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Merck

세포 해리 시약

이 이미지는 2개의 차별되는 현미경사진을 보여주는 세포 구조의 현미경적 비교 분석을 나타냅니다. 왼쪽 현미경사진에서는 세포 또는 미생물의 조밀한 응집이 관찰되며, 활성화된 성장 환경을 나타낼 가능성이 있습니다. 오른쪽 현미경 사진은 더 희박한 분포를 나타내며, 잠재적으로 세포 행동이나 군집 밀도에 대한 여러 환경 조건의 영향을 반영합니다.

본래의 환경을 모방하기 위해, 부착성 세포 표현형(예: 상피 세포)은 일반적으로 조직 배양 처리된 표면에 파종되어 생존 및 증식을 위해 부착됩니다.  증식, 계수 및 다운스트림 분석을 위해 부착성 세포 및 고형 조직의 세포를 분리하여 부유액을 생성해야 합니다.  단일 세포 부유액은 세포 계수, 계대배양을 위한 재파종 및 세포 분석법/분석에 필요합니다. 

탈착 시약에는 자연 발생적 효소 또는 더 순한 비효소 대체제가 포함될 수 있습니다. 이러한 시약은 칼슘을 킬레이트화하여 작용함으로써 카드헤린이 표면에 또는 서로 붙지 않도록 하므로, 배양 과정 동안 부착된 표면으로부터 세포를 해방시킵니다. 세포 배양 워크플로에서 사용되는 세포 해리 시약은 세포외바탕질(ECM) 기질에 대해 특이적입니다.

자사의 포괄적인 세포 해리 시약의 제품군은 다음을 포함합니다.



실온에 저장하는 경우 안정한 활성을 유지하는 StableCell™ 트립신 세포 해리 시약

트립신, 재조합 트립신, StableCell™ 트립신

트립신은 세린 프로테아제이며 부착 세포주와 조직 해리에 사용되는 가장 일반적인 탈착 효소 중 하나입니다. 미가공 트립신 제제는 일반적으로 두 가지 애플리케이션 모두에서 더 효율적인 것으로 밝혀졌지만, 고농도 트립신과 함께 또는 장기간 세포를 배양하면 세포막이 손상될 위험이 있고 세포를 죽일 수 있습니다. 배양된 세포는 EDTA(에틸렌디아민테트라아세트산)와 함께 트립신으로 처리하여 배양 기질에서 가장 일반적으로 제거되며, 이때 트립신의 농도는 0.025%에서 0.5% 범위일 수 있습니다.

StableCell™ 트립신 용액은 트립신을 분액, 동결 및 해동할 필요 없이 표준 트립신 용액처럼 세포 탈착을 수행하도록 개발되었습니다. 이는 세포 계대배양 또는 실험을 위해 트립신을 분액하고 해동될 때까지 기다릴 필요가 없어 상당한 시간을 절약하고 실험실 냉동고의 소중한 공간을 절약할 수 있습니다. 자사의 StableCell™ 트립신 용액은 2-8°C에서 보관하도록 권장되지만 연구에 따르면 StableCell™ 트립신은 37°C에서 보관할 때도 >90%의 활성과 성능을 유지합니다.

콜라게나제 및 디스파제

콜라게나제는 천연 삼중 나선 콜라겐의 펩티드 결합을 절단합니다. 천연 콜라겐을 가수분해하는 독특한 능력 때문에 동물 조직에서 세포를 분리하기 위해 광범위하게 사용됩니다. 콜라게나제는 다양한 미생물과 여러 동물 세포에서 발생합니다. 가장 강력한 것은 혐기성 박테리아인 Clostridium histolyticum이 분비하는 "미가공" 콜라게나제입니다.

디스파제는 빠르고, 효과적이고, 연성이며, 중성인 프로테아제이며 하층으로부터 배양의 손상되지 않은 상피 시트를 분리할 수 있습니다. 디스파제 I은 폐 조직을 소화하고 유동 염색뿐만 아니라 쥐과 CD4 T 세포 분리를 위해 세포를 처리하도록 사용되었습니다.

특수 배양용 탈착 시약

보다 연성인 효소 활성이 필요할 수 있는 세포 및 조직 유형을 해리하거나 탈착하기 위해 Accutase®Accumax™ 용액은 더 낮은 농도에서 효율적인 효소를 사용합니다. 이러한 용액은:

  • 배아 및 신경 줄기세포를 효율적으로 분리함
  • 부드럽게 탈착하여 세포 생존성을 유지하고 세포 수율을 향상할 수 있음
  • 중화를 필요로 하지 않음

단일 세포 분석

단일 세포 분석은 조직 시료 작업 시 생존성 있는 단일 세포를 자극(input)으로서 필요로 합니다. 이러한 분석을 통해 연구자들은 줄기세포, 면역학, 암 연구를 위해 세포 배양 집단에서 변이를 연구할 수 있습니다. 프로토콜 최적화, 모범 사례 만들기, 신뢰성 있는 단일 세포 분석 데이터 보장에 필수적인 당사의 고품질 분리 시약에 대해 알아보십시오.


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