효소 결합 면역분석(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, ELISA) 키트

샌드위치, 직접 및 경쟁 ELISAs

머크의 ELISA는 혈청, 혈장, 세포 배양 상층액 또는 용해물을 포함한 다양한 매트릭스에서 가용성 단백질 바이오마커를 연구하기 위한 편리하고 사용자 친화적인 방법입니다. 머크 ELISA는 연구용으로만 사용되고, 인간, 마우스, 쥐 등 다양한 동물 모델(농업 및 반려동물)을 대상으로 1,000개 이상의 어세이를 제공합니다. 각각의 어세이는 96웰 플레이트를 실행하는 데 필요한 특정 프로토콜과 필요한 시약과 함께 제공됩니다. ELISA는 주로 96웰 형식으로 존재하며, 공급 업체가 대상을 검출하고 측정하는 데 필요한 시약을 제공합니다. 샌드위치, 직접 및 경쟁을 포함한 다양한 ELISA 방법이 있습니다.

샌드위치 방법은 동일한 표적에 대해 서로 다른 에피토프에 대한 한 쌍의 단일항체(mAb) 를 사용합니다. 일차 단일항체(mAb)는 플레이트에 결합하여 단백질을 용액에서 추출하고, 이차 단일항체(mAb)는 "샌드위치"를 완성하고 타겟의 존재를 나타내는 신호를 제공합니다. 알려진 양의 재조합 단백질이 키트와 함께 제공되므로 사용자는 샘플 중 하나의 신호를 해석할 표준 곡선을 만들 수 있습니다. 포트폴리오 대다수는 이러한 샌드위치 ELISA 형식으로 되어 있습니다.

직접 ELISA 및 경쟁 어세이는 보다 희귀합니다. 직접 어세이는 단일 mAb를 사용하여 플레이트에 결합된 검체를 검출합니다. 그 후 해당 mAb는 리포터 2차 항체에 의해 결합되어 신호를 제공합니다.

경쟁 어세이는 플레이트에 미리 알려진 양의 바이오마커가 결합되어 있습니다. 표지된 항체가 샘플과 동시에 함께 인큐베이션되며, 샘플 내 타겟 물질의 농도에 따라 항체를 "소모"합니다. 그 후, 유리 항체는 플레이트 상에 있는 항원에 결합할 수 있어 샘플이 세척된 후 신호를 제공할 수 있습니다. 이 경우, 신호는 타겟 바이오마커 농도에 반비례합니다.

Conferma^® ELISAs 및 Belysa^® 면역분석 곡선 피팅 소프트웨어

Conferma^® ELISA 브랜드는 핵심 시약 수준에서 로트 간 변동성을 최소화하도록 설계된 샌드위치 어세이로 구성됩니다. 상세한 품질 관리(QC) 프로토콜과 일치하는 다양한 분석 기술을 사용하여 핵심 시약의 개별 로트를 평가함으로써 시간에 따른 변동성을 통제하고 제한할 수 있습니다.

과학자들이 자신의 방법 재현성을 평가할 수 있도록 머크는 Belysa^® 면역분석 곡선 피팅 소프트웨어를 추가로 설계했습니다. 사용자는 이 도구를 사용하여 샌드위치 면역분석을 검사하여 %CV(변동 계수) 및 %Recovery와 같은 매개변수가 예상대로인지 확인할 수 있습니다. 그 후, 여러 플레이트의 표준 곡선을 비교하여 자신의 방법에 일관성이 있는지 확인할 수 있습니다.