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Merck

11873601001

Roche

Pefabloc® SC PLUS

crystalline, suitable for blocking, suitable for protein purification, 0.1-1.0 mg/mL

別名:

pefabloc, セリンプロテアーゼ阻害剤

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About This Item

UNSPSCコード:
12352204

フォーム

crystalline

品質水準

分子量

239.5

包装

pkg of 5 mL (100 mg)

メーカー/製品名

Roche

濃度

0.1-1.0 mg/mL

テクニック

blocking: suitable
protein purification: suitable

最適pH

neutral

mp

175-185 °C

溶解性

soluble (Solubility and stability of the protease inhibitor remains unchanged.)

保管温度

2-8°C

詳細

Pefabloc SCは、セリンプロテアーゼの特異的かつ強力な不可逆的阻害剤です。阻害活性はPMSFまたはDFPに匹敵しますが、Pefabloc SCは細胞に対して無毒です。Pefabloc SC PLUSセットは、セリンプロテアーゼ阻害剤Pefabloc SCと独自に処方されたPefabloc SCプロテクター(PSC-Protector)を組み合わせて、Pefabloc SCが提供する安全かつ安定したプロテアーゼ阻害の利便性と信頼性を向上させます。

最近の発見により、Pefabloc SCやPMSFなどのスルホニル型セリンプロテアーゼ阻害剤がたんぱく質に共有結合できることが示されました。これは、阻害剤が高濃度で使用される場合、またはアルカリ条件下での長時間にわたる培養中に発生する可能性があります。この相互作用は、遊離アミノ末端だけでなく、たんぱく質のチロシンおよびリジン残基にも悪影響を及ぼします。このセットに含まれるPLUS添加剤(PSC-Protector)を高濃度で使用し、アルカリ性pHで長時間にわたって培養すると、たんぱく質へのPefabloc SCの共有結合は発生しません。

特異性

Pefabloc SCは、セリンプロテアーゼを不可逆的にブロックするスルホニルフルオリドのファミリーに属します。Pefablocは強力なセリントレオニンホスファターゼ阻害剤としても説明されました。
セリンプロテアーゼの特異的かつ強力な不可逆的阻害剤。Pefabloc SCの阻害活性はPMSFまたはDFPに匹敵しますが、Pefabloc SCは非毒性です。セリンプロテアーゼを特異的に阻害し、質量分析法でテストされたたんぱく質の非特異的共有結合修飾を防ぎます。

アプリケーション

  • Pefabloc® SCは、分取たんぱく質精製中にプロテアーゼの有害な影響を抑制するために使用されます。PSCプロテクターソリューションは、Pefablocをさらに高い濃度で使用し、アルカリ性pHでの培養時間を延ばした場合(質量分析でテスト)にたんぱく質の非特異的共有結合修飾を防ぎます。
  • 真核細胞に対する毒性が低いため、形質転換細胞発酵中の組換えたんぱく質製造に適用できます。その場合、望ましい生成物の収量がたんぱく質分解により減少する可能性があります。
  • Pefabloc SCは、アガロースプラグでの染色体DNA調製中にプロテイナーゼKを完全に不活性化するために使用されます。それには、細胞をアガロースに包埋し、プロテイナーゼKで消化してすべてのたんぱく質を分解します。特定の制限エンドヌクレアーゼを加える前に、アガロースプラグを10 mMのTris-HCl、1 mMのpH 7 EDTA中の1~5 mM Pefabloc SCで2時間+37°Cまたは一晩培養することにより、プロテイナーゼKを不活性化します。
  • PMSFとは対照的に、Pefabloc SCは血清または血漿中のトロンビン活性の優れたブロッカーです。PMSFはこれらの体液中でアルブミンと可逆的に相互作用し、その遊離濃度が低下してトロンビンの不活性化が遅れます。一方、Pefabloc SCは血清アルブミンと反応せず、同様の条件下でトロンビンを不活性化する能力が3倍高いことを示します。
  • Pefabloc SCは生細胞で使用できます。
Pefabloc® SC PLUSは、THP-1細胞のジギトニン抽出緩衝液およびカテプシンB活性アッセイ緩衝液で使用されています。また、アフリカツメガエル(Xenopus)胚から核を単離するためのイオジキサノール溶液およびスクロース緩衝液の成分としても使用されています。

特徴および利点

  • 簡素化された2試薬システムを活用してください。PSC-Protectorソリューションを使用すると、高濃度、長時間の培養、アルカリ性pHであってもたんぱく質とPefabloc SC間の共有結合は発生しません。
  • 使いやすい阻害剤の利点。水溶性Pefabloc SCを水性バッファーに直接添加します。
  • 危険な化合物を避けます。あなたやあなたの周りの人々にリスクを及ぼさずに、無毒でプロテアーゼを阻害します。
  • 安定性を向上させて確実に保護します。7.0を超えるpHレベル、+4°Cを超える温度でも一貫したプロテアーゼ阻害を達成します。
  • 阻害を最大化。確実に溶解する安定した製品を使用することにより、活性阻害剤のレベルが十分に高いことを確認してください。

包装

2つのコンポーネントを含むセット

調製ノート

作用濃度:0.1~1.0 mg/mL(0.4~4 mM)
Pefabloc SCとそれに対応する量のPSCプロテクター
標準溶液:推奨される溶媒は蒸留水または水性バッファー(Pefabloc SC用)です。
Pefabloc SCに対する溶解度は最大0.1 Mです。
貯蔵条件(標準溶液):-15~-25°C(保存溶液)
プロテアーゼ阻害剤の溶解度と安定性は変わりません。Pefabloc SCを参照してください。

再構成

プロテアーゼ阻害剤の溶解度と安定性は変わりません。Pefabloc SCを参照してください。

その他情報

生命科学研究専用です。診断手順には使用しません。

法的情報

Pefabloc is a registered trademark of Pentapharm

キットの構成要素のみ

製品番号
詳細

  • Pefabloc SC, 100 mg

  • PSC-Protector solution, 5 mL ready-to-use

ピクトグラム

FlameCorrosion

シグナルワード

Danger

危険有害性情報

危険有害性の分類

Eye Dam. 1 - Flam. Liq. 3 - Skin Corr. 1B

保管分類コード

3 - Flammable liquids

WGK

WGK 1


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