BGALS-RO

β-グルクロニダーゼ

from E. coli K 12

• Enzyme Commission number: 3.2.1.31 (BRENDA, IUBMB)
• UNSPSCコード: 12352204
• NACRES: NA.28

特性

• 由来生物: Escherichia coli K12
• 品質水準: 100
• フォーム: solution
• 分子量: M_r ~220 kDa
• 包装: pkg of 1 mL (03707580001); pkg of 15 mL (03707601001); pkg of 5 mL (03707598001)
• メーカー／製品名: Roche
• 保管条件: (Keep container tightly closed in a dry and well-ventilated place.)
• パラメーター: 48 °C optimum reaction temp.
• テクニック: activity assay: suitable
• 色: colorless
• 最適pH: 6.0-6.5
• 溶解性: water: soluble
• 適合性: suitable for enzyme test
• UniProtアクセッション番号: ; P05804
• アプリケーション: detection; sample preparation
• 保管温度: 2-8°C
• 遺伝子情報: Escherichia coli ... uidA(946149)

詳細

詳細

グルクロニダーゼは、25 °C で、または 37 °C、pH 7、4-ニトロフェニル-β-D-グルクロニドを基質として 140 U/mg です。1 ml のβ-グルクロニダーゼには、37 °C で少なくとも 140 U が含まれています。

特異性

単糖、オリゴ糖、多糖、あるいはフェノールにβ-結合した末端のグルクロン酸を切断します。

アプリケーション

β-グルクロニダーゼは、研究機関や分析機関において、ステロイドβ-グルクロニドの酵素的加水分解に幅広く使用されています。β-グルクロニダーゼは以下に使用されます：–

• ドーピング分析での
• 尿中（pH 6.0～6.5）ステロイド抱合体（グルクロニド）の加水分解
• 少量のベンゾジアゼピンの検出
• GC-MS、HPLC、免疫測定やその他の分析法に先立つ試料調製における、グルクロニドの切断。

また、血漿中エンテロラクトン、テストステロン、エピテストステロングルクロニドの加水分解に使用されています。

生物化学的／生理学的作用

グルクロン酸接合は代謝の基本原理の1つです。人体に与えられる多くの物質は、UDP-グルクロノシルトランスフェラーゼ（UGT）によるグルクロン酸抱合を含む、代謝処理を受けます。β-グルクロニダーゼ（別名：β-D-グルクロノシド、グルクロニルヒドロラーゼ）は、生物活性や薬理活性をもつ多数の内在性および外来性分子へのグルクロニル基の転移を触媒します。グルクロニドは総じて、もとの分子よりも溶解性が高く、毒性が低く、人体から容易に排出されます。尿や血漿などの体液中に存在するこれらの薬物抱合体を分析するには、グルクロニドの脱抱合が必要です。検出前の酵素的加水分解は、分析において高感度を得るために不可欠です。加水分解後、試料を質量分析、ガスクロマトグラフィー、HPLC、免疫測定、その他の分析法によって分析することができます。

特徴および利点

β大腸菌由来の-グルクロニダーゼはβ-グルクロニドへの特異性が高く、ステロイドβ-グルクロニドを極めて速やかに加水分解するとともに、その他多種類のグルクロニド（ベンゾジアゼピン、オピオイド、カンナビノイドなど）を切断する能力をもちます。β-グルクロニダーゼは、生体液（主に尿）中のグルクロニドの酵素的加水分解に使用されます。ドーピングに使われる物質はグルクロニド抱合されているので、抱合薬物分子のβ-グルクロニダーゼによる酵素的切断によって、ドーピング分析が効果的にできるかどうかが決まります。

• 迅速な分析：酵素の比活性が高い
• 迅速なスクリーニング：ステロイド、ベンゾジアゼピン、カンナビノイド、オピオイドに
• 時間を節約：反応液のクリーンアップや尿の緩衝処理が不要な手順を開発できる

単位の定義

β-グルクロニダーゼ活性の国際単位は、温度＋25℃、pH 7.0で、 4-ニトロフェニル-β-D-グルクロニド（4NPG）からの4-ニトロフェノール放出率を1 μM上昇させる酵素活性です。
以前はFishman単位が使用されていました。この単位は、フェノールフタレイングルクロニド（PPG）からのフェノールフタレインの放出です。ステロイドβ-グルクロニドの異なる製剤について、PPGに対する活性の比較により相対活性を評価することはできません。多くの製剤は、尿中のPPG、4NPG、あるいは種々のステロイドβ-グルクロニドの加水分解を等しく触媒するわけではありません。4NPGの標準基質としての選択は、以下の検討事項に基づきます：

• 2つの基質に対するMichaelis濃度は同程度ですが（4 NPGに対してK_M＝2×10^-4 M、PPGに対してK_M＝6×10^-5 M）、対応する加水分解速度が異なります：
• 4NPGはPPGと比較して約5倍速く加水分解されます；
• PPGには過剰な基質による阻害が発生しますが、4NPGを使用した場合にはそのような阻害は認められません。

物理的形状

50％グリセロール溶液、pH約6.5
（1ボトルに15 mL）

その他情報

大腸菌β-グルクロニダーゼ酵素は本質的にスルファターゼ活性がなく、ステロイドおよびベンゾジアゼピン抱合体を特に効率的に切断します。
ライフサイエンス研究用途に限ります。診断用途に使用しないでください。

法的情報

本製品の販売は、特に本製品を用いて得られた修飾抗体の使用について、F. Hoffmann - La Roche AGグループ会社の特許を含め、第三者の特許における権利を許諾するものではありません。

安全性情報

• 保管分類コード: 12 - Non Combustible Liquids
• WGK: WGK 1
• 引火点(°F): No data available
• 引火点(℃): No data available