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形状
solution
品質水準
使用法
sufficient for 50 labeling reactions
包装
pkg of 200 μL
メーカー／製品名
Roche
テクニック
nucleic acid labeling: suitable
色
colorless
pH
~7.5 (68 °F)
溶解性
water: miscible
適合性
suitable for fluorescent labeling techniques
suitable for molecular biology
アプリケーション
genomic analysis
life science and biopharma
保管温度
−20°C
詳細
最適化された酵素混合物：ニックトランスレーションでは、DNase と DNA ポリメラーゼの組合せを利用して、DNA 螺旋の一本の鎖に切れ目を入れたのち、ポリメラーゼが切れ目の入った部位を調べるとき、または「校正する」ときにラベルヌクレオチドを取り込みます。
個々のテンプレートは標準的な 90 分の反応で一貫性のある結果をもたらし、平均プローブ長は 200 塩基対から 500 塩基対までとなります。
アッセイ時間：100 分間
サンプル材料
個々のテンプレートは標準的な 90 分の反応で一貫性のある結果をもたらし、平均プローブ長は 200 塩基対から 500 塩基対までとなります。
アッセイ時間：100 分間
サンプル材料
- スーパーコイル状および線状のプラスミド DNAスーパーコイル状および線状のコスミド DNA精製 PCR 産物
特異性
熱失活：1 μL 0.5 M EDTA（pH 8.0）の添加および 65°Cで 10 分間の加熱により、反応を停止させます。
アプリケーション
蛍光in situハイブリダイゼーション（FISH）用の高感度プローブの生成について。
Nick Translation Mix は、in situプローブの直接的な蛍光物質ラベリング用にデザインされています。Roche Applied Science のフルオレセイン-12-dUTP およびテトラメチルローダミン-5-dUTP、またはその他の市販の蛍光物質ラベルヌクレオチドは、Nick Translation Mix と組み合わせて使用できます。In situプローブにおける直接的なラベル蛍光物質は、マルチコピーまたは分裂中期の染色体または間期の核の非常に大きなハイブリダイゼーション標的の検出に使用されます。
20 μL の全反応容量中で 1μg のテンプレートを使用する標準的なラベリング反応の場合、4 μL の 5 倍濃縮の蛍光物質ラベリング混合物が必要です。
Nick Translation Mix は、in situプローブの直接的な蛍光物質ラベリング用にデザインされています。Roche Applied Science のフルオレセイン-12-dUTP およびテトラメチルローダミン-5-dUTP、またはその他の市販の蛍光物質ラベルヌクレオチドは、Nick Translation Mix と組み合わせて使用できます。In situプローブにおける直接的なラベル蛍光物質は、マルチコピーまたは分裂中期の染色体または間期の核の非常に大きなハイブリダイゼーション標的の検出に使用されます。
20 μL の全反応容量中で 1μg のテンプレートを使用する標準的なラベリング反応の場合、4 μL の 5 倍濃縮の蛍光物質ラベリング混合物が必要です。
構成
内容物
5 倍濃縮溶液を含むバイアル 1 本、安定した反応バッファーの 50%グリセロール（v/v）溶液、DNA ポリメラーゼ I および DNase I。
5 倍濃縮溶液を含むバイアル 1 本、安定した反応バッファーの 50%グリセロール（v/v）溶液、DNA ポリメラーゼ I および DNase I。
品質
ドットスポットアッセイで検査された機能。
原理
ニックトランスレーション法は、低酵素濃度における MgCl2存在下で、ランダムに分布した切れ目を DNA に導入するという DNase I の能力に基づいています。
大腸菌 DNA ポリメラーゼ I は、プライマーとして切れ目の 3′-OH 末端を用い、未変成の鎖に相補的な DNA を、5′?3′ 方向に合成します。DNA ポリメラーゼ I の 5′?3′ エクソヌクレオチド分解活性により、同時に合成方向にヌクレオチドが除去されます。除去されたヌクレオチドは、ポリメラーゼ活性により、同位体ラベルしたまたはハプテンラベルしたデオキシリボヌクレオシド三リン酸に順次置き換えられます。このため、低温（+15°C）において、反応液中の非ラベル DNA は新たに合成されたラベル DNA に置き換えられます。
大腸菌 DNA ポリメラーゼ I は、プライマーとして切れ目の 3′-OH 末端を用い、未変成の鎖に相補的な DNA を、5′?3′ 方向に合成します。DNA ポリメラーゼ I の 5′?3′ エクソヌクレオチド分解活性により、同時に合成方向にヌクレオチドが除去されます。除去されたヌクレオチドは、ポリメラーゼ活性により、同位体ラベルしたまたはハプテンラベルしたデオキシリボヌクレオシド三リン酸に順次置き換えられます。このため、低温（+15°C）において、反応液中の非ラベル DNA は新たに合成されたラベル DNA に置き換えられます。
保管および安定性
凍結と融解の繰り返しは避けてください。
その他情報
ライフサイエンス研究専用。診断にはご使用になれません。
ニックトランスレーションの前にテンプレートを変性する必要はありません。
ニックトランスレーションの前にテンプレートを変性する必要はありません。
保管分類コード
12 - Non Combustible Liquids
WGK
WGK 1
引火点(°F)
does not flash
引火点(℃)
does not flash
試験成績書（COA）
製品のロット番号・バッチ番号を入力して、試験成績書（COA） を検索できます。ロット番号・バッチ番号は、製品ラベルに「Lot」または「Batch」に続いて記載されています。
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