Microbial Cell Culture
미생물 세포 배양은 클로닝 및 재조합 단백질 발현을 위해 분자생물학에서 사용됩니다. 이는 또한 질병을 유발하는 미생물체의 분리, 검출 및 식별을 위한 임상 애플리케이션에서도 이용됩니다. 미생물 배양은 조절된 실험실 환경하에서 세포 성장과 분열을 가능하게 합니다. 박테리아 및 다른 미생물은 오염을 방지하기 위한 무균 기법을 활용하여 액상 육즙(broth) 또는 고형 영양소 아가(aga) 배양 배지에서 성장합니다.
클로닝 및 재조합 단백질 발현
세균성 배양은 재조합 단백질 발현, 플라스미드 클로닝과 증폭 그리고 박테리아인공염색체(BAC) 및 코스미드 클로닝에 사용됩니다. 박테리아성 세포는 형질전환을 통해 외인성 유전자와 플라스미드를 흡수하여 통합하도록 변형될 수 있습니다. 수용(competent) 세포의 형질전환은 화학처리된 수용 세포의 전기천공법 또는 열충격을 통해 일반적으로 발생합니다.
형질전환된 세포는 재조합 플라스미드 DNA가 전달하여 획득한 항생제 저항성을 근거로 또는 표지자로서 베타 갈락토시다아제(β-galactosidase)를 발현하는 재조합 박테리아를 확인하기 위해 “청색-백색” 스크리닝을 이용하여 식별되고 선택됩니다. 단백질 발현과 단백질 상호작용을 연구하는 효모이중중합(yeast two-hybrid) 및 리포터 유전자를 위해 효모 역시 전기천공법 및 다른 방법을 이용하여 형질전환될 수 있습니다.
세균 분리 및 식별을 위한 배양
세균 배양은 감염성 질병을 유발하는 세균 및 기타 미생물체의 분리, 검출 및 감별을 위해 의학적으로 중요합니다. 배양법을 활용한 규명화 및 식별법은 세균성 표현형과 유전자형 모두에 의존합니다. 세포는 순수한 군락을 생산하기 위해 획선 플레이트의 접종을 통해 분리될 수 있습니다. 특정 집단의 미생물체 성장을 억제하여 다른 미생물체가 성장하도록 선택성 배지를 이용합니다. 감별 배지는 군락 외형으로 또는 주변 배지의 변화로 미생물체가 시각적으로 구별되도록 하는 화합물을 포함하여 대사활동 또는 용혈활성의 차이점으로 인해 나타납니다. 이러한 배지는 감별과 제거를 통해 세균과 기타 미생물체의 식별을 돕습니다.
관련 기술 문서
- An introduction to microbial media types, uses and applications. Includes formulations and product selection guide.
- Antifoams are supplied as two basic types of composition or mixtures of the two. Organic antifoams are of synthetic origin. Silicone-based antifoams are generally considered to be siloxane polymers and are also synthetic.
- Streptococci- Overview of Detection, Identification, Differentiation and Cultivation Techniques
- Cell lines for vaccine production and cultivation of SARS CoV-2 and other viruses. Primary, human diploid, and continuous culture cell lines for the propagation of viruses and virus-based vaccines.
- Yeast is one of the most important microorganisms known and utilised by mankind. Ancient Middle Eastern civilisations used the organism to bake bread and to produce mead, beer and wine.
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관련 프로토콜
- Technical Article on competent cells. Transformation is a process by which some bacteria take up foreign genetic material (naked DNA) from the environment.
- Initiating a Starter Culture
- General protocols for growth of competent cells in microbial medium.
- The selection of plasmids in yeast is based on the use of auxotrophic mutant strains, which cannot grow without a specific medium component (an amino acid, purine, or pyrimidine)
- In recent years it has been recognized that Listeria is an important public health problem. The disease affects primarily people of advanced age, pregnant women, newborns, and adults with weakened immune systems.
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