酸標識
• UNSPSCコード: 41105500

特性

• フォーム: solution
• 品質水準: 100
• 使用法: sufficient for 20 reactions
• 包装: pkg of 40 μL
• メーカー／製品名: Roche
• 不純物: Ribonuclease, none detected (up to 20 µl using MSII-RNA)
• 色: colorless
• 溶解性: water: miscible
• 保管温度: −20°C

詳細

詳細

ラベリング効率：約10 μgのジゴキシゲニン標識化完全長RNAが、1 μgの直鎖テンプレートDNAから転写されます。
アッセイ時間：135分
サンプル材料
直鎖プラスミドDNA：
転写されるDNAが、SP6、T7またはT3 RNAポリメラーゼのためのプロモーターをポリリンカー付近に含む、適切な転写ベクターのポリリンカーサイトに複製されます。「ランオフ」転写物の合成のため、プラスミドは制限酵素によって直鎖化されます。5′-オーバーハングを生成する制限酵素を使用してください。3′-オーバーハングは避けてください。直鎖化されたテンプレートDNAは、RNアーゼのコンタミネーションを避けるため、フェノール/クロロホルム抽出およびエタノール沈殿によって精製してください。ランアラウンド用；転写環状プラスミドDNAが使用されます。
PCR生成物：
RNAポリメラーゼプロモーター配列を含むPCR断片は、転写用テンプレートとしても使用できます。転写に先立ち、HighPureカラム精製によってPCR断片を精製することをお勧めします。

in vitro転写によって、DIG標識された任意の長さの一重鎖RNAプローブが生成されます。DIG-11-UTPは、標準的な条件下、SP6、T7およびT3 RNAポリメラーゼによって、転写物のおよそ20～25 番目の各ヌクレオチドに取り込まれます。DIG RNAラベリングミックスは、最適化された転写バッファーと共に提供されるSP6、T7およびT3 RNAポリメラーゼとの使用に特別にデザインされています。
RNAのジゴキシゲニン-11-UTP標識のための便利なヌクレオチド混合物です。

内容
以下を含む10倍溶液：10 mM ATP、CTP、GTP（それぞれ）、6.5 mM UTP、3.5 mM DIG-11-UTP。

特異性

熱失活：2 μLの 0.2 M EDTA（pH 8.0）を添加して反応を停止します。

アプリケーション

SP6、T7およびT3 RNAポリメラーゼでのin vitro転写による、RNAのジゴキシゲニン-11-UTPラベリング。DIG標識化RNAは、以下のような様々なハイブリダイゼーションテクニックで使用されます：

• ノーザンブロット
• サザンブロット
• ドットブロット
• プラークまたはコロニーリフト
• RNアーゼプロテクション実験
• クロモソーム、細胞、および組織切片in situ

特徴および利点

DIG RNAラベリングミックスは、最適化された転写バッファーと共にRocheから提供されるSP6、T7およびT3 RNAポリメラーゼとの使用に特別にデザインされています。

品質

DIG RNAラベリングキットおよびDIG核酸検出キットにおいて機能テスト済みです。

その他情報

ライフサイエンス研究のみに使用できます。診断には使用できません。

安全性情報

• ピクトグラム: GHS07
• シグナルワード: Warning
• 危険有害性情報: H302
• 注意書き: P264 - P270 - P301 + P312 + P330 - P501
• 危険有害性の分類: Acute Tox. 4 Oral
• 保管分類コード: 12 - Non Combustible Liquids
• WGK: WGK 1
• 引火点(°F): does not flash
• 引火点(℃): does not flash